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求助关于PMP衍生化分析多糖的问题。
最近在使用HPLC分析多糖，用的是waters的紫外可见光检测器，之前没做过这方面的实验，实验步骤我都是参照文献来的。
现在有个问题就是我把几种单糖的混标用PMP进行衍生化后上机，用的流动相是乙酸铵和乙腈，但是出峰的时候会在六分钟左右出现一个拖尾极其严重的峰，峰很高，尾巴拖得很长。我一共七种单糖标准品，但是在拖尾峰之后就没其他峰了，在拖得尾巴上倒是还能看到峰。
请教一下这个是什么原因？
补充一下 我测过柱效柱子是没问题的！
具体的衍生化方法是100ul单糖标准品混合液加入100ul 0.3mol/l的NAOH和100ul 0.5mol/lPMP甲醇溶液，70℃水浴30min。加入0.3mol/l HCL，混匀后用1ml氯仿反复萃取三次，水层加纯水至1.5ml，0.45过滤上机。
液相条件是 78:22的乙酸铵：乙腈，等度 流速1ml/min，室温 ，10ul进样
对照空白是有新峰出现的，但是都在拖尾上，我试了减小浓度拖尾仍然严重，如果换色谱柱的有什么好建议么？梯度的话有什么建议么？谢谢！
有什么好的解决方法么？这个拖尾拖得非常严重尾巴能拖小十分钟啊啊啊啊！
谢谢帮助！我用纯水设了空白对照，结果也是有一个大的拖尾，现在我将PMP用量减少了，已经能出来正常的峰图了，但是样品峰后面有小的拖尾峰。
想向您再请教一个问题，我用的柱子是Sun Fire C18 5μm 4.6*150mm，现在我跑的样品有三个单糖的衍生物分不开，单个跑样品的时候出峰时间是有差异的，但是时间离的很近，等到我混合标准品一起跑的时候这三个就分不开了，请问有什么好建议么？
QQ图片26.jpg
QQ图片02.jpg
谢谢帮助和提醒！浓度问题我会注意，现在每次做完实验我都要洗两三个小时的机器…… 我再摸索摸索更好的条件吧！
我最近也在做PMP衍生，试过2mmol的浓度，没有峰出现。3mg/ml 一些单糖能出峰，但是峰型很难看。 楼主请问上样的浓度大概是多少？
柱前衍生化HPLC法测定疏血通注射液及其原药材中糖的含量
请参考文献，写得很详细
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采用pmp柱前衍生法测多糖的单糖组成，有一个糖始终和标准品无法对齐，求助求助！
标准品分别是甘露糖、氨基葡萄糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、氮乙酰氨基葡萄糖、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖、岩藻糖。
采用pmp柱前衍生法测单糖，重复多次，结果都是这样的，在Man峰后边的小鼓包一直存在，那到底是什么？还有介于GalA和GlcNA之间的那个大峰，到底是什么糖呢？
急求各位大神，已困扰多日不得法！！谢谢各位虫友！
93BC.tm.png
谢谢您。是的，红色是十一糖混合标品，蓝色是样品的图。空白衍生图没有做过呢，我们实验室一直都是做标品和样品的对比，没有做过空白，请问是用什么做空白？
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L-古罗糖醛酸单糖标准品 D-Octamannuronic Acid Octasodium Salt
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D-Octamannuronic Acid Octasodium Salt
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L-古罗糖醛酸单糖标准品&D-Octamannuronic Acid Octasodium Salt&&哪里能买到聚古罗糖醛酸寡糖标准品？上海子起生物&400-811-9081提供的是由β-D-聚甘露糖醛酸(M)和α-L-聚古罗糖醛酸(G)组成的线型低聚合物，有聚甘露糖醛酸（PM）、聚古罗糖醛酸（PG）和杂合褐藻寡糖（PMG）三种类型产品。褐藻胶寡糖具有多项生物学功能，在医药、食品、日化、饲料和农业方面有广泛的应用。L-古罗糖醛酸单糖标准品&D-Octamannuronic Acid Octasodium Salt&&哪里能买到聚古罗糖醛酸寡糖标准品？产品订购详情：订购热线&4OO_ &811 _ &9081中英文名称：L-古罗糖醛酸单糖标准品&D-Octamannuronic Acid Octasodium Salt货号：1016006分子式：C6H9O7Na分子量：216.12储存方法：2-10℃级别：98% HPLC包装：10mg/支&其他规格&电话咨询4OO_ &811 _ &9081L-古罗糖醛酸单糖标准品&D-Octamannuronic Acid Octasodium Salt&&哪里能买到聚古罗糖醛酸寡糖标准品？生物学功能【抗肿瘤】褐藻胶寡糖对非特异性免疫或特异性免疫系统具有良好的激活和促进作用，能激活巨噬细胞，激活后具有细胞毒作用，可抑制肿瘤细胞增殖从而杀死肿瘤;【抗凝血】肝素作为一种有效的抗凝剂在临床上的副作用逐渐显示出来。褐藻胶寡糖保持了良好的抗凝活性，又有较小的副作用;L-古罗糖醛酸单糖标准品&D-Octamannuronic Acid Octasodium Salt&&哪里能买到聚古罗糖醛酸寡糖标准品？【降血糖血脂】合适剂量的褐藻胶寡糖能较好地防止高胆固醇血症的形成，有降脂、维护心血管正常功能的作用:【抗自由基】氧化褐藻胶寡糖不仅具有清除活性氧的作用，还能够显著降低脂质过氧化物的含量，提高过氧化物酶和超氧化物歧化酶的活性，具有清除过多自由基与抗脂质过氧化的作用;【抗炎症】褐藻胶寡糖来源丰富，理论上是sLex&、sLea和肝素寡糖的良好抗炎替代品、具有良好的潜在药用价值;【免疫调节活性】:褐藻胶寡糖能刺激各种免疫活性细胞(如巨噬细胞、T淋巴细胞、B淋巴细胞等)的分化、成熟、繁殖，使机体的免疫系统得到恢复和加强，并能通过免疫调节作用发挥多种生理活性。L-古罗糖醛酸单糖标准品&D-Octamannuronic Acid Octasodium Salt&&哪里能买到聚古罗糖醛酸寡糖标准品？【促进生长作用】:褐藻胶寡糖在植物体内也是重要的信号分子，可促进植物的生长，而且可提高植物对病虫害的抵抗力。D-甘露糖醛酸单糖&&&& D-mannuronicacidsodiumsalt&& 10mgD-甘露糖醛酸二糖&&&& D-dimannuronicaciddisodiumsalt&&& 10mgD-甘露糖醛酸三糖&&&& D-trimannuronicacidtrisodiumsalt&& 10mgD-甘露糖醛酸四糖&&&& D-tetramannuronicacidtetrasodiumsalt& 10mgL-古罗糖醛酸单糖标准品&D-Octamannuronic Acid Octasodium Salt&&哪里能买到聚古罗糖醛酸寡糖标准品？D-甘露糖醛酸五糖&&&& D-pentamannuronicacidpentasodiumsalt&&&&& 10mgD-甘露糖醛酸六糖&&&& D-hexamannuronicacidhexasodiumsalt& 10mgD-甘露糖醛酸七糖&&&& D-heptamannuronicacidheptasodiumsalt&&&&& 10mgD-甘露糖醛酸八糖&&&& D-octamannuronicacidoctasodiumsalt&&& 10mgD-甘露糖醛酸九糖&&&& D-nonamannuronicacidnonasodiumsalt& 10mgD-甘露糖醛酸十糖&&&& D-decamannuronicaciddecasodiumsalt& 10mgD-聚甘露糖醛酸钠&&&& D-polymannuronicacidsodiumsalt&& 10mgL-古罗糖醛酸单糖标准品&D-Octamannuronic Acid Octasodium Salt&&哪里能买到聚古罗糖醛酸寡糖标准品？褐藻胶寡糖用途：用于褐藻寡糖在医药、食品、水产养殖、现代农业、日用化工和生化试剂等领域新产品的开发；聚甘露糖醛酸寡糖的检验分析和质量控制的对照品；寡糖芯片的制备研究；寡糖与蛋白的相互作用研究；寡糖药物的构效关系和作用机理研究等糖化学与糖生物学研究领域。另外子起生物还常年提供以下标准品：订购电话&400-811-9081中文品名&&&&&&英文品名& &&&纯度&&&&&&规格&&&&&L-古罗糖醛酸单糖标准品&D-Octamannuronic Acid Octasodium Salt&&哪里能买到聚古罗糖醛酸寡糖标准品？壳二糖&& Chitobiosehydrochloride&& CAS: 577-76-4&&& &&&& &97%& 10mg壳三糖&& Chitotriosehydrochloride&& CAS:
&&&& &98%& 10mg壳四糖&& Chitotetraosehydrochloride&&&& &98% 10mg壳五糖&& Chitopentaosehydrochloride&&& CAS:
&&&& &97%& 10mg壳六糖&& Chitohexaosehydrochloride&&&& CAS: && &96%&&&& 10mg壳七糖&& Chitoheptaosehydrochloride&&& CAS:
10mg壳八糖&& Chitooctaosehydrochloride&&&& &95% 10mg壳九糖&& Chitononaosehydrochloride&&&& &93% 10mg壳十糖&& Chitodecaosehydrochloride&&&& &93% 10mgL-古罗糖醛酸单糖标准品&D-Octamannuronic Acid Octasodium Salt&&哪里能买到聚古罗糖醛酸寡糖标准品？壳寡糖(dp3-7)&&& Chito-oligosaccharides(dp3-7)hydrochloride&&&& &97%& 1g木二糖&& Xylobiose&&&& &98% 10mg木四糖&& Xylotetraose&&&& &97% 50mg木五糖&& Xylopentaose&&&& &97% 10mg木六糖&& Xylohexaose&&&& &96%&& 10mg全乙酰化的壳二糖Peracetylatedchitobiose& & & &96%&&&&& 10mg全乙酰化的壳三糖&&&& Peracetylatedchitotriose
&97% 10mg全乙酰化的壳四糖Peracetylatedchitotetraose -6&& &&&& &97%& 10mgL-古罗糖醛酸单糖标准品&D-Octamannuronic Acid Octasodium Salt&&哪里能买到聚古罗糖醛酸寡糖标准品？全乙酰化的壳五糖&&&& Peracetylatedchitopentaose&&&& &96%&&&&& 10mgL-古罗糖醛酸单糖&&&&& L-guluronicacidsodiumsalt 10mg全乙酰化的壳六糖&&&& Peracetylatedchitohexaose&&&& &95% 10mg全乙酰化的壳七糖&&&& Peracetylatedchitoheptaose&&&& &95%&&&&& 10mgN-乙酰化的壳二糖&&&& N-acetylatedchitobiose&&&& & &&&& &96% 10mgN-乙酰化的壳三糖&&&& N-acetylatedchitotriose&&&& & &&&& &97%10mgN-乙酰化的壳四糖&&&& N-acetylatedchitotetraose &&& &&&& &97% 10mgN-乙酰化的壳五糖&&&& N-acetylatedchitopentaose&&&&& & &&&& &96% 10mgL-古罗糖醛酸单糖标准品&D-Octamannuronic Acid Octasodium Salt&&哪里能买到聚古罗糖醛酸寡糖标准品？N-乙酰化的壳六糖&&&& N-acetylatedchitohexaose & &&&& &95% 10mgN-乙酰化的壳七糖&&&& N-acetylatedchitoheptaose&&&& &95% 10mgL-古罗糖醛酸二糖&&&& L-diguluronicaciddisodiumsalt& 10mgL-古罗糖醛酸三糖&&&& L-triguluronicacidtrisodiumsalt 10mgL-古罗糖醛酸四糖&&&& L-tetraguluronicacidtetrasodiumsalt&&&&& 10mgL-古罗糖醛酸五糖&&&& L-pentaguluronicacidpentasodiumsalt&&& 10mgL-古罗糖醛酸六糖&&&& L-hexaguluronicacidhexasodiumsalt&&&&& 10mgL-古罗糖醛酸七糖&&&& L-heptaguluronicacidheptasodiumsalt&&& 10mgL-古罗糖醛酸单糖标准品&D-Octamannuronic Acid Octasodium Salt&&哪里能买到聚古罗糖醛酸寡糖标准品？L-古罗糖醛酸八糖&&&& L-octaguluronicacidoctasodiumsalt& 10mgL-古罗糖醛酸九糖&&&& L-nonaguluronicacidnonasodiumsalt&&&&& 10mgL-古罗糖醛酸十糖&&&& L-decaguluronicaciddecasodiumsalt 10mgL-聚古罗糖醛酸&& L-polyguluronicacidsodium&&&&& 10mg新琼二糖&&&&& Neoagarobiose&&& 484-58-210mg新琼四糖&&&&& Neoagarotetraose&&&& mgL-古罗糖醛酸单糖标准品&D-Octamannuronic Acid Octasodium Salt&&哪里能买到聚古罗糖醛酸寡糖标准品？新琼六糖&&&&& Neoagarohexaose&&&& mg新琼八糖&&&&& Neoagarooctaose 10mg新琼十糖Neoagarodecaose&&&& 10mg新琼十糖&Neoagarodecaose&&& 50mg新琼十二糖&& Neoagarododecaose& 10mg新琼十四糖&& Neoagarotetradecaose&&&& 10mg琼胶三糖&&&&& Agarotriose& -610mg琼胶五糖&&&&& Agaropentose&&&& -910mgL-古罗糖醛酸单糖标准品&D-Octamannuronic Acid Octasodium Salt&&哪里能买到聚古罗糖醛酸寡糖标准品？
上海子起生物科技是一家集贸易、科研、服务于一体的高科技企业，专业致力于化学分析、食品、环境、医药、化工、生命科学领域内的高品质分析、验证标准品、对照品、特种高分子材料、实验室设备和耗材等科研用品的集成供应商。公司有一批具有资深行业背景和丰富市场经验的专业人士组成，主要为企事业单位、科研机构、药物研发和生产企业等提供高品质化学品、仪器和耗材等；产品主要应用在食品、制药 、生物医药、精细化工、新能源、新材料、环境化学、现代农业、生物工程、生物化学等诸多领域。子起生物以完善和全面的产品线和专业的工作团队、贴心的服务、优质的产品、合理的价格以及顾问式的服务理念得到了众多客户的信任和一贯支持，并建立起中长期的合作关系.我们一直众多国际知名化学产品、医药中间体、检测机构保持良好而及时的沟通，建立了战略合作关系。积极将国际一流产品和技术引入国内，为国内客户以作工具和技术交流。
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