各位前辈和她,实验室用的特级胎牛血清是国产还是进口的呀?

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实验室常用几款胎牛血清(gibco hyclone)的比较
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一、特级类胎牛血清(最高级别的,专用于干细胞的胎牛血清) &1、Hyclone 北美特级胎牛血清(SH30070.03)&&& 目前,性能最好的血清,实验室反馈不错的,那就是Hyclone SH30070.03的特级胎牛血清, Hyclone的&头牌&。  &&& 这款血清--Hyclone特级胎牛血清(Defined FBS),货号:SH30070,是世界上唯一经过40纳米过滤的顶级胎牛血清,极佳的促细胞生长作用及产品稳定性。内毒素含量小于10EU/ml,血红蛋白含量小于10mg/dl。此血清可以广泛用于各种细胞培养,包含任何干细胞系的培养。2、Gibco北美特级胎牛血清()&&& invitrogen公司在美国原装生产的特级胎牛血清,货号:,是100nm过滤3次,内毒素和血红蛋白含量都可以与Hyclone的SH30070.03相媲美。也可以用于培养大部分的干细胞系。二、优等类胎牛血清1、Hyclone加拿大优等胎牛血清(SH30396)&& 性价比最高的是Hyclone加拿大优等胎牛血清(Characterizend FBS),货号:SH30396,血清采自加拿大,由Hyclone公司总部的员工采集加工,采集方法,加工过程,检定标准与美国原产优等胎牛血清完全一致,市场价格低于美国原产的。经过3次100nm过滤,内毒素含量小于25EU/ml,血红蛋白含量小于25mg/dl。此血清,在2005年以前,是很多实验室选择血清的首选,价格适中,质量过硬,应用细胞非常广泛。2、Hyclone澳大利亚优等胎牛血清(SH30084)基本与加拿大的优等血清是一样的,级别也非常相似,各种级别都有。3、Gibco澳大利亚胎牛血清()与Hyclone澳大利亚胎牛血清差不多,市场价也是3200元/500ml左右。这一级别的血清,也能用于干细胞培养,可是,不象特级胎牛血清那么优秀。三、普通进口胎牛血清 Hyclone南美胎牛血清(SV30087)&&&& && 目前市场上用的最多的Hyclone血清是南美胎牛血清(FBS) SV30087 ,此血清采自南美,在国内(兰州)过滤并测试检验,经三次100纳米过滤,根据中国商标法的规定标贴中文标签,内毒素含量小于等于10EU/ml,血红蛋白含量小于等于20mg/d。此血清广泛用于各种肿瘤细胞的培养,还没有资料记载能够用于干细胞,也听说有少数人用于干细胞培养的,不过,因为本身血红素比较高,所以,最好不要用于干细胞,四、国产的各种系列胎牛血清&&& 国产的胎牛血清,国内没有严格意义的胎牛血清,胎牛血清本身是需要穿刺取血的,而国内都是剖腹产出胎牛,8小时左右取血,然后,进行过滤分装。所以,国产的胎牛血清不是严格意义的胎牛血清。不过也很多实验室使用,具体情况那就看实验的要求了。五、其他血清  &&& 新生牛血清,小牛血清,一般国产的,效果也还是不错的,不过,最好不要用于细胞培养,这些血清,大多是用于封闭液、保护液、缓冲液等等用途的。我公司血清方面常备现货如下:胎牛血清(FBS) GIBCO经过认证的特级胎牛血清(Fetal Bovine Serum, Certified)& gibco000044 美洲血源& 500ml 经过质量认定的优级胎牛血清(Fetal Bovine Serum, Qualified)& gibco099141 澳洲血源& 500ml 经过认证的胎牛血清,0ml,美国来源经过质量认定的胎牛血清,0ml,澳大利亚来源经过质量认定的胎牛血清,& 100ml 符合美国农业部进口要求的国家经过认证和热灭活的胎牛血清,0ml,美国来源经过质量认证和热灭活的胎牛血清,0ml,符合美国农业部进口要求的国家(墨西哥、中美洲)经过质量认证和热灭活的胎牛血清,0ml,符合美国农业部进口要求的国家(墨西哥、中美洲)经过质量认证和热灭活的胎牛血清,0ml,澳大利亚 Hyclone南美胎牛血清,SV& SV新西兰胎牛血清,SH& SH澳大利亚优等胎牛血清,澳洲血源,SH0北美特级胎牛血清,SH0加拿大血源胎牛血清,SH0& SH0特殊胎牛血清&& Gibco适合于胚胎干细胞的胎牛,& 500ml,美国来源适合于胚胎干细胞的胎牛,0ml,美国来源适合于胚胎干细胞的胎牛,0ml,符合美国农业部进口要求的国家(墨西哥,中美洲)透析胎牛血清,0ml,美国来源透析胎牛血清,0ml,美国来源适合于胚胎干细胞的胎牛,0ml,符合美国农业部进口要求的国家(墨西哥、中美洲)适合于胚胎干细胞的胎牛,0ml,符合美国农业部进口要求的国家(墨西哥、中美洲)间充质干细胞的胎牛血清,0ml,美国来源间充质干细胞的胎牛血清,0ml,符合美国农业部进口要求的国家(墨西哥,中美洲)&& Hyclone活性炭/葡聚糖处理胎牛血清(CHARCOAL/DEXTRAN TREATED FBS),美国来源,SH0& SH0透析胎牛血清(FETAL BOVINE SERUM),美国来源,SH0& SH0标准胎牛血清(STANDARD FETAL BOVINE SERUM),SH0& SH0胚胎干细胞(ES)专用胎牛血清( FETAL BOVINE SERUM CHARACTERIZED ),美国来源,SH30070.03E& 100ml& 500新生牛血清& &hyclone新西兰新生牛血清,SH& SH0 SH0新西兰新生牛血清(热灭活),SH30401.01HI 500 SH30401.02HI 1000新西兰新生牛血清(照射),SH30401.01IR 500 SH30401.02IR 1000新西兰补铁新生牛血清,SH SH SH0新西兰补铁新生牛血清(热灭活),SH30626.02HI 500 SH30626.03HI 1000新西兰补铁新生牛血清(照射),SH30626.02IR 500& SH30626.03IR& 1000&& 国产特级新生牛血清(已灭活), 100ml 500特级新生牛血清(已辐射), 100ml 500特级新生牛血清(已灭活,已辐射), 100ml 500优级新生牛血清(已灭活), 100ml 500优级新生牛血清(已辐射), 100ml 500优级新生牛血清(已灭活,已辐射), 100ml 500新生牛血清(无支原体),200ml新生牛血清(低内毒素),200ml小牛血清& hyclone新西兰促生长小牛血清, SH0新西兰促生长小牛血清,热灭活,SH30591.01HI 100新西兰加强型小牛血清,SH&& SH0新西兰加强型小牛血清,热灭活,SH30413.02HI 500& SH30413.03HI 1000新西兰加强型小牛血清,照射,SH30413.02IR& 500& SH30413.03IR 1000&国产标准小牛血清马血清&国产&马血清,多种规格猪血清&国产&猪血清,多种规格鸡血清&国产&鸡血清,多种规格兔血清&国产&兔血清,多种规格豚鼠血清国产&豚鼠血清,多种规格山羊血清国产&山羊血清,多种规格绵羊血清国产&绵羊血清,多种规格大牛血清国产&大牛血清,多种规格&具体库存情况还请电话联系核实,还有一些没有一一列出,请拨打销售热线:021- 875103咨询!(上海玉博生物科技有限公司提供)
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影响胎牛血清质量的几大因素
市场上的胎牛血清种类繁多,鱼龙混杂,很多科研工作者,特别是刚接触细胞培养的人,难以分辨血清质量的优劣。根据牛人十多年来血清生产销售的经验,总结如下:
一、外观拿到血清,最先接触的是血清外观,对于缺少细胞培养经验的人来说,外观的判断尤为重要1、颜色根据血红蛋白含量的不同,胎牛血清可表现出黄色或红色,我国的细胞培养用血清标准是不高于20mg/dl,实际上,血红蛋白含量的高低对血清并无直接影响,这个指标的意义在于能体现出采血过程的严谨规范程度,良好的操作能降低血清的溶血。国产血清的采血点很分散,大多是由屠户采血后马上离心收集,所以很少会有溶血,表现出明亮的蜡黄色,当然,国产血清也很少有标准意义上的胎牛血清。进口胎牛血清或多或少总有点溶血,因为真正的胎牛血清凝血功能差,红细胞容易破裂。总的来说,国产的血清呈现出蜡黄。进口的血清,质量最好的呈现出谈黄、微红色,如Gibco 16000,差点的呈现出橘红色或鲜红色。当然,热灭活血清或保存不当的血清,由于血红蛋白的破坏氧化,会呈现出暗红,甚至咖-啡色。2、沉淀很多血清客户,会发现进口血清有沉淀,从而怀疑血清的质量问题,这是没有根据的。血清中的沉淀是由纤维蛋白的凝聚产生,对血清质量没有任何影响,沉淀的产生原因很多,和厂家的加工生产方式密切相关。国产的血清,大多来自北方,由于价格低廉,保存环境都不好,从采血、冷冻、运输到生产会经过多次冻融,每次冻融过程,就会析出部分纤维蛋白沉淀,这样,血清成品过滤后看起来反而更加的“干净”,很少有沉淀产生。进口的胎牛血清,过滤分装前很少会反复冻融,生产后的成品也是清澈的,但随着时间的推移,血清中的大量纤维蛋白会析出形成沉淀。当然,进口的新生牛血清,一般牛龄都在2周左右,血清中的各种蛋白含量明显偏高,生产后血清可能会浑浊,甚至有大量沉淀。当然,购买回来的血清都是冰冻状态,使用时需要融化,融化过程最好在温度较低的状态下慢慢进行,否则沉淀相对较多,虽然沉淀并不直接影响血清的质量,但对细胞的显微观察有一定的阻碍。3、澄清度进口胎牛血清由于蛋白和脂类等物质含量低,表现为稀薄、清淡,而国产血清,因为绝大多数是新生牛血清,相对而言更加粘稠,颜色略深,这对于初步接触血清的人很难判断,但把两者进行对比,可容易分辨。二、主要技术指标目前国内血清的质量标准是2005版的《中华人民共和国药典》,主要指标有以下几点:1、内毒素标准为不高于5EU/ml。内毒素是细菌破碎后细胞壁的成分,因此内毒素含量的高低可表现出采血到生产一系列过程中的无菌操作情况。目前,国产血清基本都能达到这一要求,很多进口胎牛血清内毒素含量反而更高,如Gibco 26140,只要求不高于50EU/ml,高出我国标准10倍,即使是16000,也要10EU/ml,血清质量也未见影响。可见,内毒素含量偏高不影响质量,除非含量极高,预示着已经污染。2、总蛋白含量胎牛血清一般范围是30-40mg/ml,数值偏高,说明采血的牛龄偏大,不是胎牛,数值偏低,表明血清可能掺水了。3、血红蛋白标准为不高于20mg/dl,颜色越红,数值越高,反之,数值越低。4、pH国产血清,大多高于7.5,进口胎牛血清,大多低于7.5,具体原因未知,可能和牛龄有关,这也能用来初步鉴别血清的来源。5、微生物包括细菌、霉菌、支原体、噬菌体、各类病原性病毒等。随着国内血清厂家生产条件的改善提高,细菌、霉菌等“大型”微生物几乎能100%控制,支原体经过0.1um过滤,大多也能清除。大肠杆菌噬菌体的污染还是比较严重的,主要是生产环境过程中带入,又无法过滤,很难彻底清除,但对血清质量影响不大。病原性病毒,特别是BVDV,在国产血清中几乎90%以上都存在,这类微生物是影响国产血清质量的重要因素之一,而进口胎牛血清中基本都控制的很好。6、免疫球蛋白国产血清的只是定性检测,结果也很不准确,进口胎牛血清大多定量检测。免疫球蛋白的数值能完全体现出采血的时的牛龄情况,国产血清,基本都是新生牛的,血清中容易产生IgM,IgG的含量也偏高,进口胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也较低。7、其它不管是国产还是进口血清,都是不测抗生素的(无四环素胎牛血清除外)。国外,抗生素的使用很严格,用量也很少,每头奶牛的产品包括血清都可以溯源的,因此可以做到胎牛血清中不含抗生素或含量极低;国内,抗生素的滥用已成了普遍现象,血清中残留很高,对细胞培养极为不利,这是国产血清质量差的根本原因。三、血源市场上的血清血源主要分为中国、北美、南美和澳洲。1、国产血清质量差,这是公认的,主要原因并不是生产厂家的责任,而是天然环境差和抗生素的大量使用。国内环境污染严重,同时饲养过程中抗生素极其滥用,有毒有害物质会大量残留在血清中,最终不利于细胞的生长。2、南美血清,来源很多,如Bioind的巴拿马、Gibco的乌拉圭、巴西等,这些血清由于采血的不可控性,质量参差不齐,当然,相对于国内血清来说好的多。另外,国内销售的南美血清大多颜色鲜红,如、Gibco、Hyclone等品牌,但阿根廷的血清例外,这可能和各国的采血、生产工艺有关。3、北美血清,主要来自美国和加拿大,如Hyclone的SH30396、SH30070、SH30071、Gibco的、等。这类血清,等级越高的颜色越淡,表现为淡黄中带一点微红,SH30070和SH30396对比就很明显,特级胎牛血清基本就能进行干细胞培养。北美血清还有一个显著特点就是每瓶血清都能溯源,这对一些大型的疫苗厂、药厂尤为重要。4、澳洲血清,来源主要是新西兰和澳大利亚,这是在北美血清禁运之后进入中国市场的,一般不具有溯源功能,由于生产、运输等原因,价格相对来说比较贵。拿Gibco的10099和16000相比较,后者质量等级更高,颜色更淡,性价比更高。
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【求助】Hyclone的特级胎牛血清的分装
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这个帖子发布于5年零188天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
买的血清,需要分装。有同学告诉我,需要从-20℃到4℃再到室温,使血清融化。急求更加详细的步骤!!!有人说需要灭活,可又有人说这种进口的特级血清不需要灭活,急求!!!!
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理论上来讲,血清应该由-20℃到4℃再到水浴,等到血清完全溶解且无絮状浑浊后,摇匀分装,据经验,500ml血清在4℃完全解冻需要约36h,这时多半会有血清不溶物,再将其置于水浴中至完全溶解。将冰冻的血清直接水浴解冻,易造成血清质量下降。但是,实验室急用血清时都是直接水浴解冻,因为细胞本身还算泼辣,没出现什么问题。建议楼主按常规步骤来进行。灭活是冲着血清中的补体而去的,我的建议是成品血清无需灭活。经验不足仓促灭活的结果是导致血清出现不可逆的质量下降。虽然不知血清的生产工艺中有没有补体灭活这一步,但是就补体反应本身而言,启动条件太多了——补体作用的三个途径——经典、旁路、MBL,其中没有抗原抗体反应,经典途径不会发生;甘露糖常见于细菌表面,培养的细胞不会有,MBL途径也不会发生;剩下的旁路途径,血清的C3蛋白含量我不清楚,但关于C3蛋白的自我裂解,生成的C3b本身就容易被血清中酶类灭活,即使黏附到细胞表面,比如人体细胞表面的衰变加速因子(DAF)也会灭活C3Bb,而保护素CD59也能够把几乎成型的膜攻击复合物(MAC)打掉。
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deron 理论上来讲,血清应该由-20℃到4℃再到水浴,等到血清完全溶解且无絮状浑浊后,摇匀分装,据经验,500ml血清在4℃完全解冻需要约36h,这时多半会有血清不溶物,再将其置于水浴中至完全溶解。将冰冻的血清直接水浴解冻,易造成血清质量下降。但是,实验室急用血清时都是直接水浴解冻,因为细胞本身还算泼辣,没出现什么问题。建议楼主按常规步骤来进行。灭活是冲着血清中的补体而去的,我的建议是成品血清无需灭活。经验不足仓促灭活的结果是导致血清出现不可逆的质量下降。虽然不知血清的生产工艺中有没有补体灭活这一步,但是就补体反应本身而言,启动条件太多了——补体作用的三个途径——经典、旁路、MBL,其中没有抗原抗体反应,经典途径不会发生;甘露糖常见于细菌表面,培养的细胞不会有,MBL途径也不会发生;剩下的旁路途径,血清的C3蛋白含量我不清楚,但关于C3蛋白的自我裂解,生成的C3b本身就容易被血清中酶类灭活,即使黏附到细胞表面,比如人体细胞表面的衰变加速因子(DAF)也会灭活C3Bb,而保护素CD59也能够把几乎成型的膜攻击复合物(MAC)打掉。您的回答相当精彩,谢谢了,学习了
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kevinlyn 您的回答相当精彩,谢谢了,学习了补充一篇相关的文献。里面提到的“C3 is undetectable”
(1501.59k)
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deron edited on
deron的解释让我学习了。谢谢
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deron 补充一篇相关的文献。里面提到的“C3 is undetectable”学习了,谢谢
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关于丁香园进口胎牛血清步骤_百度知道

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