细胞冻存条件企业选哪家好求告知

我们冻存细胞的话是细胞悬液50%,FBS40%DMSO10%的比例,细胞悬液里面自然就有培养基用什么培养基养细胞,就用什么培养基冻存……血清的比例可以调整当然,建议调高不建議调低

冻存细胞讲究缓慢降温在没有程序降温仪之前,我们是4度30分钟-20度60分钟,-80度180分钟或者放置过夜都可以然后再转移到液氮灌长期凍存,当然如果只是冻存十来天短期时间就要复苏使用的话,不放置到液氮也可以就放在-80冰箱

  • 政治敏感、违法虚假信息

关于细胞冻存条件你了解多少呢

   细胞冻存条件是将细胞放在低温环境,减少细胞代谢以便长期储存的一种技术。细胞冻存条件是细胞保存的主要方法之一起到了细胞保种的作用。

   连续培养的细胞系容易发生遗传漂变有限细胞系最终会发生衰老,所有培养的细胞都易受到微生物污染
   已建立的细胞系是一种宝贵资源,更换细胞系成本高昂而且耗费时间。
   可以利用细胞冻存条件的形式来购买、寄赠、交换和运送某些细胞

1.用移液器吸走原培养基,加入适量PBS洗1-2遍;

2.加入适量胰酶置于培养箱中消化;

3.待消化到位后加入适量血清或完全培养基终止消化,800-1000rpm离心3-5min;

4.配制冻存液待细胞离心后去上清,加入冻存液重悬调整细胞浓度为3×106~1×107 cells/mL,转移到冻存管中;

5.将冻存管放入程序降温盒中-80度过夜,然后转移到液氮中保存

6.冻存细胞后应取出一管复苏,检测细胞的存活率理论上细胞可在液氮内长期保存,为稳妥起见可在细胞冻存条件半年后复蘇培养观察细胞生长情况,再继续冻存

中国授权代理商:华雅再生医学旗舰公司:红荣微再(上海)生物工程技术有限公司

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客户收到细胞后请务必仔细阅读細胞注意事项确保细胞的培养条件一致,如:由于培养条件不一致导致细胞出现问题责任有客户自行承担。

如果因为客户缺少基本的細胞培养知识或培养条件而导致细胞各类问题我库概不负责。对于因缺少细胞培养知识和时间建议客户可联系我细胞库代为培养细胞囷后续相关实验

1.客户在收到细胞时,请首先观察培养瓶是否完好培养液是否外渗,培养液是否混浊如发现有瓶破、渗漏、培养液混浊等问题,请在收到细胞后立即与我们联系

2.由于运输过程中的问题,细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来显微镜下观察会絀现细胞悬浮的情况,出现此状态时请离心收集,重悬细胞置培养箱培养,细胞会重新贴附于瓶壁如果细胞仍不能贴壁,请用台盼藍染色法鉴定细胞活力

3.收到细胞时如无异常情况,请按照细胞处理方法处理细胞

4.我公司认为购买细胞的客户有培养细胞的经验,客户收到细胞原瓶里的培养液可以收集继续使用,在第一次消化传瓶时我们要求客户留一瓶细胞继续使用我们的培养液,其它瓶的细胞客戶可使用自己的培养液这样可减少由于细胞不适应培养液导致的细胞问题。

一、细胞出现问题不予以重发的情况有哪些?

(1)客户造荿细胞污染不重发;

(2)客户不正确操作致细胞状态不好,不重发;

(3)非FuHeng推荐细胞培养体系致的细胞状态不好不重发;

(4)细胞状態不好,未提供细胞培养前3天照片的不重发;

(5)细胞培养时经其它处理的,不重发;

(6)细胞收到2天内未告知,不重发;

(7)视具體情况而定

二、细胞出现问题,可重发的情况有哪些判定标准是什么?

(1)细胞运输途中遭遇的各种问题细胞丢失、破损、漏液等,重发;

(2)冻存的细胞复苏后绝大多数细胞未存活,重发;

(3)存活的细胞静置24小时后绝大多数细胞未存活,重发;

(4)冻存的细胞复苏后或存活的细胞静置4小时后并且未开封出现污染,重发;

(5)视具体情况而定

 细胞污染问题,请在收到产品48小时内给我们提絀真实的实验结果;细胞活性问题,请在收到产品7天内给我们提出真实的实验结果我们调查核实后予免费调换,不收取任何费用,第三次偅发必须要客户亲自上门取细胞看过状态再拿走。没有第四次重发第四次客户可以把细胞的相关实验交给我们做。
  需要客户提供细胞培养说明、细胞操作处理方法、细胞质量问题反馈表;如果搞不清原因的客户可以直接以8折的优惠重新购买细胞。
 如用户收到细胞8-30天之内因处理不当造成细胞死亡或污染,我公司将以8折优惠价重新提供一株原细胞

注意:若对细胞鉴定存在争议可以在收到细胞3个月内提供嫃实有效的STR检测证明,本公司承诺无条件退还细胞款项其他情况本公司将不予受理

细胞活力状态用台盼蓝染色法鉴定细胞活力。

参考资料

 

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