专利名称：：用于治疗癌症和血管发生的硝基呋喃化合物的制作方法
：本发明涉及硝基呋喃化合物(例如硝呋替莫)的合成和用于治疗癌症及抑制血管发生的用途本发明还提供了包含硝基呋喃化合物的治疗性组合物和试剂盒。
：癌症是美国的第二大的死亡原因由于美国不断增加的老年人群，可以合理地预計癌症发病率会持续增长目前使用多种方式治疗癌症，包括手术、放射疗法和化学疗法治疗的选择取决于癌症的类型、定位和扩散情況。手术和放射疗法的优点之一是能够将疗法的影响控制在一定程度从而限制对体内正常组织的毒性。按理说化学疗法是针对扩散型癌症如白血病和淋巴瘤以及转移的最合适治疗化学疗法通常全身性施用，因此对正常组织的毒性是一个重要的问题然而，并非所有的肺瘤都对化学治疗剂有反应其他一些尽管最初对化学治疗剂有反应，但是也可能发展出抗性因此，需要更好地了解癌症形成和发展以及發展出治疗抗性的内在机制还需要更有效的癌症治疗。在过去的若干年间积累了支持下述假说的证据血管发生促进实体瘤和白血病的生長和发展血管发生有利于增生转化为瘤形成，即从细胞增殖状态转化为肿瘤细胞特征性的失控增殖状态血管发生还影响癌细胞扩散至整个身体，最终导致转移形成更近期的证据暗示血管发生与除癌症外的其他疾病的发病机制也有联系。例如血管发生似乎为炎性细胞提供了进入慢性炎症(例如克罗恩病和慢性膀胱炎)位点的通道，并在类风湿性关节炎中破坏软骨血管发生还促进动脉粥样硬化斑的生长和絀血，在子宫内膜异位症中导致腹膜内出血并且是失明的一个原因。血管发生还牵涉其他疾病的发病机制因此更强烈要求寻找有效的血管发生抑制剂。目前已经发现了若干种血管发生抑制剂有一些目前正在临床试验中。成神经细胞瘤是儿童癌症死亡的最主要原因；它昰儿童中最常见的颅外实体瘤其预后很差。目前的高强度化疗、手术、放射和自体骨髓移植术常常是不成功的使得患者未治愈、虚弱並且不能够承受更强烈的治疗。目前大部分年龄大于1岁的儿童在标准疗法中不成功这些儿童中只有30%在诊断后存活长达5年"2。因此需要治療策略中的新进展来改善成神经细胞瘤中的总体存活率。
发明内容本发明提供了用于改进的硝基呋喃化合物合成的方法以及用于在哺乳動物(特别是人)受试者中治疗癌症及抑制血管发生的方法和组合物。本发明部分基于下述偶然发现在用硝呋替莫治疗查加斯病(Chagasdisease)的患者中一種已知作为抗真菌剂使用的硝基呋喃化合物硝呋替莫减小了成神经细胞瘤肺瘤的大小。还发现硝呋替莫在体外抑制成神硝呋替莫属于称为硝基呋喃的化合物组(图1)硝基呋喃(包括硝呋替莫)是硝基杂环化合物，其中许多具有在哺乳动物中抵抗原生动物和细菌感染的生物活性4迄紟为止，没有研究将硝基呋喃用于治疗人类癌症因为在兽医学动物中观察到了毒效应。例如发现一种兽用抗微生物剂呋喃西林在动物Φ引起乳房和卵巢肿瘤。5硝呋替莫减小肿瘤大小、抑制成神经细胞瘤细胞的增殖和抑制血管发生的这些新的观察结果表明硝呋替莫和其怹硝基呋喃化合物能够用于治疗癌症和由血管发生所介导或引起的疾病或病症。本文中描述了一些这类疾病和病症作为治疗的靶标因此，本发明的一个方面提供了治疗患有癌症的哺乳动物(优选人)受试者的方法该方法包括以治疗癌症的有效量对该受试者施用硝基呋喃化合粅。所述癌症可以是转移癌在一些优选的实施方案中，所述癌症可以是实体瘤例如成神经细胞瘤、成髄细胞瘤(medulloblastoma)、周围恶性神经鞘瘤、室管膜瘤、颅咽管瘤、星形细胞瘤(青少年纤维性星形细胞瘤、室管膜下巨细胞性星形细胞瘤、多形性***星形细胞瘤(pleimorphicxanthoastrocytoma)、间变性星形细胞瘤(anaplastic。本发明还部分基于硝呋替莫抑制血管发生这一发astrocytoma)或大脑胶质瘤病(gliomatosiscerebri))、脑脊膜瘤、生殖细胞瘤、胶质瘤、混合性胶质瘤、脉络丛瘤、少突胶質瘤(混合性胶质瘤(例如少星形细胞瘤(oligoastrocytoma))或间变性少突胶质瘤)、周围神经外胚层瘤、原始神经外胚层瘤(PNET)、CNS淋巴瘤、垂体腺瘤或施万鞘瘤在一些特别优选的实施方案中，所述癌症是成神经细胞瘤或成髄细胞瘤在任何实施方案中，受试者可以没有需要用硝基呋喃治疗的其他适应症即受试者不需要还患有查加斯病或例如由微生物感染引起的其他一些适应症。该方法还可额外包括用化学疗法、手术和/或放射疗法治療受试者另一方面，本发明提供了在哺乳动物(优选人)受试者中抑制血管发生的方法该方法包括以有效抑制血管发生的有效量对该受试鍺施用硝基呋喃化合物。受试者可患有癌症、眼病(例如黄斑变性、黄斑病变、糖尿病性视网膜病或早熟性视网膜病(晶状体后纤维组织形成))、皮肤病(例如嬰儿血管瘤、寻常疣、银屑病、神经纤维瘤病或大疱性表皮松解)、自身免疫性病(例如类风湿性关节炎)、妇科疾病(例如子宫内膜息肉、子宫内膜异位、功能障碍性子宫出血、卵巢过度刺激综合征、多囊性卵巢综合征(PCO)或先兆子痫)、心血管疾病(例如冠心病、缺血性心肌病、心肌缺血、动脉硬化、动脉粥样硬化、动脉粥样硬化斑块新血管形成(atheroscleroticplaqueneovascularization)、动脉阻塞性疾病、缺血、缺血性溃疡、缺血或心肌缺血后血運重建、外周血管疾病或间歇性跛行)，或胃肠疾病(例如克罗恩病和溃疡性结肠炎、伯格病(BuergerDisease)、血栓闭塞性血管炎、闭塞性动脉硬化、缺血性溃疡、多发性硬化、特发性肺纤维化、HIV感染、足底筋膜炎(plantarfasciitis),希普尔病(VonHippel-LandauDisease)、CNS成血管细胞瘤、视网膜成血管细胞瘤、甲状腺炎、良性前列腺肥大、肾小球肾炎、异位骨形成(ectopicboneformation)或瘢痕疙疼)癌症可以是胆管癌；膀胱癌；骨癌；脑癌或CNS癌；乳腺癌；子宫颈癌；绒毛膜癌；结肠和直肠癌；結締组织癌；消化系统癌；子宫内膜癌；食管癌；眼癌；flbromael;头与颈癌；胃癌；上皮内赘生物；肾癌；喉癌；白血病，包括急性髄细胞样白血疒、急性淋巴样白血病、慢性髓细胞样白血病、慢性淋巴样白血病；肝癌；肺癌(例如小细胞和非小细胞的)；淋巴瘤包括霍奇金淋巴瘤和非霍奇金淋巴瘤；黑色素瘤；口腔癌(例如唇、舌、口和咽癌);卵巢癌；胰腺癌；前列腺癌；视网膜母细胞瘤；横紋肌肉瘤；直肠癌；6肾癌；呼吸系统癌；肉瘤；皮肤癌；胃癌；睾丸癌；甲状腺癌；子宫癌；泌尿系统癌；肉瘤或癌瘤(carcinoma),所述癌症可以是转移癌。在任何实施方案中受试者可以没有需要用硝基吹喃治疗的任何其他适应症，例如不患有查加斯病该方法还可额外包括用化学疗法、手术和/或放射疗法治疗患者。另一方面本发明提供了用于治疗前述疾病、病症或状况的药物组合物。该组合物包含与可药用载体混合的一种或多于一种的硝基呋喃化合物优选地，所述硝基呋喃化合物为硝呋替莫、呋喃唑酮(furazolidine)或硝呋太尔更优选地，所述硝基呋喃化合物为硝呋替莫在一个非常具体的方面中，该组合物包含药物单位剂型其含有有效治疗成神经细胞瘤或其他相关癌症(即中枢神经系统癌)的用量的硝基呋喃化合物，優选硝呋替莫优选地，该单位剂型为与可药用栽体混合的约200-300mg药物在另一个非常具体的方面中，所述组合物包含硝基呋喃化合物特别昰硝呋替莫，并且也可以包含抗坏血酸或丁疏氨酸亚砜胺(buthioninesulfoximine)作为第二活性成分或药剂这些组合物可以配制为用于经口、鞘内、静脉内或肌內给药；优选经口给药配方。在另一方面中本发明是包含与合适的可药用载体混合的硝基呋喃化合物(例如硝呋替莫)的试剂盒，其被配制為用于经口、鞘内、静脉内或肌内给药优选经口配方。该试剂盒还可以包含同样在合适的可药用栽体中的有效量的抗坏血酸或丁硫氨酸亞砜胺或二者都有该试剂盒还可包含使用说明。在一些实施方案中使用说明教导保健提供者如何施用硝呋替莫。如上所述所述组合粅、其用途及试剂盒可额外包括第二药剂或成分。该第二药剂可以是谷胱甘肽的拮抗剂或耗竭剂谷胱甘肽的拮抗剂或耗竭剂的实例包括泹不限于丁硫氨酸亚砜胺、异硫氰酸盐或酯、环磷酰胺、异环裤酰胺(ifosphamide)、放线菌素D或N-(4-羟基苯基)维甲酰胺(N國(4國hydroxyphenyl)retinamide，4誦HPR)该第二药剂可以是促氧化劑。促氧化剂的实例包括但不限于抗坏血酸、过氧化氢和氢醌促氧化剂是本领域普通技术人员已知的。在一些重要的实施方案中促氧囮剂(例如抗坏血酸)与硝基呋喃化合物同时施用，或在硝基呋喃化合物之前施用第二药剂可以是化学治疗剂。一些重要的化学治疗剂实例包括但不限于拓朴替康(t叩otecan);有机金属如顺铂、卡铂；多柔比星、长春新碱、长春碱、紫杉醇及其同源物(congener)、放线菌素D这些化学治疗剂的实例茬下文列出。第二药剂可以是血管破坏剂(vasculardisruptingagent)血管破坏剂的例子包括但不限于考布他汀(combretostatin)、天然异硫氰酸盐或酯或其合成衍生物和类似物。第②药剂可以是血管发生抑制剂血管发生抑制剂的实例包括但不限于2-甲氧雌二醇(2-ME)、AG3340、制管张素、抗凝血酶III、抗VEGF抗体、巴马司他、贝伐单抗(avastatin)、BMS國275291、CAI、Canstatin、卡托普利、软骨来源的抑制剂(CDI)、CC-5013、塞来考昔(CELEBREX)、COL-3、考布他汀、考布他汀A4砩酸盐、Dalteparin(FRAGIN⑧)、EMD121974(西仑吉肽)、内皮抑制素、Erlotinib(TARCEVA)、gefitinib(Iressa)、高金雀花碱、氫溴酸囟夫酮(TEMPOSTATINTM)、Idl、Id3、IM862、曱碌酸伊马替尼、可诱导蛋白10、干扰素-cx、白介素12、薰草菌素A、LY317615或AE-941(NEOVASTATTM)、马立马司他、Maspin、乙酸甲羟孕酮、Meth-l、Meth-2、新伐司他、骨桥蛋白切割产物、PEX、色素上皮生长因子(PEGF)、血小板因子4、促乳素片段、增殖蛋白相关蛋白(PRP)、PTK787/ZK222584、重组人血小板因子4(rPF4)、Restin、角篁胺、SU5416、SU6668、苏拉明、紫杉醇、Tecogalan、沙利度胺、血小板反应素、TNP-470、肌鈣蛋白I、Vasostatin、VEG1、VEGF-Trap和ZD6474。所述血管发生抑制剂可以是VEGF拮抗剂在一些实施方案中，所述VEGF拮抗剂是VEGF结匼分子VEGF结合分子可以是VEGF抗体或其抗原结合片段。在一些实施方案中所述VEGF拮抗剂是NeXstar。本发明的治疗组合物可以经口、舌下、向颊、鼻内、静脉内、肌内、鞘内、颅内、腹膜内、皮下、皮内、局部、直肠、***、滑膜内或玻璃体内给药另一方面，本发明包括制造本发明硝基呋喃化合物和硝基呋喃类似物的改进方法该方法可以更有效和更无害地合成硝基呋喃和硝基呋喃类似物的侧链，并在"发明详述"中详细描述参考"详细描述"后，本发明的这些方面和其他方面以及多种优点和效用将是很明显的应当理解本发明的各方面均可包括多种实施方案。图l是硝基呋喃化合物主链的结构图2A是显示不同硝呋替莫剂量下成神经细胞瘤细胞的细胞生存力的直方图。细胞生存力测定在48孔平板Φ培养SMS-KCN、SMS-KCNR和IMR-32细胞(50,000个细胞/孔)并用1pg/ml、10ng/ml或20jig/ml硝呋替莫处理120个小时。如"材料和方法"中所述使用MTS测定法测定细胞生存力并表述为以运栽体处理的对照的百分比。数据表示为四个重复的均值士SD图2B是显示不同的硝呋替莫剂量下BrdU掺入的直方图。细胞增殖测定在48孔平板中培养SMS-KCNR细胞并用0、1.0、5.0、10和20fig/ml硝呋替莫处理48小时如实施例中所述通过BrdU掺入测定法来测定DNA合成。结果表述为未处理对照的百分比和六个重复的平均值(iSD)图3A是显示硝呋替莫对成神经细胞瘤细胞的影响的一组直方图。用0、1.0、10和20ng/ml硝呔替莫将SMS-KCNR细胞的亚汇合培养物处理96小时如"材料和方法"中所述使用光学显微鏡在IOO倍放大率下对细胞照相。使用经运载体处理的细胞作为对照图i:运载体对照；ii:1pg/ml、iii:10fig/ml和iv:20ftg/ml硝吹替莫。图3B是显示硝呋替莫引起成神经细胞瘤细胞的凋亡性细胞死亡的一组图片培养SMS-KCNR细胞并与0、1.0、10和20ng/ml硝呔替莫孵育96小时，如实施例中所述进行TUNEL测定照相并加工。放大率=100倍i到iv是叠加嘚凋亡染色和核染色的代表性图片。由SMS-KCNR细胞中DNA断裂造成的TUNEL阳性核表明硝吹替莫处理引起了凋亡性细胞死亡的发生，(i):运载体对照(ii):1fig/ml，(iii):10Hg/ml和(iv):20fig/ml凋亡性核的数目随着硝呋替莫剂量的提高而增加。9图4A是显示硝吹替莫对成神经细胞瘤细胞中胱天蛋白酶-3活化的影响的槽图培养SMS-KCNR细胞并用濃度递增的硝呋替莫孵育96小时。裂解细胞、在12%SDSPAGE上分离、印迹至PVDF膜上并用对活化的胱天蛋白酶-3具有特异性的抗体探测如实施例所述。清洗茚迹并用肌动蛋白抗体作为上样对照进行再探测上图-活化的胱天蛋白酶-3，下图-肌动蛋白图4B是显示不存在或存在Z-VAD-FMK时硝呋替莫对成神经细胞瘤细胞生存力的影响的直方图。用pancaspase抑制剂Z-VAD-FMK预处理SMS-KCNR细胞用50jiMZ-VAD-FMK将SMS-KCNR细胞预处理90分钟，之后用硝吹替莫(IOjig/ml)处理96小时通过MTS测定法测量细胞生存力。洳下测定pancaspase抑制剂对细胞毒性的反转比较存在或不存在pancaspase抑制剂时经硝呋替莫处理的细胞的生存力数值为四个重复的均值士SD。图5是显示硝呋替莫对Akt磷酰化的影响的Western印迹图(A):将SMS-KCNR细胞去血清处理18小时，用0、1.0、10和20ng/ml硝呋替莫处理90分钟然后用BDNF(100fig/ml)刺激10分钟。叙解细胞并使用磷酸-Akt抗体通过Western印跡进行分析(上图)清洗印迹并用对总Akt蛋白质特异的抗体再探测(下图)。(B):在存在血清时用硝呋替莫将SMS-KCNR细胞处理卯分钟然后裂解细胞并使用抗體通过Western印迹进行分析。图6是一组图片其显示生长因子刺激的主动脉环测定法中硝呋替莫对微血管萌发的血管发生抑制。(A)运载体处理的主動脉无生长因子；(B)运栽体处理的主动脉，有生长因子(C)、(D)、(E)表示存在生长因子时l、10和20ug/ml浓度的硝呋替莫处理。图7是直方图其显示硝呋替莫以剂量依赖性方式抑制人主动脉内皮细胞增殖，这通过DNA合成中溴代脱氧尿普(BrDu)掺入的减少来反映图8(A-C)是显示硝呋替莫以剂量依赖性方式抑淛管形成(tubeformation)(血管发生过程中的关键步骤)的一组图。(A)经运载体处理的内皮细胞无生长因子，(B)经运栽体处理的内皮细胞有生长因子。10(C)表示存茬生长因子时20ug/ml浓度硝呋替莫处理的图片和定量图(D)是显示硝呋替莫对融合形成测定法(fuseformationsassay)的影响的定量分析。图9是显示与丁硫氨酸亚砜胺(BSO)组合嘚硝呋替莫对成神经细胞瘤细胞生存力的影响的直方图过夜培养SMSKCNR细胞，然后用与1、50或100fiMBSO组合的0、l或10ng/ml硝吹替莫处理48小时用CalceinAM测定法测量细胞苼存力。图10是显示与抗坏血酸或BSO任一组合的硝呋替莫对成神经细胞瘤细胞生存力的影响的直方图过夜培养SY5Y细胞，然后用10[ig/ml硝吹替莫(N)、0.3mM抗坏血酸(A)或50jiMBSO(B)单独或组合(NB,NA,NBA)处理24小时用CalceinAM测定法测量细胞生存力。结果表述为运栽体对照的百分比图ll是直方图，其显示硝呋替莫处理对实施例12中所述成神经细胞瘤异种移植小鼠的影响图12是展示如实施例16中详述的本发明硝基呋喃化合物的合成方案的示意图。发明详述本发明部分基於下述的偶然发现(如实施例13中详述)4-[5-硝基亚糠基氨基]-3-甲基硫代吗啉l,l-二氧化物(也被称作其非专有名称"硝呋替莫")的施用减小肿瘤大小、抑制成神經细胞瘤细胞的增殖并抑制血管发生因此，本发明在一些方面包括对患有癌症的受试者施用药物形式的硝基呋喃化合物以治疗该受试鍺的癌症。本发明在一些方面还包括对受试者施用硝基呋喃化合物以抑制该受试者中的血管发生。所述硝基呋喃化合物以有效且在生理仩可接受的量施用以治疗受试者的癌症。尽管不希望受任何具体理论的束绰但是我们相信硝呋替莫具体是通过产生自由基来发挥其细胞毒效应。硝呋替莫是一种硝基杂环化合物；其硝基可以在无细胞体系中通过与细胞色素P-450还原酶、黄嘌呤氧化酶、抗坏血酸和儿茶酚胺类反应而还原为硝基阴离子基团然后硝基阴离子能将氧还原为超氧阴离子基团和过氧化氢。在查加斯病中硝基阴离子自由基和氧自由基巳经显示对寄生虫克氏锥虫(t:CW^i')具ii有细胞毒性。硝基的还原不仅产生阴离子基团而且与儿茶酚胺3的相互作用似乎也产生半醌自由基，该自由基加重了对在功能上具有重要性的生物分子的损伤导致成神经细胞瘤细胞系的凋亡。已知成神经细胞瘤细胞含有高水平的儿茶酚胺从洏可能导致相对特异性地靶向这些细胞。成神经细胞瘤细胞系中与儿茶酚胺的反应通过用AMPT预处理使细胞毒性降低来证实AMPT是减少细胞中储存的儿茶酚胺总量的酪氨酸羟化酶抑制剂。另外交感神经元(而非副交感神经元或非神经元细胞)对硝呋替莫增强的敏感性支持了该结论。術语"治疗，包括改善、治愈或维持(即防止复发)病症患病后治疗的目的在于减少、改善或完全消除病症和/或其相关的症状、预防其恶化戓者当病症初被消除时预防其再次发生(即防止复发)。受试者是指哺乳动物物种包括但不限于犬、猫、马、牛、猪、绵羊、山羊、鸡、啮齒动物或灵长类。受试者可以是室内宠物(例如犬、猫)、农业家畜(agriculturalstockanimal)(例如牛、马、猪、鸡等)、实验动物(例如小鼠、大鼠、兔等)、动物园动物(例洳狮子、长颈鹿等)但不仅限于此。优选的受试者是人受试者人受试者可以是儿童、***或老年受试者。本文使用的术语"硝基呋喃"和"硝基呋喃化合物"可互换使用并包括具有侧链的呋喃，所述侧链含有一个或多个氮原子如本领域所公知的，呋喃是由四个碳原子和一个氧原子组成的不饱和芳香杂环化合物参阅Ege,OrganicChemistry,第三版,D.C.Heath&Co.,Lexington,MA(1994)。硝基呋喃的实例包括但不仅限于硝呋替莫、呋响唑酮和硝吹太尔参阅RaetherW,HanelH.NitroheterocyclicDrugswithBroadSpectrumAcitivity,ParasitRes2003;卯:S19-S39;Albrecht等，J.Med.Chem.13(4):736(1970);Albrecht等Arzneimittel-Forsch叫g(DrugRes.)21(1):127-31(1971);Pozas等,Bioorganic&MedicinalChemistryLetters15:5)。"4匕合体内产生的硝基呋喃化合物、、、本文使用的"癌症，是指影响身体***和系统的正常功能的不受控制的细胞生长。从其原始部位迁移出来并在至关重要的***中扎根的癌细胞能够通过该患病***的功能衰退而最终导致受试者死亡癌细胞是由于失去正常的生长控淛而异常裂解和增殖的细胞。癌细胞几乎总是来自于至少一个遗传突变在一些情况下，有可能根据所表达基因和蛋白质的谱及其表达水岼来区分癌细胞与其对应的正常细胞在癌细胞中通常受到影响的基因包括癌基因如ras、neu/HER2/erbB、myb、myc和abl，以及肿瘤抑制基因如p53、Rb、DCC、RET和WT这些i因中┅些基因内的癌症相关突变导致其表达降低或完全缺失。在其他情况下突变引起表达提高或者正常对应物的活化变体的表达。术语"肺瘤"通常等同于赘生物在字面上表示"新的生长"，并可与"癌症"互换使用"肿瘤性病症"是与细胞增殖、特别是与赘生物相关的任何病症。"赘生物"昰在撤除启动赘生物出现的致癌因子后继续存在和增殖的异常组织块存在两种类型的赘生物，良性的和恶性的几乎所有的良性胂瘤都昰被包裹的并且是非侵袭性的；相反，恶性肺瘤几乎都不是被包衮的而是通过浸润性的破坏性生长来侵入相邻组织。这种浸润性生长之後可以是肿瘤细胞植入与原始肿瘤不连续的部位转移是与原发性肿瘤位点不同的癌细胞区域，由来自原发性肿瘤的癌细胞扩散至身体的其他部分而引起在诊断原发性肺瘤块时，可监测受试者中转移的存在情况除监测特定的症状外，通常通过单独或组合使用磁共振成像(MRI)掃描、计算机断层摄影术(CT)扫描、血和血小板计数、肝功能研究、胸部X射线和骨扫描来检测转移灶本发明的方法可用于在受试者中治疗癌症。在一些实施方案中所述癌症是中枢神经系统(CNS)癌症。一些重要的CNS癌症包括但不限于成神经细胞瘤、成髄细胞瘤、周围恶性神经鞘瘤、室管膜瘤、颅咽管瘤、星形细胞瘤、脑脊膜瘤、生殖细胞瘤、胶质瘤、混合性胶质瘤、脉络丛瘤、少突胶质瘤、周围神经外胚层瘤、原始鉮经外胚层瘤(PNET)、CNS淋巴瘤、垂体腺瘤和施万鞘瘤在一些实施方案中，所述星形细胞瘤为I级、II级、III级或IV级星形细胞瘤可以是低级的或高级嘚。星形细胞瘤可以是青少年纤维星形细胞瘤、室管膜下巨细胞性星形细胞瘤、多形性***星形细胞瘤、间变型星形细胞瘤或大脑胶质瘤疒在一些实施方案中，所述少突胶质瘤为混合性胶质瘤(少星形细胞瘤)或间变型13少突胶质瘤在一个优选的实施方案中，所述癌症为成神經细胞瘤可以通过本发明的方法治疗的其他癌症包括但不仅限于基底细胞癌、胆管癌、膀胱癌、骨癌、脑癌和CNS癌、乳腺癌、子宫颈癌、絨毛膜癌、结肠和直肠癌、结締组织癌、消化系统癌、子宫内膜癌、食管癌、眼癌、纤维瘤、头与颈癌、胃癌、上皮内赘生物、肾癌、喉癌、白血病(包括急性髓细胞样白血病、急性淋巴样白血病、慢性髓细胞样白血病、慢性淋巴样白血病)、肝癌、肺癌(例如小细胞和非小细胞嘚)、淋巴瘤(包括霍奇金淋巴瘤和非霍奇金淋巴瘤)、黑色素瘤、口腔癌(例如唇、舌、口和咽癌)、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、视网膜母细胞瘤、横紋肌肉瘤、直肠癌、肾癌、呼吸系统癌、肉瘤、皮肤癌、胃癌、睾丸癌、曱状腺癌、子宫癌、泌尿系统癌以及其他癌瘤(carcinoma)和肉瘤。癌瘤是上皮起源的癌症旨在用本发明的方法治疗的癌瘤包括但不限于腺泡癌、腺泡状癌、腺泡状腺癌(也称作嚢性腺样癌、腺肌上皮瘤、筛狀癌和圆柱瘤)、腺癌(carcinomaadenomatosum)、腺癌(adenocarcinoma)、肾上腺皮质癌、蜂窝状癌、肺泡细胞癌(也称作细支气管癌、肺泡细胞瘤和肺腺瘤病)、基底细胞癌(basalcellcarcinoma)、基底细胞癌(carcinomabasocellulare)(也称作basaloma或者basiloma和毛母质癌(hairmatrixcarcinoma))、基底细胞样癌(basaloidcarcinoma)、基底鳞状细胞癌(basosquamouscellcarcinoma)、乳腺癌、细支气管肺泡癌、细支气管癌、支气管癌、髓样癌、胆管细胞癌(也稱作胆管瘤和胆管癌)、绒毛膜癌、胶样癌、粉刺状癌、子宫体癌、筛状癌、胸廊癌、carcinomacutaneum、柱状癌(cylindricalcarcinoma)、柱状细胞癌(cylindricalcellcarcinoma)、导管癌、硬癌、胚胎性癌、髓样癌、眼球上癌、表皮样癌、腺样上皮细胞癌、carcinomaexulcere、纤维癌、股样癌(gelatiniformcarcinoma)、胶样癌(gelatinouscarcinoma)、巨细胞癌(giantcellcarcinoma)、巨细胞癌(gigantocellulare)、腺癌、粒层细胞癌、毛母质癌、多血癌、肝细胞癌(也称作肝瘤、恶性肝瘤和肝癌)、Hurthle细胞癌、玻璃样癌(hyalinecarcinoma)、肾上腺样癌、幼稚型胚胎性癌(infantileembryonalcarcinoma)、原位癌、表皮内癌、上皮内癌、Krompecher，s癌、库尔切茨基细胞癌、豆状癌(lenticularcarcinoma)、旦4^L癌(carcinomalenticulare)、脂瘤样癌、'淋巴上皮癌、乳腺炎性癌(carcinomamastitoides)、黑色素癌(carcinomamedullare)、黑色素癌(medullarycarcinoma)、黑色素癌(carcinomamelanodes)、黑色素癌(melanoticcarcinoma)、粘液癌(mucinouscarcinoma)、粘液癌(carcinomamuciparum)、粘液细胞癌、粘液表皮样癌、粘液癌(carcinomamucosum)、粘液癌(mucouscarcinoma)、粘液瘤样癌、鼻咽癌、恶性黑色素瘤、燕麦细胞癌、骨化性癌(carcinomaossificans)、骨化性癌(osteoidcarcinoma)、卵巢癌、乳头状癌、门脉周癌、原位癌、前列腺癌、肾细胞癌(也称作肾腺癌和肾上腺样癌)、reservecellcarcinoma、肉瘤样癌、施奈德癌(scheinderiancarcinoma)、硬癌、阴嚢癌、印戒细胞癌、單纯癌、小细胞癌、硬癌、球状细胞癌、梭形细胞癌、髓样癌、鳞癌、鳞状细胞癌、绳捆癌、血管扩张性癌(carcinomatelangiectaticum)、血管扩张性癌(carcinomatelangiectodes)、移行细胞癌、结节性皮癌(carcinomatuberosum)、结节性皮癌(tuberouscarcinoma)、疾状癌、绒毛状癌肉瘤是来自于骨和软组织的罕见的间质肿瘤。识别了不同类型的肉瘤其包括脂肪肉瘤(包括粘液样脂肉瘤和多形型脂肪肉瘤)、平滑肌肉瘤、横紋肌肉瘤、恶性外周神经鞘瘤(也称作恶性神经鞘瘤、神经纤维肉瘤或神经原性肉瘤)、尤因瘤(包括骨尤因肉瘤、骨外(即非骨)尤因肉瘤和原发性神经外胚层瘤[PNET)、滑膜肉瘤、血管肉瘤(angiosarcomas)、血管肉瘤(hemangiosarcomas)、'淋巴管肉瘤、卡波西肉瘤、血管内皮瘤、纤维肉瘤、硬纤维瘤(也称作侵袭性纤维瘤病)、隆凸性皮肤纤维肉瘤(DFSP)、隆凸性皮肤纤维肉瘤(MFH)、血管外皮细胞瘤、恶性间叶瘤、腺泡状软组织肉瘤、上皮样肉瘤、明细胞肉瘤、促结締组织增生性小细胞瘤(desmoplasticsmallcelltumor)、胃肠道间质瘤(GIST)(也称为GI间质肉瘤)、骨肉瘤(也称作骨和骨外的成骨禸瘤以及软骨肉瘤。待治疗的癌症可以是难治性癌症(refractorycancer)本文使用的难治性癌症是对处方中护理的常规标准有抗性的癌症。这些癌症可能最初看来对治疗有反应随后复发，或者它们可以对治疗完全没有反应因此，根据本发明对难治性癌症进行治疗的受试者可能已经进行了針对其癌症的其他治疗或者，如果癌症很可能是难治性的(例如考虑到癌细胞的分析或受试者的病史)则受试者可能尚未进行其他治疗。難治性癌症的实例包括但不限于白血病、黑色素瘤、肾细胞癌、结肠癌、肝癌、胰腺癌、非霍奇金淋巴癌和肺癌本发明还可用于治疗免疫原性的癌症。免疫原性的癌症是已知(或很可能)在其表面上或在细胞死亡时表达免疫原的癌症这些免疫原是癌症抗原的体内内生性来源，它们的释放可以通过本发明的方法加以利用来治疗癌症免疫原性癌症的实例包括恶性黑色素瘤和肾细胞癌。套细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤、T细胞急性成淋巴细胞性白血病、伯基特淋巴瘤、骨髓瘤、免疫细胞瘤、急性早幼粒细胞性白血病、慢性髄样/ゑ性成淋巴细胞性白血病、急性非白血性白血病、B细胞急性成淋巴细胞性白血病、间变性大细胞-淋巴瘤、骨髓增生异常综合征/急性髓性白血病、非霍奇金淋巴瘤、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、急性成淋巴细胞性白血病(ALL)、急性骨髓性白血病(AML)、常见(前B细胞)急性淋巴细胞性白血病、恶性黑色素瘤、T细胞淋巴瘤、白血病、B细胞淋巴瘤、上皮恶性肿瘤(epithelialmalignancy)、淋巴样恶性肿瘤(lymphoidmalignancy)、妇科癌症、胆腺癌(biliaryadenocarcinoma)和胰腺导管腺癌本发明在一些方媔中涉及抑制受试者中血管发生的方法。血管发生是内皮细胞的异常快速增殖其导致异常新血管(微血管)的形成持续且不减退。持续数月戓数年的血管发生能够支持癌症的生长和发展并可导致对多种***和组织(例如眼、皮肤、心、血管、肺、胃肠道和生殖泌尿道)的损伤。夲发明的方法包括以有效抑制血管发生的量对受试者施用硝基呋喃化合物所述硝基呋喃化合物以抑制受试者中血管发生的有效量施用。優选地该化合物为硝呋替莫，该受试者为人受试者本文使用的术语"抑制血管发生"是指减少异常微血管的数目或密度。异常微血管数目嘚减少是指减少现有异常微血管的数目或减少新微血管的产生本文使用的"减少"包括总体的消除或根除，以及不导致总体根除的其他减少.鈳以通过多种方法或技术来评估血管发生临床情况下最广泛使用的方法依赖于活检(切口或针刺)或标本中血管(微血管)的组织化学或免疫组織化学染色。可以检查的血管发生特征包括例如血管密度和/或形态和/或血管周围套(perivascularcuff)的厚度定量组织活检或标本中的微血管区域密度。例洳高微血管密度区域("热点")可能含有体内最多的磷脂的肺瘤细胞和/或具有最高的转移可能性。测定微血管密度的一种技术是测量毛细管间距离评估血管发生的另一种方法是测量血管周围套的厚度。血管周围套厚度的增加与血管发生的发展相关并可指示疾病的恶化。也可鉯通过测量血管发生(血管原性)因子的血、血清、血浆或组织水平来评估血管发生血管原性因子水平可充当血管发生的代用标记物。可以莋为血管发生代用标记物的血管原性因子的实例包括但不仅限于血管生成素、血管生成素-lDel-l、酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)和碱性成纤维细胞苼长因子(bFGF)、卵泡抑素、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、肝细胞生长因子(HGF)/散射因子(scatterfactor,SF)、白介素-8(IL-8)、瘦素、中期因子、胎盘生长因子、血小板来源的内皮细胞生长因子(PD-ECGF)、血小板来源的生长因子-BB(PDGF-BB)、多效营养因子(PTN)、前颗粒蛋白(Progranulin)、增殖蛋白、转化生长因子-a(TGF-a)/转化生长因子-p(TGF-p)、肺瘤坏死因子-a(TNF-a)、血管内皮生長因子(VEGF)/血管通透性因子(VPF)。成像技术也可用于评估血管发生合适的成像技术或设备包括非侵入性设备，如CT、旋转式CT、显微-CT、多能计算机断層摄影术(multipleenergycomputedtomography,MECT)、单检测器CT(SDCT)、多检测器CT(MDCT)、容积CT(VCT)、MRI、显微-MR、X光、旋转式X光、PET、近红外线/可见光以及可在受试者体外使用或非侵入性地插入体腔的其怹非侵入性扫描技术和设备还可以通过CT血管造影术(CTA)、断层摄影合成(tomosynthesis),X光微血管造影术和其他技术对血管发生进行成像。一种血管发生成像技术涉及使用与超声和对比增强成像模式(contrastspecificimagingmodality)纟且合的基于微气泡的造影剂(SonoVue)以检测肿瘤微血管灌流液的灌流改变。其他血管发生成像技术包括彩色多普勒和乳房造影术(mammography)彩色多普勒成像可揭示肿瘤如乳腺癌中的血管发生。乳房造影术可揭示乳腺肿瘤的血管化边缘可以通过染料增强多种成像或放射学体征。受试者中的血管发生还可以通过包括向感兴趣的身体区域中引入至少一种造影剂的方法来评估例如，可鉯向血管中注射用于检测血管17的造影剂可以局部引入少量造影剂，以增强在感兴趣的特定身体区域中的血管检测或者，造影剂可以以足以在更大的身体区域或整个受试者身体中增强血管检测的量提供可以获得针对受试者身体的结构数据，或可获得针对一个或多个靶***(例如肺、心、乳腺、结肠等)、***部分或受试者身体的另一靶区的结构数据靶区可以是受试者身体的任何部分，例如四肢、腹、躯干、颈、头或者其任何部分。可为了本发明的目的也可使用本文中未描述的其他方法或技术来评估血管发生评估血管发生的方法和技术昰本领域普通技术人员已知的。硝基呋喃可以与其他疗法(例如放射疗法、手术、常规化学疗法)组合施用或与一种或多种其他疗法的组合┅起组合施用。硝基呋喃可以在药物组合物中单独施用或与治疗有效且生理可接受的量的一种或多种其他活性成分或药剂一起组合施用。这样的其他活性成分包括但不仅限于谷胱甘肽拮抗剂、血管发生抑制剂、化学治疗剂和抗体(例如癌症抗体)硝基呋喃化合物和其他活性荿分或药剂可以同时施用或依次施用。当硝基呋喃化合物与其他活性剂同时施用或与其他活性成分组合施用时该硝基呋喃化合物和其他活性成分可以在相同或分开的配方中施用，但是同时施用当所述其他活性剂和硝基呋喃的施用在时间上分开时，所述其他活性剂可以彼此依次施用并与硝基呋喃化合物依次施用各施用之间的时间间隔可以是大概数分钟、数小时、数天，或可以更长谷胱甘肽拮抗剂的实唎包括但不仅限于丁硫氨酸亚砜胺、环磷酰胺、异环磷酰胺(ifosphamide)、放线菌素D和N-(4-羟苯基)维甲酰胺(4國HPR)。血管发生抑制剂的实例包括但不仅限于2-甲氧雌二醇(2-ME)、AG3340、制管张素、抗凝血酶III、抗VEGF抗体、图巴马司他、贝伐单抗(阿瓦斯汀)、BMS-275291、CAI、Canstatin、卡托普利、软骨源抑制因子(CDI)、CC-5013、塞来昔布(CELEBREX⑧)、COL-3、考布怹汀、考布他汀A4砩酸盐、达肝素(FRAGIN⑧)、EMD121974(西仑吉肽)、恩多斯塔汀、埃罗替尼(TARCEVA⑧)、吉非替尼(易瑞沙)、金雀异黄素、氢溴酸卣夫酮(TEMPOSTATINTM)、Idl、Id3、IM862、甲磺酸伊马替尼、诱导蛋白10、干扰素P、白细胞介素12、熏草菌素A、LY317615orAE-941(NEOVASTATTM)、马立马司他、乳腺丝抑蛋白、乙酸曱鞋孕酮、Meth-l、Meth-2、新伐司他、骨桥蛋白分离产品、PEX、色素上皮增长因子(PEGF)、血小板因子4、催乳素片段、增殖素蛋白(PRP)、PTK787/ZK222584、重组人类血小板因子4(rPF4)、休眠蛋白、角篁胺、SU5416、SU6668、苏拉明、紫杉醇、Tecogalan、沙利度胺、血小板反应蛋白、TNP-470、肌钾蛋白I、血管形成抑制素、VEG1、VEGF-Trap和ZD6474在一些实施方案中，所述血管发生抑制剂是VEGF拮抗剂VEGF拮抗剂可以是VEGF結合分子。VEGF结合分子包括VEGF抗体或其抗原结合片段VEGF拮抗剂的一个实例是NeXstar。可以用作额外的活性成分的化学治疗剂类别的实例包括但不仅限於DNA损伤剂其包括拓朴异构酶抑制剂(例如依托泊戒、ramptothecin、拓朴替康、替尼泊苷、米托蒽醌)、抗微管物质(例如闻克斯丁、文拉亭)、抗代谢制剂(唎如阿糖胞苷、甲氨碟呤、羟基脲、5-ftJl嘧啶、氟尿苷、6-硫鸟嘌呤、6-巯基嘌呤、氟ii4i滨、喷司他丁、氯脱氧腺苷)、DNA烷化剂(例如顺铂、盐酸氮芥、環磷酰胺、异环磷跣胺、美法仑、苯丁酸氮芥、白消安、噢替哌、卡莫司汀、洛莫司汀、卡铂、氮烯唑胺、甲基苄肼)和DNA链断裂诱导剂(例如博来霉素、阿霉素、柔红霉素、去甲氡基柔红霉素、丝裂霉素C)。化学治疗剂包括合成的、半合成的和天然来源的药剂重要的化学治疗剂包括但不仅限于阿西维辛、阿柔比星、阿考达哇、阿克罗宁、阿多来新、阿霉素、阿地白介素、阿维A皿囊、别嘌醇钠、六曱蜜胺、安波霉素、阿美蒽醌、氨鲁米特、胺苯丫啶、阿那曲唑、AimonaceousAcetogenin、安曲霉素、巴婆(双吹)内酯、门冬酰胺酶、曲林菌素、阿扎胞普、阿扎替派、阿佐霉素、巴马司他、苯佐替派、贝沙罗汀、比卡鲁胺、盐酸比卡鲁胺、双奈法德二去铁胺、比折来新、硫酸博来霉素、布会那钠、溴匹立明、Bullatacin、皛消安、卡麦角林、放线菌素C、卡普睾酮、卡醋胺、卡贝替姆、卡铂、卡莫司汀、盐酸卡柔比星、卡折来新、西地芬戈、塞来考昔、苯丁酸氮芥、西罗霉素、顺铂、克拉屈滨、克立那托去铁胺、环磷酰胺、阿糖胞苷、达卡巴嗓、DACA(N-P-(二甲基-氨基)乙基吖咬斗羧酰胺)、更生霉素、盐酸柔红霉素、柔红霉素、地西他滨、地尼白介素、右奥马铂、地扎胍宁、地扎胍宁去铁胺、地吖醌、多西紫杉醇、多柔比星、盐酸多柔比煋、屈洛昔芬、杵檬酸屈洛昔芬、丙酸屈他雄酮、达佐霉素、依达曲沙、盐酸依氟鸟氨酸、依沙声星、恩洛柏、恩普氨酯、依匹腺咬、盐^柔比星、厄布洛唑、盐酸依索比星、雌莫司汀、雌氮M酸钠、依他硝唑、乙碘油I131、依托泊普、磷酸依托泊苷、氯苯乙嘧胺、盐酸法罗唑啉、法扎拉滨、芬维A胺、氟脲嘧g氧核苷、磷酸氟达拉滨、氟尿嘧啶、5-FdUMP、氟西他滨、磷喹酮、福司曲星钠、FK-317、FK-973、FR-66979、FR-900482、吉西他滨、盐酸吉西他滨、吉姆单抗奥佐米星、GoldAu198、乙酸戈舍瑞林、胍那决尔、羟基脲、盐酸伊达比星、异环磷酰胺、伊莫福新、干扰素oc-2a、干扰素cx-2b、干扰素cx-nl、干扰素oc-n3、幹扰素P-la、干扰素Y-lb、异丙铂、盐酸伊立替康、醋酸兰瑞肽、来曲唑、醋酸亮丙瑞林、盐酸利阿唑、洛美曲索钠、洛莫司汀、盐酸洛索蒽醌、馬索罗酚、Maytansine、盐酸氮芥、醋酸甲地孕酮、醋酸美仑孕酮、美法仑、美诺立尔、巯嘌呤、氨曱喋呤、氨曱蝶呤钠、甲氧沙林、氯n咬、美妥替呱、米丁度胺、Mitocarcin、丝裂红素、米托洁林、米托马星、丝裂霉素、丝裂霉素C、米托司培、米托坦、盐酸米托蒽醒、麦考酚酸、诺考达唑、诺拉霉素、奥普瑞白介素、奥马铂、奥昔舒仑、紫杉醇、氨羟二磷酸二钠、培门冬酶、培利霉素、戊氮芥、硫酸培普利欧霉素、培磷酰胺、呱泊溴烷、哌泊舒凡、盐酸吡罗蒽醌、普卡霉素、普洛美坦、卟#钠、泊非霉素、泼尼莫司汀、盐酸丙卡巴肼、嘌罗霉素、盐酸嘌呤霉素、Pyrazofurin、利波腺普、利妥昔单抗、罗谷亚胺、Rolliniastatin、沙芬戈、盐酸沙芬戈、钐/来昔决南、司莫司汀、辛曲秦、磷乙酰天冬氨酸钠、司帕霉素、盐酸螺旋锗、螺莫司汀、螺铂、Squamocin、Squainotacin、链黑菌素、链佐星、氯化锶Sr89、磺氯苯脲、他利霉素、紫杉烷、Taxoid、替可加兰钠、替加氟、盐酸替洛蒽醌、替莫泊芬、替尼泊苷、替罗昔隆、睾内酪、硫咪噪呤、疏鸟噪呤、塞替派、Thymitaq、漆哇咬林、替糾L明、雷替曲塞、TOP-53、盐酸拓朴替康、柠檬酸托瑞米芬、曲妥珠单抗、醋酸曲托龙、磷酸曲西立滨、三曱曲沙、葡萄糖眵酸三甲曲沙、曲普瑞林、盐酸妥布氯唑、尿嘧啶氮芥、乌瑞替派、戊柔比星、伐普肽、维替泊芬、"^*碱、硫酸W碱、长春新碱、硫酸M新碱、M地辛、硫酸长春地辛、硫酸长春匹定、硫酸长春甘酯、硫酸长春罗新、酒石酸长春瑞滨、疏酸异长*^、硫酸^利定、伏氯唑、折尼铂、净司他丁、盐酸佐柔比星、2-氯脱氧腺苷、2，-脱氧间型霉素、9-氨基喜树碱、雷替曲塞、N-炔丙基-5,8-二去氮杂叶酸、2-氯-2'-阿糖-氟-2'-脱氧腺苷、2-氯-2'-脱氧腺普、茴香霉素、曲古抑菌素A、hPRL國G129R、CEP画751、利诺胺、硫芥、氮芥(双氯乙基甲胺)、双氯乙基甲胺、美法仑、苯丁酸氮芥、20异环磷酰胺、白消安、N國甲基-N画亚***(MNU)、N、N'-双(2國氯乙基)國N國亚***(BCNU)、N-(2-氯乙基)-N'-环己基-N-亚***(CCNU)、N-(2-氯乙基)-N'-(反式-4-甲基环己基-N-亚***(MeCCNU)、N-(2-氯乙基)-N-(二甲基)磷酸乙酯-N-亚***(福莫司汀)、链唑霉素、达卡巴嗪(DTIC)、米托哇胺、替莫唑胺、替莫唑胺、丝裂霉素C、AZQ、阿多来新、顺铂、卡柏、奥马柏、奥沙利柏、C1-973、DWA2114RJM216、JM335、二铂、雷替曲塞、阿扎胞苷、阿糖胞苷、吉西他滨、6-巯噪呤、6-硫鸟噤呤、佽黄嘌呤、替尼泊苷、9-M喜树碱、喜树碱、CPT-ll、多柔比星、多柔比星、表柔比星、依达比星、米托蒽醌、洛索蒽醌、更生霉素(更生霉素D)、安吖啶、吡唑啉吖啶、全反式视黄醇14-羟基-反式视黄醇、全反式维甲酸、N-(4-羟苯基)维胺酯、13-顺式维甲酸、3-曱基TTNEB、9-顺式维甲酸、氟达拉滨(2-F-阿糖-AMP)和2-氯脱氧腺苷(2-Cda)。其他化学治疗剂包括20-表-125二羟维生素D3、5-乙炔基尿嘧啶、阿比特龙、阿柔比星、acylfulvene、adecypenol、阿多来新、阿地白介素、ALL-TK拮抗剂、六甲蜜胺、氨莫司汀、amidox、氨裤汀、#^乙酰丙酸、氨柔比星、安吖啶、阿那格雷、阿那曲唑、穿心莲内酯、血管生成抑制剂、拮抗剂D、拮抗剂G、antarelix、抗dorsalizingmorphogeneticprotein-l、抗雄激素、前列腺癌、抗雌激素、antineoplaston、反义寡核苷酸、aphidicolinglycinate、凋亡基因调节剂、凋亡调节剂、脱噪呤核酸、ara-CDP-DL-PTBA、精氨酸脱氨酶、asulacrine、阿他美坦、阿莫司'汀、axinastatin1、axinastatin2、axinastatin3、阿扎司琼、阿扎毒素、重氮酪氨酸、浆果赤霉素HI衍生物、balano1、巴马司他、BCR/ABL拮抗剂、苯佐利定、benzoylstaurosporine、P内酰胺衍生物、P-alethine、betaclamycinB、betulinicacid、bFGF抑制剂、仳卡鲁胺、t匕生群、bisaziridinylspermine、艰奈'法德、bistrateneA、》匕折来新、breflate、博来霉素A2、博来霉素B2、溴匹立明、布度钬、buthioninesulfoximine、卡泊三醇、calphostinC、喜树>^衍生物(例如10-羟基國喜樹碱)、金丝雀痘IL-2;卡培他滨、氨甲酰-氨基***、carboxyamidotriazole、CaRestM3、CARN700、软骨来源的抑制剂、卡折来新、酪蛋白激酶抑制剂(ICOS)、castanospermine、杀菌肽B、西曲瑞克、氯、chloroquinoxalinesulfonamide,西卡湔歹'J素、顺式p卜啉、克拉屈滨、氯米芬类似物、克霉唑、collismycinA、collismycinB、考布他汀A4、考布他汀类似物、conagenin、crambesddin816、克立那21托、cryptophycin8、cryptophycinA衍生物、curacinA、cyclopentanthraquinones、cycloplatam、cypemycin、cytarabineocfosfate、溶胞因孓、cytostatin、达昔单抗、地西他滨、dehydrodidemninB、2'deoxycoformycin(DCF)、地洛瑞林、dexifosfamide、右雷佐生、右维拉帕米、地吖醌、代代宁B、didox、diethylnorspermine、二氲-5画阿扎胞普、二氢紫杉醇、dioxamycin、联苯螺莫司汀、discodermolide、二十二醇、多拉司琼、去氧氟尿苷、屈洛昔芬、屈大麻酚、duocarmycinSA、依布硒、依考莫司汀、依地福新、依决洛单抗、依氟鸟氨酸、榄烯、乙嘧替氟、表柔比星、epothilones(A、R=H、B、R=Me)、epithilones、依立雄胺、雌莫司汀类似物、雌激素激动剂、雌激素拮抗剂、依他硝唑、依托泊苷、依托泊苷4'-磷酸(凣毕复)、依西美坦、法倔唑、法扎拉滨、芬维A胺、非格司亭、非那雄胺、flavopiridol、氟卓斯汀、fluasterone、氟ii4^滨、fluorodaunorunicinhydrochloride、福酚美克、福美坦、福司曲星、福莫司汀、gadoliniumtexaphyrin、贿酸嫁、加^flfc滨、加尼瑞克、明胶酶抑制剂、吉西他滨、谷胱甘肽抑制剂、hepsulfam、heregulin、六亚曱基二乙酰胺、高三尖杉酯碱(HHT)、金丝桃素、伊班膦酸、伊达比星、艾多昔芬、伊决孟酮、伊莫福新、伊洛马司他、imidazoacridone、咪会莫特、免疫刺激肽、胰岛素样生长因子-l受体抑制剂、干扰素激动劑、干扰素、白介素、碘千胍、碘阿霉素、甘薯苦醇、4-、伊立替康、伊罗普拉、伊索拉定、isobengazole、isohomohalicondrinB、寸尹他司琼、jasplakinolide、kahalalideF、lamellarin-Ntriacetate、兰瑞肽、leinamycin、来格司亭、疏酸蘑菇多糖、leptolstatin、来曲唑、非白血性白血病抑制因子、白细胞a干扰素、亮丙立德+雌激素+孕酮、亮丙瑞林、左旋咪唑、利阿唑、直链多胺類似物、亲脂二糖肽、亲脂铂化合物、lissoclinamide7、洛柏、胍乙基磷酸丝氨酸、洛美曲索、氯尼达明、洛索蒽醌、^f戈他汀、洛索立宾、勒托替康、lutetiumtexaphyrin、lysofylline、裂解肽、美坦新、mannostatinA、马立马司他、马索罗酚、maspin、matrilysin抑制剂、基质金属蛋白酶抑制剂、美诺立尔、merbarone、美替瑞林、曱硫氨酸酶、甲氧氯普胺、MIF抑制剂、米非司酮、米替福新、米立司亭、错配的双链RNA、普卡霉素、米托胍腙、二溴卫矛醇、丝裂霉素类似物、米托萘胺、丝裂毒素(mitotoxin)成纤維细胞生长因子-皂草素、米托蒽醌、莫法罗汀、莫拉司亭、单克隆抗体、人绒毛膜促性腺激素、单磷酰脂质A+分枝杆菌细胞壁sk、单磷酰脂质A、多重抗药性基因抑制剂、基于多瘤抑制基因-1的疗法、芥抗癌剂、mycaperoxideB、分支杆菌细胞壁提取物、myriaporone、N-acetyldinaline、N-取代苯酰胺、那法瑞林、那瑞替喷、纳洛酮+***、napavin、naphterpin、那托司亭、奈达铂、奈莫柔比星、奈立膦酸、中性肽链内切酶、尼鲁米特、nisamycin、氧化亚氮调节剂、一氧化二氮抗氧化剂、nitmllyn、06-千基鸟嘌呤、奥曲肽、okicenone、寡核普酸、奥那司酮、昂丹司琼、昂丹司琼、oracin、口服细胞因子诱导剂、奥马铂、奥沙特隆、奥沙利铂、oxaiinomydn、紫杉醇类似物、紫杉醇衍生物、palauamine、palmitoylrhizoxin、帕米磷酸、人参三醇、中白诺米芬、parabactin、帕折普汀、培门冬酶、培得星、木聚硫钠、喷司他丁、pentrozole、全氟溴烷、培磷酖胺、perillylalcohol、phenazinomycin、乙酸苯酯、磷酸酶抑制剂、picibanil、盐酸毛果芸香碱、吡柔比星、吡曲克辛、placetinA、placetinB、纤溶酶原激活物抑制剂、賴络合物、铂化匼物、铂-三胺络合物、鬼臼毒素、卟#钠、泊非霉素、丙基双吖啶酮、前列腺素J2、蛋白酶体抑制剂、基于蛋白A的免疫调节剂、蛋白激酶C抑制劑、蛋白激酶C抑制剂、microalgal、蛋白酪氨酸磷酸酶抑制剂、嘌呤核苷磷酸化酶抑制剂、红紫素、吡唑啉吖吱、吡喷基化的(pyridoxylated)血红蛋白聚氧乙烯缀合粅、raf拮抗剂、雷替曲塞、雷莫司琼、ras法呢基蛋白转移酶抑制剂、ras抑制剂、ras-GAP抑制剂、脱甲基化的瑞替普汀、依替膦酸铼Re186、根霉素、核酶、RII维胺酯、罗谷亚胺、rohitukine、罗莫肽、罗全美克、rubiginoneBl、ruboxyl、沙芬戈、saintopin、SarCNU、sarcophytolA、沙格司亭、Sdi1模拟体、司莫司汀、衰老来源的抑制剂1、有义寡核苷酸、信号转導抑制剂、信号转导调节剂、单链抗原结合蛋白、西佐喃、索布佐生、硼卡钠、乙酸苯酯钠、solverol、生长调节素结合蛋白、索纳明、膦门冬酸、spicamycinD、螺莫司汀、splenopentin、spongistatin1、角鲨胺、干细l&抑制剂、干细胞分裂抑制剂、stipiamide、间充质溶解素抑制剂、sulfinosine、强效舒血管肠肽拮抗剂、suradista、苏拉明、苦马豆碱、合成的JUJMI、他莫司汀、他莫昔芬甲碘化物、牛磺莫司汀、他扎罗汀、替可加兰钠、替加氟、tellurapyrylium、端粒酶抑制剂、替莫泊芬、替莫唑胺、替尼泊苷、tetrachlorodecaoxide、tetrazomine、thaliblastine、沙利度胺、漆可拉林、血小板生成素、血小板生成素模拟体、胸腺法新、胸腺生成素受体激动剂、胸腺曲南、甲状腺刺激激素、锡本紫红素乙酯、替4ML明、二氯环戊二烯钬、托泊替康、topsentin、托瑞米芬、全能干细胞因子、翻译抑制剂、维甲酸、triacetyluridine、曲西立滨、三曱曲沙、曲普瑞林、托烷司琼、妥罗雄脲、酪氨酸激酶抑制剂、tyrphostin、UBC抑制剂、乌苯美司、尿殖窦来源的生长抑制抑制、尿激酶受体拮抗剂、伐普肽、variolinB、载体系统、红细胞基因疗法、维拉雷瑣、藜声明、verdins、维替泊芬、长春瑞滨、vinxaltine、vitaxin、伏氯唑、扎诺特隆、折尼铂、亚节维和净司他丁斯酯。其他化学治疗剂包括抗增殖剂(例如异苏氨酸吡曲克辛)、抗前列腺肥大剂(例如西托糖普)、良性前列腺增生治疗剂(例如盐酸坦索罗辛)、前列腺生长抑制剂(例如喷托普利)以;O:射剂[1251血纤维蛋白原、[氟18FI脱氧葡糖、氟[18F多巴、碘[125I胰岛素、碘[131I胰岛素、碘[123I碘苄胍、碘[131I胆影酸钠、碘[131I安替比林、碘[131I膽甾醇、碘[123I马尿酸钠、碘[125I马尿酸钠、碘[131I马尿酸钠、碘[125I碘奥酮、碘[13U碘奥酮盐酸碟[123I非他胺、碘[125I双胺喹、碘[131I双胺喹、[1251碘酞钠、[1311碘酞钠、[1311碘酪氨酸、碘[125I塞罗宁、碘[131I塞罗宁、汞[179Hg丙醇醋酸盐、汞[203Hg丙醇醋酸盐、汞[197Hg丙醇、曱M代苯甲酸鸟噪呤(MIBG-131I和MIBG-123I)、硒[75Se蛋氨酸、锝[99mTc锑三硫化物胶体、锝[99mTc比西酸、锝[99mTc哋索苯宁、锝[99mTc羟乙二膦酸、锝[99mTc依沙美肟、锝[99mTc呋膦、葡庚糖酸锝[99mTc，锝[99mTc利多苯宁、锝[99mTc甲溴菲宁、99m锝美罗酸盐、99m锝美罗酸盐二钠、锝[99mTc巯替肽、锝[99mTc羥亚甲基二膦酸盐、锝[99mTc二乙三胺五乙酸盐、锝[99mTc三胺五乙酸一钓三钠、99m-锝曱氧基异丁基异腈、西硼肟锝[99mTc、锝[99mTc二巯丁二酸、锝[99mTc胶体硫、替將锝[99mTc、替曲膦[99mTc、锝[99mTcTiatide、碘[1251甲状腺素、碘[13U甲状腺素、碘[131I托泊酮、碘[125I]甘油三油酸酯和碘[131I甘油三油酸酯MIBG-131I和MIBG-123I是用于和本发明的含硝基呋喃的药物组合物囲同施用的特别优选的化学治疗剂。化学治疗剂的另一类别是抗癌的补充性增效剂包括三环类抗抑郁剂(例如丙咪嚷、地昔帕明、amitryptyline、氯丙咪，秦、曲米帕明、多虑平、去甲替林、普罗替林、阿莫沙平和马普替标)、非三环类抗抑郁剂(例如舍曲林、曲拉哇酮和西狀普兰)、Ca^拮抗剂(唎如维拉帕米、硝苯地平、尼群地平和卡罗维林)、钙调蛋白抑制剂(例如普尼拉明、三氟拉溱和氯丙咪噪)、两性霉素B、曲帕拉醇类似物(例如彡苯氧胺)、抗心律失常药(例如奎纳定)、抗高血压药物(例如利舍平)、硫醇消耗剂(例如布替诺林和亚砜胺(sulfoximine))和多数药物抗性还原药剂例如CremaphorEL.其它化學治疗剂包括番篇枝内酯、内酯、rolliniastatin、胍那克林、squamocin、泡番菡枝辛、squamotacin、紫杉烷、紫杉醇、吉西他滨、氨甲喋呤、钫國900482、FK國973、钫-66979、FK-317、5-FUFUDR、FdUMP、羟基脲素、多西他赛、discodermolide、大环内酯类抗肿瘤药、长春新碱、长春喊、长春瑞滨、meta-pac、依利替康、锡-38、10-OH开普拓、拓朴替康、依托泊苷、阿霉素、黄酮類抗肿瘤药、顺铂、卡铂、博来霉素、丝裂霉素C、普卡霉素、卡培他滨、阿糖胞苷、2-Cl-2'脱氧腺苷、氟錄宾-P04、米托蒽醌、米托唑胺、喷司他丁囷雷替曲塞.重要的一类化学治疗剂是紫杉烷(例如紫杉醇和多西紫杉醇)与他莫昔芬或芳香酶抑制剂瑞宁得(即阿那曲唑)组合的硝基呋喃化合粅尤其适用于乳腺癌和妇科癌症。可用作本发明其它活性成分的抗体实例包括但不仅限于抗CD20mAb(单克隆抗体)、利妥昔单抗、RituxanTM、抗CD20mAb、托西莫单抗Bexxar、抗HER2、曲妥珠单抗、HerceptinTM、抗HER2、MDX-210、抗CA125mAb、oregovomab、B43.13、OvarexTM、Breva-Rex、AR54、GivaRex、ProstaRex、抗EGF受体mAb、IMC-C225、ErbituxTM、抗EGF受体mAb、MDX-447、吉姆单抗奥佐米星、Mylotarg、CMA-676、抗CD33(WyethPharmaceuticals)、抗纟且织因子蛋白(TF)、(Sunol)、ior-c5、c5、抗EGF受體mAb、MDX-447、抗17-1AmAb、依决洛单抗、Panorex、抗CD20mAb(Y-卯labded)、#^莫单抗(10￡<:-Y2B8)、Zevalin、神经节苷脂GD3表位的抗独特型mAb模拟体、BEC2、抗HLA-DrlOmAb(131ILYM國1)、OncolymTM、抗CD33人源化mAb(SMARTM195)、ZamylTM、抗CD52humAb(LDP-03)、CAMPATH、抗CDlmAb、iort6、抗CAR(补体活化受體)mAb、MDX-ll、人源化双特异性mAb缀合物(补体级联激活剂)、MDX-22、OV103(Y-卯标记的抗体)、西洛果瓦、OncoScintTM、抗17國1AmAb、3622W94、抗VEGF(RhumAb画VEGF)、贝伐单抗、AvastinTM、抗TAC(IL-2受体)人源化抗体(SMART)、达克珠單抗、赛尼哌、抗TAG-72部分人源化的双特异性抗体MDX-220、高分子量蛋白聚糖的抗独特型mAb模拟体(I-Mel-l)、MELIMMUNE-1、高分子量蛋白聚糖的抗独特型mAb模拟体(I画Mel國2)、MELIMMUNE-2、抗CEAAb(hMN14)、CEACideTM、PretargetTM放射性乾向剂、hmAbHllscFv片段(NovomAb-G2)、HllscFv、抗DNA或DNA相关蛋白(组蛋白)mAb和缀合物、TNT(例如CotaraTM)、Gliomab-HmAb、GNI-250mAb、抗EGF受体mAb、EMD-72000、抗CD22人源化Ab、LymphoCide、非霍奇金抗CD33mAb与刺孢霉素的缀合物(CMA676)、吉姆單抗奥佐米星、MylotargTM、Monopharm-C、colon、GD2神经节普脂的抗独特型人mAb、4B5、黑色素瘤、抗EGF受体人源化Ab、ioregf/r3、抗iorc2糖蛋白mAb、iorc5、BABS(生物合成的抗体结合位点)蛋白、抗FLK-2/FLT-3mAb、mAb/小分孓缀合物、TAP(胂瘤活化的前药)、抗GD-2双特异性mAb、MDX-260、抗核自身抗体(结合核小体)、ANAAb、抗HLA-DRAb(SMART1D10Ab)、RemitogenTM、SMARTABL364Ab、抗CEA1131标记的mAb、ImmuRAIT-CEA可以根据本发明使用的其他抗体包括抗TNFa忼体，如针对类风湿性关节炎和克罗恩病的英夫利昔单抗(Remicade)和依那西普(Enbrel);帕利珠单抗、用于儿童受试者的抗RSV抗体、贝伐单抗、阿仑单抗、Campath-1H、BLyS-mAb、fSLE;忼VEGF2、抗Trail受体；B3mAb、m170mAb、mABBR96和Abx-CblmAb本发明涵盖大量种类的抗体及其片段，包括但不仅限于针对癌症抗原(如上所述)、细胞表面分子、基质细胞分子、胞外J^质分子和肿瘤血管系统相关分子的抗体细胞表面分子是在细胞表面表达的分子。除了胞外区以外其可还包含跨膜结构域和胞质结构域。实例包括HER2、CD20、CD33、EGF受体、HLA标记如HLA-DR、CD52、CD1、CEA、CD22、GD2神经节苷脂、FLK2/FLT3、VEGF、VEGFR等基质细胞分子是由基质细M达的分子。实例包括但不仅限于FAP和CD26胞外基質分子是存在于胞外基质中的分子。实例包括但不仅限于胶原、糖胺IMI(GAG)、蛋白聚糖、弹性蛋白、纤连蛋白和层粘连蛋白肿瘤血管系统相关汾子是由肿瘤(实体瘤而非全身性癌症如白血病)的血管系统表达的分子。如同癌症抗原一样肺瘤血管系统相关分子可以由正常的血管系统表达，但是其在胂瘤血管系统上的存在使其成为抗癌疗法的合适靶标在一些情况下，肺瘤血管系统结合分子在肿瘤血管系统上表达的水岼高于正常血管系统实例包括但不仅限于内皮糖蛋白(见美国专利No.5,660,827)、ELAM画1、VCAM画1、ICAM國1、与LAM画1>^应的配体、II类MHC抗原、氨基磷脂如磷脂酰丝氨酸和磷脂酰乙醇胺(如美国专利No.6,312,694中所述)、VEGFRl(FIt画l)和VEGFR2(KDR/Flk國l),以及其他肿瘤血管系统相关抗原，如美国专利No.5,776,427中所述的那些针对内皮糖蛋白的抗体描述于美国专利No.5,660,827中，包括TEC-4和TEC-ll以及识别与这些抗体相同的表位的抗体针对^J^磷脂的抗体描述于美国专利No.6,312,694中。抑制VEGF的抗体描述于美国专利No.6342，219中包括2C3(ATCCPTA1595)。对肺瘤血管系统具有特异性的其他抗体包括与生长因子及其受体的复合体反应的抗体所述复合体如FGF和FGFR的复合体或TGF卩和TGF卩R的复合体。后一类忼体描述于美国专利No.5,965,132中包括GV39和GV97。应当理解本发明所包括的抗体包括在本文中明确提及的这些，也包括与本文所提及的相同表位结合的忼体例如以下的抗体也可用于本发明，它们均是可购得的细胞凋亡抗体BAX抗体:抗人Bax抗体(单克隆)、抗人Bax抗体(多克隆)、抗鼠Bax抗体(单克隆)、抗鼠Bax忼体(多克隆)；Fas/Fas配体抗体抗人Fas/Fas配体抗体、抗鼠Fas/Fas配体抗体、粒酶抗体、粒酶B抗体；BCL抗体抗细胞色素C抗体、抗人BCL抗体(单克隆)、抗人bcl抗体(多克隆)、忼鼠bcl抗体(单克隆)、抗鼠bcl抗体(多克隆)；杂项凋亡抗体抗TRADD、TRAIL、TRAFF、DR3抗体、抗人Fas/Fas配体抗体、抗鼠Fas/Fas配体抗体；杂项凋亡相关抗体BIM抗体抗人、鼠bim抗体(多克隆)；^A、鼠bim抗体(单克隆)；PARP抗体抗人PARP抗体(单克隆)、抗人PARP抗体(多克隆)、抗鼠PARP抗体；胱天蛋白酶抗体抗人胱天蛋白酶抗体(单克隆)、抗鼠胱天蛋白酶抗体；27抗CD抗体抗CD29、PL18-5PanVera、抗CD29、PL4-3PanVera、抗CD41a、PT25-2PanVera、抗CD42b、PL52画4PanVera、抗CD42bGUR20-5PanVera、抗CD42b、WGA國3PanVera、抗CD43、1D4PanVera、抗CD46、MCP75-6PanVera、抗CD61、PL11-7PanVera、抗CD61、PL8-5PanVera、抗CD62/P國slctn、PL7國6PanVera、抗CD62/P-slctn、WGA-1PanVera、抗CD154、5F3PanVera;以及抗CD1、抗CD2、抗CD3、抗CD4、抗CD5、忼CD6、抗CD7、抗CD8、抗CD9、抗CDIO、抗CDll、抗CD12、抗CD13、抗CD14、抗CD15、抗CD16、抗CD17、抗CD18、抗CD19、抗CD20、抗CD21、抗CD22、抗CD23、抗CD24、抗CD25、抗CD26、抗CD27、抗CD28、抗CD29、抗CD30、抗CD31、抗CD32、抗CD33、抗CD34、抗CD35、忼CD36、抗CD37、抗CD38、抗CD39、抗CD40、抗CD41、抗CD42、抗CD43、抗CD44、抗CD45、抗CD46、抗CD47、抗CD48、抗CD49、抗CD50、抗CD51、抗CD52、抗CD53、抗CD54、抗CD55、抗CD56、抗CD57、抗CD58、抗CD59、抗CD60、抗CD61、抗CD62、抗CD63、抗CD64、抗CD65、忼CD66、抗CD67、抗CD68、抗CD69、抗CD70、抗CD71、抗CD72、抗CD73、抗CD74、抗CD75、抗CD76、抗CD77、抗CD78、抗CD79、抗CD80、抗CD81、抗CD82、抗CD83、抗CD84、抗CD85、抗CD86、抗CD87、抗CD88、抗CD89、抗CD卯、抗CD91、抗CD92、抗CD93、抗CD94、抗CD95、抗CD96、抗CD97、抗CD98、抗CD99、抗CD100、抗CD101、抗CD102、抗CD103、抗CD104、抗CD105、抗CD106、抗CD107、抗CD108、抗CD109、抗CDllO、抗CDlll、抗CD112、抗CD113、抗CD114、抗CD115、抗CD116、抗CD117、抗CD118、抗CD119、抗CD120、抗CD121、抗CD122、抗CD123、抗CD124、抗CD125、抗CD126、抗CD127、抗CD128、抗CD129、抗CD130、抗CD131、抗CD132、抗CD133、抗CD134、抗CD135、抗CD136、抗CD137、抗CD138、抗CD139、抗CD140、抗CD141、抗CD142、抗CD143、抗CD144、抗CD145、抗CD146、抗CD147、抗CD148、抗CD149、抗CD150、抗CD151、抗CD152、抗CD153、抗CD154、抗CD155、抗CD156、抗CD157、抗CD158、抗CD159、抗CD160、抗CD161、抗CD162、抗CD163、抗CD164、抗CD165、抗CD166、抗CD167、抗CD168、抗CD169、抗CD170、抗CD171、抗CD172、抗CD173、抗CD174、抗CD175、抗CD176、抗CD177、抗CD178、抗CD179、抗CD180、抗CD181、抗CD182、抗CD183、抗CD184、抗CD185、抗CD186、抗CD187、抗CD188、抗CD189、抗CD1卯、抗CD191、抗CD192、抗CD193、抗CD194、抗CD195、抗CD196、抗CD197、抗CD198、抗CD199、抗CD200、抗CD201、抗CD202、抗CD203、抗CD204、抗CD205、抗CD206、抗CD207、抗CD208、抗CD209、抗CD210、抗CD211、抗CD212、抗CD213、抗CD214、忼CD215、抗CD216、抗CD217、抗CD218、抗CD219、抗CD220、抗CD221、抗CD222、抗CD223、抗CD224、抗CD225、抗CD226、抗CD227、抗CD228、抗CD229、抗CD230、抗CD231、抗CD232、抗CD233、抗CD234、抗CD235、抗CD236、抗CD237、抗CD238、抗CD239、抗CD240、抗CD241、抗CD242、抗CD243、抗CD244、忼CD245、抗CD246、抗CD247、抗CD248、抗CD249、抗CD250等A^化因子抗体人CNTF抗体、人Eotaxin抗体、人上皮嗜中性粒细胞激活肽-78、人Exodus抗体、人GRO抗体、人HCC-1抗体、人1-309抗体、人IP-10抗体、人I-TAC忼体、人LIF抗体、人肝表达的趋化因子抗体、人淋巴毒素抗体、人MCP抗体、人MIP抗体、由IFN-y抗体资导的人单核因子、人NAP-2抗体、人NP-1抗体、AJi小板因子-4抗體、人RANTES抗体、人SDF抗体、人TECK抗体；鼠趋化因子抗体人B-细胞吸引鼠趋化因子抗体、趋化因子-l抗体、鼠Eotaxin抗体、鼠Exodus抗体、鼠GCP-2抗体、鼠KC抗体、鼠MCP抗体、鼠MIP抗体、鼠RANTES抗体、大鼠趋化因子抗体、大鼠趋化因子抗体、大鼠CNTF抗体、大鼠GRO抗体、大鼠MCP抗体、大鼠MIP抗体、大鼠RANTES抗体；细胞因子/细胞因子受体抗体人生物素化的细胞因子/细胞因子受体抗体、人IFN抗体、人IL抗体、人瘦素抗体、人制瘤素抗体、人TNF抗体、人TNF受体家族抗体、鼠生物素囮的细胞因子/细胞因子受体抗体、鼠IFN抗体、鼠IL抗体、鼠TNF抗体、鼠TNF受体抗体；抗CCR4抗体；大鼠细胞因子/细胞因子受体抗体大鼠生物素化的细胞洇子/细胞因子受体抗体、大鼠IFN抗体、大鼠IL抗体、大鼠TNF抗体；ECM抗体J!^f/前J!Lf、层粘连蛋白、J3^^、(人)、层粘连蛋白(人)、前胶原(人)、玻璃粘连蛋白/玻璃粘連蛋白受体、玻璃粘连蛋白(人)、玻璃粘连蛋白受体(人)、奸连蛋白/纤连蛋白受体、纤连蛋白(人)、纤连蛋白受体(人)；生长因子抗体人生长因子忼体、鼠生长因子抗体、猪生长因子抗体；杂项抗体杆状病毒抗体、钓粘蛋白抗体、补体抗体、Clq抗体、VonWillebrand因子抗体、Cre抗体、HIV抗体、流感抗体、人瘦素抗体、鼠瘦素抗体、鼠CTLA-4抗体、人CTLA國4抗体、P450抗体、RNA聚合酶抗体；神经生物学抗体淀粉样蛋白抗体、GFAP抗体、人NGF抗体、人NT-3抗体、人NT-4抗体。仍然有其他抗体可以用于本发明中其包括在参考文献(如MSRSCatalogofPrimaryAntibodies和Linscott目录)中歹'J出的抗体。在本发明的一些优选的实施方案中实施抗体为Avastin(贝伐单忼)、BEC2(米妥莫单抗)、Bexxar(托西莫单抗)、Campath(阿仑单抗)、CeaVac、Herceptin(曲妥珠单抗)、IMC-C225(centuximab)、LymphoCide(依帕珠单抗)、MDX-210、Mylotarg(吉姆单抗奥佐米星)、Panorex(依决洛单抗)、Rituxan(利妥昔单抗)、Theragyn(pemtumomab)、Zamyl和Zevalin(ibritumomabtituxetan)。本发奣还包括其抗体片段在一些优选的实施方案中，癌症抗原是VEGF、抗独特型mAb(GD3神经节苷脂模拟物)、CD20、CD52、抗独特型mAb(CEA模拟物)、ERBB2、EGFR、CD22、ERBB2XCD65(fc则、EpCam、PEM和CD33本發明包括抗体和抗体片段二者的用途。抗体可以是单克隆的或多克隆的并可以通过常规方法制备。它们可进一步分离或存在于腹水中這类抗体可进一步加工以产生嵌合抗体或人源化抗体，在下文中将更加详细讨论重要的是，如本领域所公知的抗体分子中只有一小部汾(互补位)涉及抗体与其表位的结合(一般参阅Clark,W.R.(1986)TheExperimentalFoundationsofModernImmunologyWiley&Sons,Inc.,NewYork;Roitt,I.(1991)EssentialImmunology,第七版，BlackwellScientificPublications,Oxford)例如，pFc和Fc区是补体级联的效应器，但是不涉及抗原结合Sl^切下了pFc'区的的抗体或生產为无pFc'区的抗体命名为F(ab')2片段，其保留了完整抗体的全部两个抗原结合位点类似地，a切下了Fc区的抗体或生产为无Fc区的抗体命名为Fab片段其保留了完整抗体分子的一个抗原结合位点。更进一步Fab片段由共价结合的抗体轻链和一部30分抗体重链(名为Fd)组成。Fd片段是抗体特异性的主要決定蔟(单个Fd片段可以与多达十种不同的轻链结合而不改变抗体特异性)且Fd片段在分离中保留表位结合能力。如本领域所公知的在抗体的忼原结合部分中存在互补性决定区(CDR)和构架区(FR)，互补性决定区直接与抗原的表位相互作用构架区维持互补位的三级结构(一般参阅Clark,1986;Roitt,1991)。在IgG免疫浗蛋白的重链Fd片段和轻链二者中都有分别被三个互补性决定区(CDR1到CDR3)分隔开的四个构架区(FR1到FR4)。CDR(尤其是CDR3区更尤其是重链CDR3)主要负责抗体特异性。本领域目前明确哺乳动物抗体的非CDR区可以被共特异性抗体(co-specificantibody)或异特异性抗体的类似区域取代，而同时保留原始抗体的表位特异性这最奣显地表现在"人源化"抗体的开发和使用中，其中非人CDR与人FR和/或Fc/pFc区共价接合，产生功能抗体因此，例如PCT国际公布号WO92/04381教导了人源化鼠RSV抗体嘚生产和使用其中鼠FR区的至少一部分已经^LA来源的FR区取代。这类抗体(包括完整抗体中具有抗原结合能力的片段)通常被称作"嵌合"抗体人源囮抗体或嵌合抗体的商业来源包括GenPharm、Xenotech、AbGenix和CellGeneSys。因此本领域普通技术人员应当明白，本发明还提供了F(ab)2、Fab、Fv和Fd片段；嵌合抗体，其中Fc和/或FR和/戓CDR1和/或CDR2和/或轻链CDR3链已经被同源的人或非/J^列取代；嵌合F(ab')2片段抗体其中FR和/或CDR1和/或CDR2和/或轻链CDR3区已经被同源的人或非人序列取代；嵌合的Fab片段抗體，其中FR和/或CDR1和/或CDR2和/或轻链CDR3区已经被同源的人或非A^列取代；和嵌合的Fd片段抗体其中FR和/或CDR1和/或CDR2区已经被同源的人或非人序列取代。本发明還包括所谓的单链抗体硝基呋喃化合物以治疗有效且生理可接受的量施用，该量是受试者在生理上能够容忍的、实现想要的有益生物效應所必需或足够的量所述有益的生物效应在该情况下是治疗癌症或抑制血管发生。可以例如通过在进行治疗后测量治疗的生理效应来测量有益生物效应生物有益效应可以是改善或完全消除由被治疗病症所引起的症状，或是抑制被治疗病症中的血管发生这例如通过成像時微血管(例如异常徵血管)数量的减少if^明。治疗有效且生理可接受的量可以取决于使用的具体化合物或化合物组合和/或疗法而变化其也可鉯取决于下述因素，如受治疗的病症(例如癌症)、受试者的身材或者疾病或病症的严重性本领域普通技术人员能够根据经验确定具体的硝基呋喃化合物或组合的有效量，而无需过度实验结合本文提供的教导，通it^多种化合物和权重因子中选择可以规划出不引起重大的毒性嘫而能够完全有效治疗具体受试者的有效的预防性或治疗性治疗方案，所iii5L重因子如效力、相对生物利用率、患者体重、不良副作用的严重性和优选的给药模式在一些情况下，使用硝基呋喃化合物或第二药剂的亚治疗剂量进行治疗或者二者均使用亚治疗剂量来治疗。例如当硝基呋喃化合物与抗癌剂一起l吏用时，硝基呋喃化合物和抗癌剂可以以亚治疗剂量施用并仍然产生想要的治疗效果。本文使用的"亚治疗剂量"是指这样的剂量其低于在不存在另一药剂的情况下施用时在受试者中产生治疗性结果的剂量。因此抗癌剂的亚治疗剂量是在鈈施用硝基呋喃化合物时不会在受试者中产生相同的或基^目似的治疗结果的剂量。抗癌剂的治疗剂量是医学领域中已知的这些剂量已经廣泛描述于参考文献中，并且是本领域所公知的如Remington'sPharmaceuticalSciences,第十八版,1990或thePhysicianDesktopReference;以及医务人员作为治疗癌症的指南而依赖的许多其他医学参考文献。对于夲文所述的任何化合物而言治疗有效量首先可以通过体外测定法如细胞培养物测定法来测定。也可以在动物研究中测定治疗有效量例洳，可以使用体内测定来评估带有或不带有第二药剂时硝基呋喃化合物的有效量所述测定例如肿瘤消退和/或防止肿瘤形成的测定。相关嘚动物模型包括如向动物受试者中注射(通常在确定的部位中)恶性细胞的测定一般地，对动物施用一定范围的硝基呋喃化合物剂量注射惡性细胞后肺瘤生长的抑制指示着降低癌症发生风险的能力。抑制预先存在的肺瘤的进一步生长(或减小其大小)指示着治疗癌症的能力可鉯根据所施用化合物的相对生物利用率和效力来调节两种药剂的应用剂量。基于上文所述的方法和其他方法调节剂量以实现最高效力这茬普通技术人员的能力范围内。本文所述化合物的受试者剂量通常范围在从约O.l照到30,000mg更通常从约1jig/天到加，000mg甚至更通常从约10照到15,000mg，最通常從约IOOng到10,000ng就受试者体重而言，典型的剂量范围从约0.1jig到200mg/kg/天更通常从约0.5到150mg/kg/天。在一些重要的实施方案中以从约l到100mg/kg/天的量施用化合物。在一些其他的重要的实施方案中以10-60mg/kg/天的量施用化合物。本文使用的"常规时间表"是指预先确定的指定时间段常规时间表可包括长度相同或不哃的时间段，只要该时间表是预先确定的即可例如，常规时间表可涉及每天2、3、4或6次施用、以以下为^ftfe施用每天、每两天、每三天、每四忝、每五天、每六天、每周、每月或其间任何固定数目的天或周、每两个月、三个月、四个月、五个月、六个月、七个月、八个月、九个朤、十个月、十一个月、十二个月等或者，预先确定的常规时间表可包括在第一周每日施用然后在数月中每月施用，之后每三个月施鼡任何具体的组合都应当涵盖在常规时间表中，只要预先确定适当的时间表包括在某天施用即可本发明的化合物可以在可药用的运栽體中施用，或在载体或递送体系中施用本发明的化学/物理栽体的一个实例^J^体^:体系。胶体^t体系包括基于脂质的体系包括水包油乳剂、胶束、混合的胶束和脂质体。本发明的一个优选的胶体体系AJ3旨质体脂质体是适合用作体内或体外递送载体的人工容器。已经显示尺寸范围從0.2-4.0nm的大单层容器(largeunilamellarvessel,LUV)能够包封大的大分子RNA、DNA和完整的病毒粒可以被包封在水性内部中，并以生物活性形式递送至细胞(Fraley等TrendsBiochem.Sci，()可以通过与特異性配体如糖、糖脂或蛋白质偶联而将脂质体靶向特定组织。可用于将脂质体靶向细胞的配体包括但不仅限于与细胞特异性受体及分子相互作用的完整分子或片段如抗体，其与细胞的细胞表面标记相互作用这类配体可以通过本领域技术人员公知的结合测定法容易地鉴定。在另一些实施方案中可以通过例如与前文所述的免疫治疗抗体之一偶联而将脂质体靶向癌。另外载体可以与核靶向肽偶联，所述核靶向肽会引导载体至宿主细胞核脂质体可购自GibcoBRL，例如LIPOFECTIN和LIPOFECTACETM,其由阳离子脂质如N國[l-(2,3二油酰|tJ0-丙基■NN，N國三曱基氯化铵(DOTMA)和二曱基双十八烷基溴化銨(DDAB)形成用于制造月旨质体的方法是本领域公知的，并描述于许多出版物中脂质体还综述于Gregoriadis，(iTrendsinBiotechnology,(-241。在另一实施方案中所述化学/物理载體是适用于递送(例如口服或粘膜递送)的生物相容性#^。这类微^/〉开于Chickering等,Biotech.AndBioeng"(-101和Mathiowitz等Nature,(0-414和PCT专利申请WO97/03702中。不可生物降解的和可生物降解的聚合物基质均鈳用于将硝基呋喃化合物和/或第二药剂递送给受试者优选可生物降解的基质。这类聚合物可以是天然或合成的聚合物所述聚合物根据想要释放的时间来选择，一般在数小时到一年或更长的量级中通常，最理想的是范围在数小时和三到十二个月之间的时间中释放该聚匼物任选地是在水中能够吸收多至其重量的约卯。/的^J^形式，并且还任选地与多价离子或其他聚合物交联聚合物基质优选地是微粒形式，如微球(其中药剂分散于整个固体聚合物基质中)或m囊(其中药剂储存于聚合物壳的核心中)用于包含药剂的其他聚合物基质形式包括膜、包衤、■、^物和支架。选择聚合物基质设备的大小和组成使得在引入该基质的组织中产生良好的释放动力学。还根据JH吏用的本发明递送方法来选择聚合物的大小所述递送方法通常是注射进组织中或通过气雾剂将悬浮液施用至鼻和/或肺区域中。优选地当使用气雾剂途径时，聚合物基质和硝基呋喃化合物包含在表面活性剂栽体中可以将聚合物基质组成选择为既具有有利的降解速率，又由具有生物粘附性(bioadhesive)的材料形成从而在基质被施用给受损的鼻和/或肺表面时进一步提高转移效率。基质组成也可以被选择为不降解而是通过扩散在更长的时間段中释放。在一些优选的实施方案中硝基呋喃化合物通过植入物施用给受试者。尤其感兴趣的生物粘附性聚合物包括由H.S.Sawhney,CP.Pathak和J.A.Hubdl在Macromolecules(-587中描述嘚生物蚀解水凝胶，该参考文献的教导并入本文还包括polyhyaluronicacids、SS^白、明胶、明胶蛋白、聚酸酐、聚丙烯酸、藻酸盐/酯、壳聚糖、聚甲基丙烯酸曱酯、聚曱基丙烯酸乙酯、聚甲基丙烯酸丁酯、聚甲基丙烯酸异丁酯、聚曱基丙烯酸己酯、聚甲基丙烯酸异癸酯、聚甲基丙烯酸月桂酯、聚甲基丙烯酸苯酯、聚丙烯酸甲酯、聚丙烯酸异丙酯、聚丙烯酸异丁酯和聚丙烯酸十八烷酯。本发明的组合物和方法在某些情况下可用于替换现有的手术方法或34药物疗法尽管在大部分情况下本发明可用于政善现有的疗法治疗这类病症的效力。因此组合疗法可用于治疗经受或将要经受癌症治疗的受试者。例如药剂可以与其他抗增殖(例如抗癌)疗法组合施用于受试者。合适的抗癌疗法包括去除肺瘤块的手术方法、化学疗法或局部^L射所述其他抗增殖疗法可以在用本发明的药剂治疗之前、同时或之后施用。在施用不同的治疗之间也可以有数小時、数天和在一些情况下为数周的延迟使得所述药剂可以在所述其他治疗之前或之后施用。在一些实施方案中硝基呋喃化合物可以与其他抗增殖治疗一起施用(例如在手术、放射或化学疗法之前)或单独施用，但时间并不仅限于此硝基呋喃化合物也可以与非手术的抗增殖(唎如抗癌)药物疗法组合施用。在一个实施方案中该药剂可以与抗癌剂如细胞抑制化合物组合白质)。在一些实施方案中细胞抑制化合物針对肺瘤的恶性细胞。在另一些实施方案中细胞抑制化合物是抑制血管平滑肌细胞或成纤维细胞生长和/或增殖的化合物。根据本发明的方法硝基呋喃或硝基呋喃类似物可以在其他抗癌剂之前、同时或之后被施用。施用时间表可包括以交替方式施用不同的药剂在另一些實施方案中，本发明的组合疗法可以在用其他为法治疗之前和期间、或期间和之后、或之前和之后递送在一些情况下，在施用其他抗增殖治疗之前24小时以上施用药剂在另一些实施方案中，可以对受试者施用多于一种抗增殖疗法例如，受试者可接受与手术和至少一种其怹抗增殖化合物组合的本发明药剂或者，该药剂可以与多于一种抗癌剂组合施用硝基呋喃化合物可以与其他治疗剂如佐剂组合，以增強免疫应答硝基呋喃或硝基呋喃类似物和其他治疗剂可以同时或依次施用。当同时施用其他治疗剂时它们可以在相同的配方中施用，戓在独立的配方中施用但同时施用所述其他治疗剂与硝基呋喃或硝基呋喃类似物的施用也可以在时间上分开，即在施用硝基呋喃或硝基呋喃类似物之前或之后的不同时间施用治疗剂这些化合物与药剂的施用之间的时间间隔可以是大约数分钟，或可以更长其他治疗剂包括但不仅限于核酸佐剂、非核酸佐剂、细胞因子、非免疫治疗性抗体、抗原等。核酸佐剂是属于核酸的佐剂实例包括免疫刺激性核酸分孓，如含35有CpG二核苷酸的免疫刺激核酸分子如2001年2月27日提交的美国专利US6,194,388Bl，2001年3月27日提交的US6,207,646Bl和2001年5月29日提交的US6,239,116Bl中所述"非核酸佐剂"是能够刺激体液囷/或细胞免疫应答的除本文所述免疫刺激性核酸之外的任何分子或化合物。非核酸佐剂包括例如产生d印o效应的佐剂、免疫刺激佐剂、产生depo效应并且刺激免疫系统的佐剂以及粘膜佐剂。本文使用的"产生depo效应的佐剂"是引起抗原(例如存在于癌症疫苗中的癌症抗原)在体内緩慢释放從而延长免疫细胞与抗原的接触的佐剂这类佐剂包括但不仅限于明矾(例如氢氧化铝、磷酸铝)；或基于乳剂的配方，包括矿物油、非矿物油、油包水或油包水包油乳剂、水包油乳剂如SeppicISA系列的Montanide佐剂(例如MontanideISA720，AirLiquideParis,France);MF-59(用Span85和Tween80稳定的水包角鲨烯乳剂；ChironCorporation,Emeryville,CA)和PROVAX(含有稳定去污剂和胶束形成剂的一种沝包油乳剂；IDECPharmaceuticalsCorporation,SanDiego，CA)"免疫刺激剂"是引起免疫系统细胞活化的佐剂。例如它可以引起免疫细胞产生和分泌细胞因子。这类佐剂包括但不仅限於从皂树(Q.saponaria)的树皮中纯化的急苷类如QS21(在HPLC分级分离的21st峰中洗脱的糖脂；Antigenics，Inc.,WalthamMA);聚二羧絲苯IL^磷腈(poly[di(carboxylatophenoxy)phosphazene,PCPP聚合物；VirusResearchInstitute,USA);脂多糖衍生物如单罅脂跣脂质A(MPL;RibiImmunoChemResearch,Inc.,Hamilton,MT)、胞壁酰②肽(MDP;Ribi)和苏氨酰-胞壁酰二肽(t-MDP;Ribi);OM-174(与脂质A相关的葡糖胺二糖；OMPharmaSA,Meyrin,Switzerland);和利什曼原虫(Leishmania)i^伸因子(纯化的利什曼原虫蛋白；CorixaCorporation,Seattle,WA)。"产生depo效应并刺激免疫系统的佐剂"是上述两种功能都具有的化合物这类佐剂包括但不仅限于ISCOMS(免疫刺激复合体，其含有混合的皂苷类、脂质并形成带孔的病毒大小的颗粒所述孔能够容纳抗原；CSL,Melbourne,Australia);SB-AS2(SmithKlineBeecham佐剂系统#2，其为含有MPL和QS21的水包油乳剂SmithKlineBeechamBiologicals[SBBIRixensart,Belgium);SB-AS4(SmithKlineBeecham佐剂系统#4其含有明巩和MPL;SBB,Belgium);形成胶束的非离子嵌段共聚物，如CRL1005(其含有疏水性聚氧丙烯嘚直链侧翼是聚氧乙烯链;Vaxcel,Inc.,Norcross,GA);以及Syntex佐剂制剂(SAF,含有Tween80和非离子嵌段共聚物的水包油乳剂；SyntexChemicals,Inc.,Boulder,CO)。本文使用的"非核酸粘膜佐剂"是与抗原结合施用至粘膜表面时能够在受试者中诱导粘J^疫应答的除免疫刺激核酸外的佐剂粘膜佐剂包括但不仅限于细菌毒素例如霍乱毒素(CT)，CT衍生物包括但不仅限於CTB亚基(CTB)(Wu等1998，Tochikubo等1998)、CTD53(Val到Asp)(Fontana等1995)、CTK97(Val到Lys)(Fontana等，1995)、CTK104(Tyr到Lys)(Fontana等,1995)、CTD53/K63(Val到AspSer到Lys)(Fontana等，1995)、CTH54(Arg到His)(Fontana等1995)、CTN107(His到Asn)(Fontana等，1995)、CTE114(Ser到Glu)(Fontana等1995)、CTE112K(Glu到Lys)(Yamamoto等，1997a)、CTS61F(Ser到Phe)(Yamamoto等1997a，1997b)、CTS106(Pro到Lys)(Douce等1997,Fontana等，1995)和CTK63(Ser到Lys)(Douce等1997,Fontana等，1995);紧密连接毒素(Zonulaoccludenstoxin)、zot;大肠杆菌不耐热肠毒素、不耐热毒素(LT)、LT衍生物包括但不仅限于LTB亚基(LTB)(Verweij等l"8)、LT7K(Arg到Lys)(Komase等,1998，Douce等1995)、LT61F(Ser到Phe)(Komase等，1998)、LT112K(Glu到Lys)(Komase等1998)、LT118E(GIy到Glu)(Komase等，1998)、LT146E(Arg到Glu)(Komase等1998)、LT192G(Arg到GIy)(Komase等，1998)、LTK63(Ser到Lys)(Marchetti等1998，Douce等1997，1998,DiTommaso等1996)和LTR72(Ala到Arg)(Giuliani等，1998);百日咳毒素(PT)(Lycke等1992,SpanglerBD，1992,Freytag和Clemments,1999,Roberts砵1995,Wilson等，1995)包括PT-9K/129G(Roberts等1995，Cropley等1995);毒素衍生物(见下文)(Holmgren等，1993Verweij等，1998Rappuoli等，1995Freytag和Clements,1999);脂质A衍生物(例如單裤酰脂產A,MPL)(Sasaki等，1998Vancott等，1998;胞壁跣二肽(MDP)衍生物(Fukushima等1996,Ogawa等，1989Michalek等，1983Morisaki等，1983);细菌外膜蛋白(例如博氏螺旋体(Borreliaburgdorferi)外表面蛋白A(OspA)脂蛋白、脑膜炎奈瑟氏菌外膜蛋皛)(Marinaro等1999，VandeVerg等1996);水包油乳剂(例如MF59)(Barchfield等，1999Verschoor等，1999,O'Hagan1998);铝盐(Isaka等，19981999);以及急苦类(例如QS21)AquilaBi叩harmaceuticals,Inc.,37Worcester,MA)(Sasaki等，1998,MacNeal等1998)、ISCOMS、MF曙59(用Span85和Tween80稳定的水包角篁烯乳剂；ChironCorporation,Emeryville,CA);SeppicISA序列的Montanide佐剂(例如MontanideISA720;AirLiquide,Paris,France);PROVAXC^有穩定去污剂和胶束形成剂的水包油乳剂；IDECPharmaceuticalsCorporation,SanDiego,CA);Syntext佐剂制剂(SAF;SyntexChemicals,Inc.,Boulder，CO);聚二羧^S^苯IL^裤腈(PCPP聚合物；VirusResearchInstitute,USA)和利什曼原虫延伸因子(CorixaCorporation,Seattle,WA)本发明还提供试剂盒，其包含本发明嘚化合物和/或药剂并任选地包含使用说明所述化合物和/或药剂可以以肠胃外形式(例如静脉内、肌内或鞘内给药)或口服形式如片剂、丸剂、胶嚢剂、小胶嚢等等存在。试剂盒还可含有第二活性成分或药剂其与硝基呋喃配制在一起或单独地配制。以各个形式提供的单位剂量應取决于硝基呋喃化合物是与第二活性成分或药剂一起使用还是单独使用试剂盒可任选地包含外包装如盒子或袋子。使用说明可以与^t单位或外包装分别提供或它可以印在分配单位或外包装中之一或之二上。所述化合物和/或药剂可以在一天^t单位如鼓泡包装(blisterpack)或刻度包装(dialpack)型分配器中提供优选地将周的天数或月的天数(例如l、2、3、4等)印刷在分配器上。如果每隔一天或一天两次(或更多)施用化合物和/或药剂则可以楿应地更改分配单位。提供以下的实施例以举例说明实施本发明的具体情况它们不旨在限制本发明的范围。本领域普通技术人员应当明皛本发明可应用于多种方法和组合物。在实施例中使用三种成神经细胞瘤细胞系(SMS-KCNR、SMS-KCN和IMR-32)证明了硝吹替莫对成神经细胞瘤的治疗潜能，所述成神经细胞瘤细胞系是成神经细胞瘤的3型儿童期形式的代表16不旨在受任何具体的理论束绰，相信硝吹替莫作用的分子机制包括在细胞內形成自由基917。由自由基导致的细胞损伤引起对调亡的诱导导致观察到的硝呔替莫毒性18-2°。较早的研究显示，用硝吹替莫治疗泰氏锥虫(T.cruzi)短膜虫期降低了细胞生存力，这与细胞中提高的超微结构损伤相关1()21。如实施例4中所述观察到硝呔替莫对SMS-KCNR、SMS-KCN和IMR-32成神经细胞瘤细胞系类姒的细胞毒效应。在所使用的不同成神经细胞瘤细胞系之间发现SMS-KCNR对硝呔替莫最为敏感，并使用该细胞系进行进一步的研究硝呋替莫显礻剂量和时间依赖性的细胞生存力降低(图2A)。细胞生存力的降低可能是由于该药物的细胞毒性所引起的细胞死亡或缺乏增殖如实施例5中所述，我们的研究使用BrdU测定法证明了剂量依赖性的细胞增殖降低如实施例6中所述，硝吹替莫的细胞毒性效应在显微镜检查期间是明显的其中发现细胞变圆并漂浮，提示发生了凋亡(图3A)进行TUNEL测定来证实凋亡。在该测定中使用末端脱氧核苷酸转移酶，用发荧光的脱氧胸苷类姒物标记在凋亡的情况下断裂后产生的DNA末端DNA中末端数的增加导致标记增加，这继而反映在荧光信号的增加中22用硝吹替莫处理后观察到提高的TUNEL染色(图3B)，这表明该药物在成神经细胞瘤细胞中引起了凋亡胱天蛋白酶是细胞凋亡机器的中心组分，胱天蛋白酶-3是被若干种抗癌药活化的执行者胱天蛋白酶(executionercaspase)23如实施例9中所详述的，用硝呋替莫处理后存在胱天蛋白酶-3的强活化这通过用抗体进行的经处理细胞的免疫印跡来显示，所述抗体对活化的胱天蛋白酶-3具有特异性(图4A)胱天蛋白酶-3活化是剂量依赖性的，这与经处理的细胞中以TUNEL染色提高为标志的凋亡┅致通过使用胱天蛋白酶抑制剂来研究胱天蛋白酶在硝呋替莫诱导的凋亡中的作用。用泛胱天蛋白酶抑制剂(pan-caspaseinhibitor)Z-VAD-FMK预处理细胞24逆转了成神经细胞瘤细胞中硝呋替莫诱导的凋亡(图4B)所述抑制剂具有有效抑制广泛的胱天蛋白酶的能力。Z-VAD-FMK对凋亡的这种逆转证实胱天蛋白酶参与了硝呋替莫诱导的成神经细胞瘤细胞凋亡。其他人已经使用泛胱天蛋白酶抑制剂Z-VAD-FMK通过经Flavopiridol处理的成神经细胞瘤细胞系来证实胱天蛋白酶诱导的凋亡25。TrkB是一种受体酪氨酸激酶是神经营养蛋白的高亲和力受体。与其他Trk类似神经营养蛋白对TrkB的活化与神经元细胞中的分化和对凋亡的抑淛相关26。TrkB几乎仅在生物学方面不利的成神经细胞瘤中表达23。BDNF与TrkB结合导致Ras/MAPK和PI3K/Akt信号转导途径的活化Akt途径已经显示对于细胞存活和对化学疗法的抗性而言至关重要3，15如实施例3中所详述的，当用BDNF刺激SMS-KCNR细胞时由于TrkB受体活化导致的Akt磷酸化在硝呋替莫存在下被抑制(图6A)。这提示硝呋替莫可通过抑制TrkB信号转导来发挥作用这一发现是很重要的，因为TrkB-BDNF途径促进细胞存活并且已知在成神经细胞瘤细胞中为细胞提供对DNA损伤性治疗剂的保护，导致化学抗性的发生"827。因此抑制该途径的药物在治疗成神经细胞瘤中是有价值的。另外硝呋替莫降低Akt磷酸化(图6B)，提示Akt可能是硝呋替莫的一个直接靶标与Akt类似，ERK1/2磷酸化被认为在成神经细胞瘤中促进存活并由BDNF/TrkB途径活化26。然而用硝呋替莫处理SMS-KCNR细胞并未改变ERK1/2磷酸化的磷酸化(数据未显示)。硝呋替莫的这些不同作用很可能反映了各个途径的独特功能例如，据报道Akt介导由BDNF诸导的对细胞存活的促进，而ERK1/2介导BDNF诱导的细胞分化28这些研究指出，硝呋替莫能够作为抗击成神经细胞瘤的治疗剂根据体内测试，硝呋替莫处理导致小鼠中肿瘤尺寸的显著减小见实施例12。在人中单独或与其他疗法组合的硝呋替莫处理导致肺瘤消退而无毒性副作用。其他研究者发现硝呋替莫在***中具有许多副作用，包括恶心/呕吐、肌痛、虚弱、头痛、感觉异常、多神经炎、神经障碍和癫痫发作6并确定它在儿童的耐受更好，如在针对查加斯病使用硝呋替莫的67名儿童的研究中所观察到的"然而在实施例13和14中详述的我们的研究中，没有患者由于不良药粅而被该研究排除511。总而言之实施例显示硝呋替莫对成神经细胞瘤细胞有细胞毒性。其在成神经细胞瘤中抑制增殖并诱导凋亡凋亡甴胱天蛋白酶-3的活化来介导。硝呋替莫抑制基本的和TrkB介导的Akt磷酸化提示其抑制TrkB信号转导。因此硝呋替莫是有效的细胞毒剂和细胞凋亡劑，并可作为抗击成神经细胞瘤的治疗剂实施例试浙斧/务将硝吹替莫(来自Bayer,Germany)溶于二甲亚砜(DMSO)中，作为20mg/ml储存液并以等分式样储存于-20X:下。将zVAD-fmk(CalbiochemLaJollaCA)以10mM嘚浓度溶于DMSO中并储存于-20匸下将脑源性神经营养因子(BDNF)溶于无菌水中(100ng/ml)并储存于國80C下(SantaCruzBiotechnolo