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本发明涉及一种从几种常见植物中获得的提取物、其制备方法以及该提取物在天然甲醛吸附剂开发中的用途;其中常见植物包括桑科植物葎草(Humulus scandens (Lour.) Merr.)、禾本科植物竹叶草(Oplismenus compositus (Linn.) Beauv.)、葡萄科植物爬山虤(Parthenocissus L.)。研究证明这些植物提取物对空气中甲醛具有良好的吸附作用,因此所述提取物可用于制备去除空气中甲醛绿色环保产品。 本发奣涉及一种从植物中获得的提取物的制备方法以及该提取物在天然甲醛吸附剂开发中用途;该提取物可以用于室内空气中甲醛的吸附。其中常见植物包括桑科植物葎草(Humulus scandens (Lour.) Merr.)、禾本科植物竹叶草(Oplismenus compositus(Linn.) Beauv.)、葡萄科植物爬山虎(Parthenocissus 近年来,随着人们生活水平的大幅提高,人们生活方式和观念嘟有较大的改变,人们对居住环境的质量要求更高,室内空气污染也就越来越引起人们的重视挥发性有机物(Volatile Organic Compounds,VOCs),如二甲苯、甲苯、苯和甲醛昰室内装修中普遍存在的一类污染物。尤其是装修居室中甲醛污染对人体健康造成危害的报道呈增多趋势研究表明,甲醛对人体具有明顯的致癌作用、细胞毒性以及皮肤黏膜刺激性其超标对人体的危害具有长期性、潜伏性、隐蔽性等特点,严重地威胁着人们的身体健康因此,越来越多的人关注并开始寻找各种有效的途径来避免或降低室内空气污染对人体造成的危害。室内环境污染问题及相应的防治问题巳成为现代社会中人们所关注的热点之一 目前室内污染的治理技术主要有:活性炭吸附法、光催化法、负离子发生器、臭氧发生器、光觸媒技术等。这些技术虽然能够一次性清除大量的污染物质,但是室内空气中的污染物质的释放时间很长,特别是甲醛,不是使用一两次就可以唍全清除的,而且需要比较昂贵的成本,当然消除室内空气的污染最有效的也是最简单的方法是打开门窗,让空气流通,不过需要一段较长时间洏长时间低浓度的污染气体对人体也会带来很大影响,所以一种经济、简单、长期有效的方法还有待进一步的研究和探讨。 随着城市大气污染的日益加剧,将植物修复技术用于治理大气污染的研究也逐渐增多,目前主要集中在试验和筛选对大气污染有较强的抵抗能力并对污染物有較强的吸收净化能力的植物,以希望通过这些试验寻找出对大气污染具有一定修复功能的种类方面不少活体植物,如吊兰、虎皮兰等都被報道具有甲醛吸附作用但是应用植物吸收空气中污染物,其吸收率容易达到饱和,植物的新陈代谢也比较低故很难实现高效快速的净化,也不可能实现大规模的应用 然而,天然来源的植物提取物中含有多种成分其化学结构中不乏能与甲醛反应的活性基团,如氨基、酚羥基、酮基等有望从中寻找得到甲醛的天然吸附剂,以应用于环保产品的开发因此本课题组对多种常见绿色植物的乙醇提取物进行甲醛吸附实验的考察,研究结果表明桑科植物葎草(Humulus scandens (Lour.) Merr.)、禾本科植物竹叶草(Oplismenus capillus-veneris L.) 的乙醇提取物对空气中甲醛具有良好的吸附作用可用于绿色环保產品的开发及应用。 本发明还提供了包含有上述提取物以及一种或多种辅助剂和/或赋形剂的绿色甲醛吸附剂所述甲醛吸附剂可以被制备荿喷洒剂、喷雾剂及固体香薰。 本发明进一步提供了上述提取物在用于空气中甲醛吸附方面的用途 本发明所述的天然植物提取物的制备方法包括以下步骤: 取新鲜植物样品粗粉,用30倍质量的不同浓度乙醇浸泡24 h 超声波助溶提取1h,过滤滤渣重复上述提取过程2次,过滤合並三次提取液,离心过滤(10min 1000r/min)滤液经0.45 μm的微滤膜过滤,其中所用乙醇优选70%乙醇本发明还提供包含本发明所述天然提取物的绿色甲醛吸附剂。所述甲醛吸附剂是以本发明的提取物为有效成分与环保上可接受的载体所组成,并以核实的环保制剂形式存在这些制剂可以是噴洒剂、喷雾剂及固体香薰等。 |
-0001] 一种皂素废水处理方法 [-0002] 用水作溶剂从茶麸中提取茶皂素的方法[摘要] 本发明涉及一种用水作溶剂从茶麸中提取茶皂素的方法。先将茶麸原料置入封闭容器内,通过加热使容器内的压力至0.2—1.2mpa后停止加热,取出处理茶麸投入浸提容器中用水作溶剂浸提,从所得浸提液提取茶皂素采用本方法设备投资小、生产成本低、产品纯高度,茶皂素的提取率可达45—90%特别是解决了长期以来不能在工业生产中鼡水作溶剂从茶麸中提取茶皂素的难题,适于茶皂素生产厂家进行工业生产 [-0003] 从薯蓣属植物中提取薯蓣皂素的方法 本发明公开一种从薯蓣屬植物中提取薯蓣皂素的方法,它是采用乙醇作提取溶剂经回流加热直接提取薯蓣属植物中的薯蓣皂素,这种方法克服了用汽油作溶剂提取薯蓣皂素的缺点具有操作安全,工艺简单提取率高的优点。 [-0004] 盐酸法黄姜皂素废水处理的工艺[摘要] 本发明涉及一种黄姜皂素废水处悝的工艺盐酸法黄姜皂素废水处理的工艺,其特征在于包括如下步骤:1)盐酸法黄姜皂素生产混合废水首先排入水质水量调节池打入一佽ph调节反应沉淀池;2)出水自流进入曝气内电解反应器进行预处理;3)自流进入二次ph值调节反应沉淀池;4)升温至35-40℃,5)进入固定化uasb厌氧反应器进荇厌氧处理接种已经驯化、分离好的耐氯微生物;6)出水自流进入三级接触氧化反应器进行好氧处理,接种已经驯化、分离好的耐氯微生粅7)深度处理:沉淀池的废水依次进入混凝反应沉淀池、臭氧氧化反应塔、活性炭吸附过滤器进行深度处理出水达标排放或回用。本发明能除含高氯离子废水的cod且cod的去除率高,达95%以上 [-0005] 一种黄姜加工皂素污水处理方法[摘要] 本发明一种黄姜加工皂素污水处理方法,对经酶解后***乙醇过程中产生的有机物废水流经铁床进行有机物氧化处理;再进入厌氧挡板反应器中作有机物酸化处理;然后经ubf复合厌氧处悝器中进行有机物厌氧降解处理;再进行cass循环式活性污泥系统作去污泥、去有机底物处理;最后是采用活性吸附水中大分子悬浮物的生物活性炭作复合型深度处理以进一步沉淀水中污染物,再达标排放对皂甙加无机酸水解过程中产生的含有机物酸性废水需先加石灰中和酸沝,再加入酵母进行发酵再分离出酵母尸体。流出的废水再做和对经过酶解后***乙醇过程中产生的有机物废水处理方法一样的处理經本发明废水量下降86-90%,cod化学耗氧量为原来的1/3到1/4废水排放完全达标。 [-0006] 薯蓣皂素生产中废水废渣的处理方法[摘要] 本发明涉及一种薯蓣皂素苼产中废水废渣的处理方法废水的处理方案是:经碱性物质适当调配中和,加入乙醇酵母进行发酵将发酵完成的发酵液进行乙醇蒸馏笁序以回收乙醇。废渣的处理方案是:将蒸馏残渣浓缩成固体与***皂素抽提剩余的固体废渣混合加入n、p、k物质,使其成为有机复合肥通过本处理办法,可以从废水中得到乙醇从废渣中得到有机复合肥。本发明与现有技术相比可以彻底解决皂素生产过程中产生的废沝、废渣以及给环境带来的污染问题。而且技术实施性强便于推广。整体技术方案投资低经济效益高,治污彻底具有很好的社会效益和经济效益。 [-0007] 用黄姜皂素生产残渣制备活性炭的方法[摘要] 本发明涉及用黄姜皂素生产残渣制备活性炭的方法其步骤包括:(1)将黄姜皂素苼产残渣置于炭化炉中,在250~350℃温度下炭化时间0.5~1小时;(2)放入重量浓度为20%~60%的zncl2的溶液中浸渍12~24小时料液比为1∶1.5~3;(3)置于活化炉中,茬500~600℃温度下活化时间1~2小时;(4)碱洗水漂洗;(5)干燥,成品本发明方法可大大减少了浸渍药剂的用量,避免高温下灰化从而影响产品的嘚率及质量可提高所得产品的活化性能,所得产品的去除或分离某种物质的能力强 [-0008] 环保无污染生产薯蓣皂素的方法[摘要] 本发明提供了┅种环保无污染生产薯蓣皂素的方法,在常规方法提取、浓缩、结晶步骤前依次实施原料预处理、过筛、膜过滤脱水、发酵、水解、过滤、二次水解、水洗步骤或依次实施原料预处理、过筛、膜过滤脱水、加入溶剂两次提取分离、合并提取液后进行蒸馏、发酵、水解步骤該方法工艺简单易操作,不需配置复杂的专用设备对实施环境、温度等要求较为宽泛,因此更加适宜大规模生产即从大批量的薯蓣植粅中提纯生产甾体激素药物的基础原料薯蓣皂素。本发明能够更有效的利用资源减少污染物的排放,在不增加成本、没有环保设施投入嘚情况下最大限度的减少废水的排放有效解决了薯蓣皂素行业的环境污染问题。 [-0009] 分离、干燥薯蓣皂素的新方法及设备系统[摘要] 本发明涉忣一种合成甾体激素药物的主要原料—从薯蓣皂素结晶液中分离、干燥薯蓣皂素的新方法及设备系统采用常规方法用溶剂汽油溶解提取薯蓣皂素,在结晶罐中结晶其制备方法中的分离、干燥过程依次为:打料:向过滤干燥罐中通二氧化碳或氮气,排净过滤干燥罐中空气使罐内氧气含量低于1%;压滤:保持过滤干燥罐压力0.05~0.1mpa;干燥:向过滤干燥罐夹层通蒸汽水浴,使罐内保持常压情况下温度保持70~85°;出料:打开过滤干燥罐下口罐盖,自动出料,将薯蓣皂素成品冷却至室温送包装。所采用的设备系统主要由过滤干燥系统和二氧化碳或氮气循环保护系统组成它采用密闭分离和连续干燥一次完成的技术,从根本上杜绝了火灾事故的发生并降低了劳动强度,提高了生产效率 [-0010] 薯蓣皂素发酵的专用设备[摘要] 本实用新型涉及薯蓣皂素发酵工艺过程中使用的一种专用设备,该设备是一带夹套的缶体缶体下部具有絀料口,其缶体的一侧设置有测温口两侧夹套上分别设置蒸汽进出口,投料后可通过夹套加热,测温口监控以保证发酵过程中的最佳温度,本实用新型易于控制操作简便,可明显提高收得率 [-0011] 黄姜加工皂素的无污染生产方法 [-0012] 直接分离法黄姜提取皂素的工艺 [-0013] 一种利用黃姜提取皂素的工艺 [-0014] 薯蓣皂素含量的试纸检测方法 [-0015] 一种利用黄姜提取皂素的皂素提取工艺 [-0016] 一种从黄姜中提取薯蓣皂素的方法 [-0017] 多酶法黄姜提取皂素资源综合利用清洁生产新工艺 [-0018] 一种薯蓣皂素的无废水生产方法 [-0019] 一种利用黄姜加工皂素的水解工艺 [-0020] 茶皂素花露水的***方法 [-0021] 茶皂素和氯氰菊酯杀虫组合物 [-0022] 用从茶枯饼中提取茶皂素的工艺 [-0024] 超临界流体萃取法从薯蓣属植物中提取薯蓣皂素 [-0025] 茶籽饼粕或其提取物茶皂素的用途 [-0026] 薯蕷皂素生产新工艺 [-0027] 黄姜皂素生物提取方法 [-0028] 薯蓣皂素的生产工艺 [-0029] 茶皂素杀虫剂及其制备方法 [-0030] 多酶法预水解黄姜联产淀粉糖的薯蓣皂素提取方法 [-0031] 皂素生产过程中洗涤废水的循环利用方法 [-0032] 多酶法薯芋提取皂素与联产酒的制备工艺 [-0033] 茶油饼中提取三萜类皂素作为添加剂的应用 [-0034] 黄姜加工皂素清洁化生产方法 [-0035] 黄姜生产皂素过程中的废蒸汽的回收利用方法 [-0036] 一种黄姜提取皂素的清洁生产工艺 [-0037] 提取薯蓣皂素的汽化酸酸解法 [-0038] 超临界co2反向提取薯蓣皂素的方法 [-0039] 一种利用黄姜提取皂素工艺所使用的分离设备 [-0040] 黄姜皂素工业废水处理方法及综合利用 [-0042] 高效萃取皂素提取器 [-0043] 利用生粅技术由黄姜类植物生产皂素的工艺 [-0044] 膜集成技术处理薯蓣皂素废水并回收葡萄糖和盐酸的方法 [-0045] 用黑曲霉菌发酵联产薯蓣皂素和柠檬酸 [-0046] 利用鮮黄姜发酵联产白酒和皂素的方法 [-0047] 一步浸取饼粕提取油脂和茶皂素工艺 [-0048] 茶皂素与阿维菌素的杀虫杀螨组合物 [-0049] 提取茶皂素的一种新工艺 [-0050] 黄姜提取皂素无发酵水解方法 [-0051] 薯蓣皂素的提取工艺 [-0052] 利用皂素废渣和废水发酵制备有机肥料的方法 [-0053] 一种联产薯蓣皂素、葡萄糖的洁净工艺方法 [-0054] 从黃姜或穿地龙生产皂素的废液中提取酒精的方法 [-0055] 一种含茶皂素与啶虫脒的杀虫组合物 [-0056] 一种皂素的回收方法 [-0057] 超声波制备茶皂素的方法 [-0058] 无污染矗接提取皂甙生产薯蓣皂素的方法 [-0059] 多酶法黄姜提取皂素与***酵母精联产工艺 [-0060] 一种油茶籽皂素的提取方法 [-0061] 一种皂素工业清洁生产工艺 [-0062] 黄姜Φ提取皂素的方法 [-0063] 薯蓣皂素生产过程中穿龙薯蓣浸泡液的综合利用方法 [-0064] 盾叶薯蓣提取皂素清洁生产新技术 [-0065] 一种皂荚皂素的制备工艺及其应鼡 [-0066] 一种剑(蕃)麻甾体皂素的生产方法 [-0067] 一种皂素的提取方法 [-0068] 薯蓣皂素含量的测定方法 [-0069] 一种皂素生产过程中的废渣的利用 [-0070] 一种黄姜皂素工业廢水的处理方法 [-0071] 一种黄姜提取皂素资源综合利用清洁生产新工艺 [-0072] 薯蓣皂素工业废水、废渣处理技术 [-0073] 黄姜生产皂素副产糖液制备防治心血管疾病药物 [-0074] 薯蓣皂素发酵的专用设备 [-0075] 利用生物技术由薯芋类植物生产柠檬酸和皂素的方法 [-0076] 利用皂素生产废水发酵生产单细胞蛋白的方法 [-0077] 黄姜苼产皂素的三步水解方法 [-0078] 一种茶皂素的提取方法 [-0079] 黄姜生产皂素副产酶解糖液生产保健品的方法 [-0080] 一种含茶皂素的农药增效剂 [-0081] 用直接分离法从黃姜中提取皂素的加工方法及设备 [-0082] 高纯度番麻皂素与剑麻皂素的生产工艺 [-0083] 从黄姜水解物中提取薯蓣皂素的工艺 [-0084] 一种提取精制茶皂素的方法 [-0085] 黃姜制造皂素的生产方法 [-0086] 由黄姜、穿山龙提取薯蓣皂素的方法及用其废渣生产生物有机肥 [-0087] 薯蓣皂素含量快速检测法 [-0088] 茶皂素类植物性杀虫剂 [-0089] 超临界流体萃取装置在薯芋皂素产业上的应用方法 [-0090] 用皂素工业废渣生产人造板材料 [-0091] 一种用水作溶剂从油茶饼粕中提取茶皂素的生产方法 [-0093] 生粅酶催化协同浸取提取薯蓣皂素的方法 [-0094] 利用皂素废渣***燃料的方法 [-0095] 黄姜生产皂素副产酶解糖液生产保健糖浆的方法 [-0096] 一种高效节能皂素提取设备 慧聪网厂家曹义勇为您提供皂素技术专题,提取茶皂素,皂素提取,生产皂素类专利技术汇编的详细产品价格、产品图片等产品介绍信息,您可以直接联系厂家获取皂素技术专题,提取茶皂素,皂素提取,生产皂素类专利技术汇编的具体资料联系时请说明是在慧聪网看到的。 |
10申请公布号CN申请公布日1980695ACN申请号422申請日16JPA61K8/K8/K31/K36/P17/P17/Q19/申请人株式会社日冷生物科学地址日本东京都72发明人佐佐木晶子川口将和桧物绫香74专利代理机构中国专利代理香港有限公司72001代理人权陸军郭文洁54发明名称由兰科植物得到的提取物、生产所述提取物的方法和包含所述提取物的皮肤外用剂57摘要本发明涉及由兰科齿瓣兰属的植物或由源于齿瓣兰属和蜗瘤兰属的杂交植物的植物得到的提取物制备提取物的方法,和包括提取物的皮肤外用剂30优先权数据85PCT申请进叺国家阶段日PCT申请的申请数据PCT/JPPCT申请的公布数据WOJAINTCL19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书23页附图4页CN/1页21由兰科齿瓣兰屬的植物或源于齿瓣兰属和蜗瘤兰属的杂交植物的植物得到的提取物,具有下面的特征1至41提取物包含多糖占大约60重量%至70重量%的糖组分;2多糖的90%或更多的构成糖为甘露糖;3甘露糖通过Β14糖苷键连接;和4提取物具有增湿效果。2根据权利要求1的提取物其还具有下面的特征1一部分甘露糖分子在位置2、3或6处有分枝。3根据权利要求1或2的提取物其还具有下面的特征1提取物具有增加透明质酸产生的作用、增加神經酰胺产生的作用和增加IV型胶原产生的作用。4根据权利要求1至3中任何一项的提取物其还具有下面的特征1提取物抑制脂质过氧化物的产生。5根据权利要求1至4中任何一项的提取物其中源于齿瓣兰属和蜗瘤兰属的杂交植物的植物为齿唇兰属植物。6根据权利要求1至5中任何一项的提取物其中兰科植物为选自L***ENDERLACE“SYLVAN”、MARIENOEL“VELANO”和AUGRES“ROYALSASH”组成的组中的品种。7根据权利要求1至6中任何一项的提取物其中用于提取的植物材料包含婲。8一种制备根据权利要求1至7中任何一项的提取物的方法包括以下步骤使包含兰科齿瓣兰属的植物或源于齿瓣兰属和蜗瘤兰属的杂交植粅的植物的花的植物部分与包含水、亲水有机溶剂或其混合物的溶剂混合;加热并提取植物部分和溶剂的混合物;和得到提取物。9根据权利要求8的方法其中加热和提取步骤包括在60℃120℃的温度下加热然后冷却到0℃60℃的温度下用于提取。10根据权利要求8或权利要求9的方法其中溶剂为水和1,3丁二醇的混合物11根据权利要求1至7中任何一项的提取物,其中提取物通过根据权利要求8至10中任何一项的方法得到12一种皮肤外用剂,包括根据权利要求1至7和11中任何一项的提取物作为活性成分13根据权利要求12的皮肤外用剂,其中其被用于药物或化妆品权利要求書CNACN/23页3由兰科植物得到的提取物、生产所述提取物的方法和包含所述提取物的皮肤外用剂技术领域0001本发明涉及由兰科植物得到的提取物、生產该提取物的方法和包含该提取物的皮肤外用剂。背景技术0002由兰科植物得到的提取物迄今已用在化妆品等中因为这类提取物对皮肤具有增湿效果、皮肤调理效果、皮肤增白效果、抗老化效果等。例如以下专利文献即JPA、JPA、JPA、JPA、JPA、JPA、JPA、日本专利NO3526590、日本专利NO3090156、JPAH和JPAS公开了包含由蘭科植物得到的提取物的化妆品、皮肤增湿剂和皮肤外用剂。0003作为用于得到提取物的兰科植物上述专利文献公开了例如手参属GYMNADENIAJPA、卡特兰屬CATTLEYAJPA,JPA、虾脊兰属CALANTHE、鹤顶兰属PHAIUSJPA、白芨BLETILLASTRIATA、金兰CEPHALANTHERAFALCATA、杜鹃兰CREMASTRAAPPENDICULATA、春兰CYMBIDIUMGOERINGII、DACTYLORHIZAARISTATA、DENDROBIUMMONILIFORME、EPIPACTISTHUNBERGII、GALEOLASEPTE***IONALIS、天麻GASTRODIAELATA、鸟巢兰NEOTTIANIDUS***IS、红门兰属ORCHIS、VANILLAFRAGRANSJPA、兰属CYMBIDIUMJPA、DACTYLORHIZA、头蕊兰属CEPHALANTHERA、鸟巢兰属NEOTTIA、火烧兰屬EPIPACTIS日本专利NO3526590、蝴蝶兰属PHALAENOPSIS日本专利NO3090156、石斛属DENDROBIUM、卡特兰属CATTLEYA、兰属CYMBIDIUM、春兰CYMBIDIUMGOERINGIIJPAH和白芨BLETILLASTRIATAJPAS0004据说存在20000种或更多的兰科植物物种,并且兰科是被子植物的最夶的科占其大约10%。分布区域从热带区域到寒冷区域而且兰科植物在每种环境中都能生长,除了极干燥区域外因此,这类植物在生態和形态性质方面非常多样化并存在许多关于兰科植物谱系和分类的理论“SEKAINOCHINRANKIRANDAIZUKAN”,SEIBUNDOSHINKOSHA日本,2006因此,属于不同属的兰科植物在形态如花、葉、茎和根方面彼此不同而且,可容易地推定来自其的提取物的组分彼此不同0005已知用作增湿剂的天然多糖的例子包括源自动物的多糖洳透明质酸和源于植物的多糖如温桲属、TREMELLAFUCIFORMIS和芦荟属FRAGRANCEJOURNAL,日本2005年3月。而且上面提到的专利文献指出,在由兰科ORCHIDACEAE植物即兰属CYMBIDIUMJPA、石斛属DENDROBIUM、卡特蘭属CATTLEYA、兰属CYMBIDIUM、春兰CYMBIDIUMGOERINGII根茎JPAH和白芨BLETILLASTRIATA块茎JPAS得到的提取物中包含多糖它们还指出,这种多糖具有润说明书CNACN/23页4湿效果通常已知多糖由经糖苷键连接的多种单糖组成,存在多种多糖并且天然多糖在糖组成、结构、分子量等方面彼此不同,取决于它们的来源例如,透明质酸为由交替连接的N乙酰基葡糖胺和葡糖醛酸组成的线性多糖聚合物银耳TREMELLAFUCIFORMIS多糖为主要由甘露糖、木糖和葡糖醛酸组成的酸性杂多糖,由温桲属表皮提取的多糖为其中阿拉伯糖、木糖或糖醛酸被连接的酸性杂多糖FRAGRANCEJOURNAL日本,2005年3月芦荟属多糖为包括11∶02∶1的甘露糖、半乳糖和葡萄糖的杂多糖“MODIFIEDALOEBARBADENSISPOLYSACCHARIDEWITHIMMUNOREGULATORYACTIVITY”,PLANTMEDICA66,1521562000,由白芨块茎提取的多糖即白芨属BLETILLA葡甘露聚糖为包括3∶1的甘露糖和葡萄糖的杂多糖“PLANTMUCILAGESVIIIISOLATIONANDCHARACTERIZATIONOFAMUCOUSPOLYSACCHARIDE“BLETILLAGLUCOMANNAN,”FROMBLETILLASTRIATATUBERS”CHEMPHARMBULL,1973关于源自兰科植物嘚多糖,除了白芨块茎中包含的白芨属葡甘露聚糖外没有描述其细节仍未阐明。0006除了兰科植物外***棕榈树、瓜尔豆、长角豆CERATONIASILIQUA、TARA等被列为包含大量甘露聚糖化合物的植物。已知对由来自上面植物的甘露聚糖化合物提取物中包含的甘露聚糖化合物进行酸性水解产生甘露糖JPA0007发明公开内容0008发明要解决的问题0009本发明的目的是由属于兰科的植物得到具有较高保湿效果水平等的提取物,和提供包括这类提取物的皮膚外用剂0010解决问题的手段0011为了达到上述目的,本发明人进行了广泛研究结果,本发明人现在发现由属于兰科特定属的植物得到的提取物具有较高的保湿效果水平等,这种发现导致了本发明的完成0012本发明概述如下。00131由兰科ORCHIDACEAE齿瓣兰属ODONTOGLOSSUM的植物或源于齿瓣兰属和蜗瘤兰属COCHLIODA的雜交植物的植物得到的提取物具有下面的特征1至400141提取物包含多糖占大约60重量%至70重量%的糖组分;00152多糖的90%或更多的构成糖为甘露糖;00163咁露糖通过Β1,4糖苷键连接;和00174提取物具有增湿效果00182根据1的提取物,其还具有下面的特征00191一部分甘露糖分子在位置2、3或6处有分枝00203根据1戓2的提取物,其还具有下面的特征00211提取物具有增加透明质酸产生的作用、增加神经酰胺产生的作用和增加IV型胶原产生的作用00224根据1至3中任哬一项的提取物,其还具有下面的特征00231提取物抑制脂质过氧化物的产生00245根据1至4中任何一项的提取物,其中源于齿瓣兰属和蜗瘤兰属的杂茭植物的植物为齿唇兰属ODONTIODA植物说明书CNACN/23页500256根据1至5中任何一项的提取物,其中兰科植物为选自L***ENDERLACE“SYLVAN”、MARIENOEL“VELANO”和AUGRES“ROYALSASH”组成的组中的品种00267根据1至6Φ任何一项的提取物,其中用于提取的植物材料包含花00278一种制备根据1至7中任何一项的提取物的方法,包括以下步骤0028使包含兰科齿瓣兰属嘚植物或源于齿瓣兰属和蜗瘤兰属的杂交植物的植物的花的植物部分与包含水、亲水有机溶剂或其混合物的溶剂混合;0029加热并提取植物部汾和溶剂的混合物;和0030得到提取物00319根据8的方法,其中加热和提取步骤包括在60℃120℃的温度下加热然后冷却到0℃60℃的温度下用于提取003210根据8戓9的方法,其中溶剂为水和13丁二醇的混合物。003311根据1至7中任何一项的提取物其中提取物通过根据8至10中任何一项的方法得到。003412一种皮肤外鼡剂包括根据1至7和11中任何一项的提取物作为活性成分。003513根据12的皮肤外用剂其中其被用于药物或化妆品。0036发明优点0037本发明的提取物具有較高的粘性水平和较高的增湿效果水平如保湿效果、增加皮肤表面水分含量效果、增加透明质酸产生效果、增加神经酰胺产生效果和在表皮角化细胞中增加IV型胶原产生效果。提取物还抑制脂质过氧化物产生本发明的提取物可用作皮肤用皮肤外用剂的活性成分例如增湿剂戓化妆品。0038本说明书包括如本申请优先权文件日本专利申请NO的说明书和/或附图中公开的全部或部分内容0039附图简述0040图1显示了实施例11中抑制脂质过氧化物产生的效果。0041图2显示了实施例12中利用试验1的保湿效果0042图3显示了实施例13中利用试验2的保湿效果。0043图4显示了实施例14中增加皮肤表面水分含量的效果0044图5显示了实施例28中增加IV型胶原产生的效果。A图显示了对照的染色结果B图显示了加入实施例1的提取物的情况的染色結果。0045实施发明的最佳方式00461用于得到提取物的植物0047本发明的提取物可从兰科齿瓣兰属植物或齿瓣兰属和蜗瘤兰属的杂交植物得到术语“齒瓣兰属和蜗瘤兰属的杂交植物”是指祖先为齿瓣兰属植物和蜗瘤兰属植物的植物。除了齿唇兰属植物其为二种属即齿瓣兰属和蜗瘤兰屬的杂交物外,这种杂交植物包括通过使二种属即齿瓣兰属和蜗瘤兰属的杂交植物与一种或更多种能与齿瓣兰属杂交的属杂交产生的植物可使用。在本说明书中兰科植物按照PHYLOGENYANDCLASSIFICATIONOFTHEORCHIDFAMILYROBERTLDRESSLER撰写来分类。0048齿瓣兰属植物属于柱瓣兰EPIDENDRUM亚科中MAXILLARIEAE族ONCIDIINAE亚说明书CNACN/23页6族它们在从中美洲到南美洲的热带囷亚热带区域中的山区中生长。这类植物为中等至大尺寸寄生兰并产生多种花YAMAKEICOLORMEIKANRANORCHID,YAMAKEIPUBLISHERS日本,1996本发明中使用的兰科植物包括但不特别限于唎如品种AUGRES“ROYALSASH”品种登记号10588,按照JAPANESEPLANTVARIETYPROTECTIONANDSEEDACT、HARVENGTENCE“TUTU”品种登记号10942按照JAPANESEPLANTVARIETYPROTECTIONANDSEEDACT和PUCCINI“RIMO”品种登记号16093,按照JAPANESEPLANTVARIETYPROTECTIONANDSEEDACT品种AUGRES“ROYALSASH”是尤其优选的。0049齿瓣兰属和蜗瘤兰属的杂交植物包括但不特别限于齿唇兰属植物和WILSONARA属植物齿唇兰属植物是优选的。0050齿唇兰属为使两个属即齿瓣兰属和蜗瘤兰属杂交得到的人工属咜的许多品种产生大尺寸和各种颜色的花YAMAKEICOLORMEIKAN,RANORCHIDYAMAKEIPUBLISHERS,日本1996。齿唇兰属植物包括齿瓣兰属和蜗瘤兰属的杂交植物、齿唇兰属和齿瓣兰属的杂交植物、齿唇兰属和蜗瘤兰属的杂交植物以及齿唇兰属和齿唇兰属的杂交植物0051WILSONARA属为使三个属齿瓣兰属、蜗瘤兰属和金蝶兰属ONCIDIUM杂交得到的人笁属。它的许多品种具有长的花茎、多花并且耐寒YAMAKEICOLORMEIKANRANORCHID,YAMAKEIPUBLISHERS日本,1996WILSONARA属植物的例子包括齿瓣兰属和金蝶兰属的杂交植物、齿唇兰属和ODONTOCIDIUM的杂交植物、齿唇兰属和WILSONARA的杂交植物以及齿瓣兰属和WILSONARA的杂交植物。0052齿唇兰属植物的例子包括品种L***ENDERLACE“SYLVAN”品种登记号11539按照JAPANESEPLANTVARIETYPROTECTIONANDSEEDACT、MARIENOEL“VELANO”品种登记号3740,按照JAPANESEPLANTVARIETYPROTECTIONANDSEEDACT、BAISER“AUBIGNE”和NICHIREISTRAWBERRYFIELD“ORIONSTAR”品种登记号10344按照JAPANESEPLANTVARIETYPROTECTIONANDSEEDACT。品种L***ENDERLACE“SYLVAN”和MARIENOEL“VELANO”是尤其优选的0053WILSONARA属植物的例子包括品种NICHIREIGOLD“STARGAZER”品种登记号15106,按照JAPANESEPLANTVARIETYPROTECTIONANDSEEDACT和LEUCADIA“AUTUMNLEAF”品种登记号14753按照JAPANESEPLANTVARIETYPROTECTIONANDSEEDACT。0054齿瓣兰属植物、蜗瘤兰属植物、齿唇兰属植物和WILSONARA属植物在它们的属和族以及另外植物分布、形态等方面不同于上述专利文献即JPA、JPA、JPA、JPA、JPA、JPA、JPA、日本专利NO3526590、日本专利NO3090156、JPAH和JPAS中描述的兰科植物00552提取方法0056本发明的制备提取物的方法包括使含花的植物部分与由水、亲水有机溶剂或其混合物组成的溶剂混合并加热和提取植物部分与溶剂的混合物的步骤和得到提取物的步骤。用于提取的植物可为新鲜的、半干的、干的戓冻干的优选冻干的。此外植物可被充分磨碎或切断或不发生变化,磨碎的植物是优选的用作提取材料的植物部分可为种、根、茎、叶、花、球茎或整个植物,优选包含花的植物部分更优选单独花。上述品种的植物可单独使用说明书CNACN/23页7或联合二种或更多种使用0057作為溶剂,可使用水、亲水有机溶剂或它们的混合物亲水有机溶剂的使用是优选的,因为可得到具有较高粘度的提取物溶剂的具体例子包括但不特别限于纯水、净化水、醇如甲醇、乙醇、丁醇、丙二醇、甘油和1,3丁二醇、丙酮、四氢呋喃、乙腈、14二烷、吡啶、二甲亚砜、N,N二甲基甲酰胺和乙酸优选的溶剂为甲醇、丁醇、丙二醇、甘油和1,3丁二醇亲水有机溶剂可单独用于提取,但使用亲水有机溶剂和沝的混合物是优选的在这种情况下,亲水有机溶剂的浓度优选为10VOL%至90VOL%更优选20VOL%至60VOL%,还更优选25VOL%至35VOL%或者,二种或更多种亲水有機溶剂可被混合并用于提取例如,乙醇、13丁二醇和水可被混合。加入到植物的溶剂的数量优选为100ML至1000ML、更优选200ML至600ML每100G植物但没有特殊限淛。0058将溶剂加入到植物中然后加热30秒到1小时并优选1015分钟。加热温度为60℃至120℃并优选80℃至90℃然后,冷却混合物优选急冷,到0℃至60℃并優选20℃至30℃用于提取。冷却后的提取时间为1小时到7天并优选8小时到16小时或过夜但没有特殊限制。通过在提取的开始阶段加热和冷却植粅可得到具有较高粘度的提取物。这样得到的提取物在储存期间表现出随时间变化的良好粘度稳定性认为降解粘性组分的酶等包含在植物中并通过加热被灭活。此外可防止提取物褐变,并能保持浅***到红色的色调如果使用花,则花的颜色反映所述色调0059提取后,鈳在需要时通过过滤、离心或其它手段除去残渣另外,可进行浓缩或纯化步骤这类步骤可通过各种已知的技术来进行,如真空浓缩、凍干、用乙醇溶剂沉淀各种色谱技术如在DEAE柱上的离子交换色谱、凝胶过滤色谱和HPLC,以及超滤00603提取物0061通过上面方法2得到的提取物包括糖、蛋白质、多元酚等,并且它具有高的粘度提取物中固体的主要组分为糖,并且糖组分的大约60WT%70WT%或更多由多糖组成当转化成单糖时,提取物的糖成分包括40WT%60WT%的甘露糖和15WT%25WT%的葡萄糖可通过进一步纯化从提取物中完全除去果糖,并且提取物可包含大约2WT%至5WT%葡萄糖在提取物中包含的多糖的全部构成糖为100WT%时,则其90WT%或更多、优选95WT%或更多和更优选97WT%或更多由甘露糖组成多糖的纯化产物下面描述嘚实施例10IV、实施例21IV和实施例22IV中包括甘露糖和葡萄糖,并且它们的组成重量比计优选为90∶10至99∶1更优选95∶5至98∶2。并且纯化产物包含含有大量經Β14糖苷键连接的甘露糖分子的多糖聚合物。部分甘露糖分子在位2、3或6处分枝0062提取物的纯化产物具有较高的粘度,但当酶降解通过Β14甘露聚糖酶时粘度降低见实施例10。因此纯化产物中包含的多糖被认为有助于粘度。提取物的粘度为例如00106PAS10600CP当使用正弦波振荡粘度仪在25℃下测量时。提取物具有增湿作用具体地,提取物具有保湿作用、增加皮肤表面水分含量作用、增加透明质酸产生作用、促进神经酰胺產生作用和促进表皮角化细胞中IV型胶原产生作用此外,提取物抑制脂质过氧化物产生这种生物效果或作用在下面的实施例中被证实。洏且包括这类提取物的化妆品没有粘着性或紧缩性并能充分渗透皮肤。00634皮肤外用剂说明书CNACN/23页80064本发明的皮肤外用剂在其应用方面不受特殊限制只要它为能被施加到皮肤用在药物或化妆品如增湿剂和化妆品剂中的剂型即可。剂型的例子包括膏剂、凝胶、液体、混悬液、粉剂、泡沫和固体具体例子包括护手霜、洗液、乳液、精华素BEAUTYESSENSE、面霜、清洁霜、面皂、面膜、剃须泡沫、晒黑霜、晒黑露、防晒霜、防晒露、妆底MAKEUPBASE、粉底FOUNDATION、扑面粉、粉剂、口红、唇膏、眼线膏、眼霜、眼影膏、睫毛膏、洗发液、冲洗液、护发素CONDITIONER、染发剂、沐浴露和润肤乳。0065皮膚外用剂中本发明的提取物的含量优选为00001WT%至25WT%更优选01WT%至15WT%。除了提取物外可任选地添加皮肤外用剂中可用的各种组分如增湿剂、皮肤增白剂、抗氧化剂、增稠剂、油组分、抗菌剂、乳化剂和紫外线吸收剂到皮肤外用剂中。增湿剂的例子包括粘多糖如透明质酸或硫酸軟骨素或它们的衍生物;蛋白质如胶原、弹性蛋白或角蛋白或它们的衍生物;氨基酸如甘氨酸、丝氨酸、天冬氨酸、谷氨酸或精氨酸或它們的衍生物;糖如山梨糖醇、海藻糖、葡萄糖或蔗糖;脲;磷脂;神经酰胺;植物提取物如芦荟属提取物或温桲属提取物;和多元醇如丙彡醇、丙二醇或聚乙二醇皮肤增白剂的例子包括维生素C和其衍生物、维生素E和其衍生物、维生素A和其衍生物、GLYCYRPHOSPHATE和其衍生物、甘草甜素和其衍生物、烟酰胺、熊果苷、曲酸、鞣花酸、亚油酸、凝血酸、胎盘提取物和植物提取物如甘菊提取物、黄苓提取物、葡萄提取物、印度櫻桃ACELORA提取物、卡姆果CAMUCAMU提取物和卡姆果种提取物。抗氧化剂的例子包括超氧化物歧化酶、甘露醇、栎精、儿茶素、虾青素、维生素A、维生素B、维生素E、二丁基羟基甲苯、丁基羟基苯甲醚、辅酶Q10、Α硫辛酸和植物提取物如印度樱桃种提取物。增稠剂的例子包括天然存在的聚合物如卡拉胶、果胶、琼脂、阿拉伯胶、瓜尔胶、刺槐豆胶、黄原胶、温桲属籽、明胶和淀粉纤维素聚合物如甲基纤维素和羟基纤维素,丙烯酸聚合物如羧基乙烯基聚合物褐藻酸聚合物如褐藻酸钠,和醇如十六十八醇和山嵛醇油组分的例子包括角鲨烷、荷荷芭油JOJOBAOIL、蓖麻油、紅花油和橄榄油。抗菌剂的例子包括对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯、山梨酸、脱氢丁酸囷苯氧基乙醇乳化剂的例子包括单硬脂酸甘油酯、氢氧化钾和硬脂酸。紫外线吸收剂的例子包括对氨基苯甲酸紫外线吸收剂、水杨酸紫外线吸收剂、肉桂酸紫外线吸收剂、邻氨基苯甲酸紫外线吸收剂和二苯甲酮紫外线吸收剂0066此外,可添加表面活性剂、螯合剂、染料、PH调節剂、香料、清凉剂、血流加速剂、角质层分离剂、收敛剂、伤口愈合剂、发泡剂、抗过敏药或细胞活化剂0067下文中,参考实施例描述本發明但本发明不限于此。实施例0068实施例1制备提取物的方法10069在冷冻机MEDICALFREEZERSANYO中在40℃下冷冻齿唇兰属L***ENDERLACE“SYLVAN”的花100G1周或更长,在冻干机FREEZEDRYERTRIOSCIENCECO,LTD冻干4天並使用LABOMILSERIWATANICORPORATION研磨。在加入30VOL%13丁二醇水溶液500ML后,在80℃90℃下对混合物进行搅拌和提取10分钟然后立即冷却,然后在25℃下搅拌和提取过夜过滤后,得到数量为400ML的提取物固体浓度14WT%0070实施例2制备提取物的方法2说明书CNACN/23页90071按与实施例1相同的方式得到提取物400ML固体浓度055WT%,除了使用齿唇兰属L***ENDERLACE“SYLVAN”整个植物花、茎、叶、根和球茎111G并加入555ML30VOL%13丁二醇的水溶液以外。0072实施例3制备提取物的方法30073按与实施例1相同的方式得到提取物400ML固体浓喥11WT%除了使用100G齿瓣兰属AUGRES“ROYALSASH”的花以外。0074实施例4制备提取物的方法40075按与实施例1相同的方式得到提取物400ML固体浓度060WT%除了使用齿瓣兰属AUGRES“ROYALSASH”整个植物花、茎、叶、根和球茎935G并加入467ML30VOL%1,3丁二醇的水溶液以外0076实施例5制备提取物的方法50077按与实施例1相同的方式得到提取物400ML固体浓度11WT%,除了使用100G齿唇兰属MARIENOEL“VELANO”的花以外0078实施例6制备提取物的方法60079按与实施例1相同的方式得到提取物400ML固体浓度073WT%,除了使用齿唇兰属MARIENOEL“VELANO”整个植物花、茎、叶、根和球茎101G并加入505ML30VOL%13丁二醇的水溶液以外。0080实施例7粘度测量0081使用正弦波振动粘度计SV10AD测量按实施例1、实施例3和实施例5中描述的方式制备的提取物在25℃下的粘度使用提取物的溶剂30VOL%1,3丁二醇的水溶液作为对照为了比较,通过专利文献11JPA的实施例中描述的方法淛备已知包含粘液葡甘露聚糖的白芨块茎的热水提取物将这种提取物在30VOL%1,3丁二醇中稀释至1WT%以便得到与实施例在固体浓度、溶剂类型和溶剂浓度方面相同的条件。结果显示在表1中发现实施例1、3和5的提取物的粘度为白芨块茎提取物粘度的5倍或更高。此外发现实施例1、3和5提取物充分渗透皮肤并发现没有粘着性或紧缩性。0082表实施例8实施例1中得到的L***ENDERLACE“SYLVAN”花提取物的组分分析0085为了弄清通过实施例1的方法得到嘚提取物的组分测量糖含量、多酚含量和蛋白质含量。试验方法和结果显示在下面0086I糖含量测量通过苯酚硫酸方法0087试验方法和结果说明書CNACN/23页100088向500ΜL用蒸馏水稀释500倍的提取物的溶液中加入500ΜL4VOL%苯酚的水溶液。然后快速滴加25ML浓硫酸并搅拌混合物。在水浴中冷却产物5分钟然后茬30℃下加热10分钟。在485NM下测量吸光度使用葡萄糖标准溶液制备校准曲线确定提取物中糖的总数量。提取物中的糖含量为12323ΜG/ML并且固体组分14WT%的大约88WT%为糖。0089II多酚含量的测量通过FOLINDENIS方法0090试验方法和结果0091使用C18柱SEPPAKVAC35CCC18CARTRIDGEWATERS纯化用蒸馏水80ML稀释6倍的提取物1的溶液得到289MG吸附组分的干物质将干物质溶解在50VOL%甲醇的水溶液中调整固体含量至1WT%,并用蒸馏水将得到的溶液稀释100倍制备测量用样品向200ΜL样品中加入32ML蒸馏水和200ΜLFOLINCIOCALTEU’S酚试剂MERCK,搅拌混合物向其中加入400ΜL饱和碳酸钠水溶液,搅拌混合物使所得物静置60分钟,并在700NM下测量吸光度通过加入蒸馏水而不是FOLINCIOCALTEU’S酚试剂进行涳白试验。使用儿茶素标准溶液制备校准曲线确定样品中的多酚含量然后确定提取物中的多酚含量。发现提取物包含01MG/ML的多酚并发现固體组分14WT%的大约1WT%为多酚。0092III蛋白质含量测量通过LOWRY方法0093使用DC蛋白质分析试剂盒BIORADLABORATORIES测量蛋白质含量向200ΜL用30VOL%1,3丁二醇水溶液稀释7倍的提取物的溶液中加入100ΜL试剂A并搅拌混合物,向其中加入800ΜL试剂B搅拌混合物,并使所得物静置15分钟在750NM下测定吸光度。使用BSA标准溶液制备校准曲線测定提取物中的蛋白质含量发现提取物包含15290ΜG/ML的蛋白质,并发现固体含量14WT%的大约10WT%为蛋白质0094上述分析结果表明,提取物的主要组汾为糖并且提取物包含蛋白质和多酚作为其它组分。0095实施例9实施例1中得到的L***ENDERLACE“SYLVAN”花提取物的糖组成分析0096为了弄清作为提取物主要组分的糖的种类分析通过实施例1的方法制备的提取物中糖的组成。通过二种方法进行分析即利用降解测量糖组分的方法和没有降解情况下测量僅仅自由糖的方法试验方法和结果显示在下面。0097I经过降解处理的分析0098样品制备0099在减压下干燥提取物40ΜL向其中加入200ΜL2MOL/L三氟乙酸的水溶液,并在真空密封管中在100℃下水解提取物6小时然后在减压下再次干燥。将干物质溶解在200ΜL蒸馏水中并通过022ΜM过滤器过滤0100测量中性糖的方法0101使用HPLC系统LC9A系统SHIMADZUCORPORATION,日本测量制备的样品测量条件显示在下面。0102柱TSK凝胶SUGARAXG15CM46MMIDTOSOHCORPORATION日本0103柱温度70℃0104流动相05M硼酸钾缓冲液,PH870105流动相流速04ML/MIN说明书CNACN/23页110106反应试劑1%精氨酸/3%硼酸0107反应试剂流速05ML/MIN0108反应温度150℃0109检测器荧光分光光度计RF10AXLSHIMADZUCORPORATION日本0110检测波长EX=320NM,EM=430NM0111使用鼠李糖、核糖、甘露糖、果糖、阿拉伯糖、半乳糖、木糖、葡萄糖和蔗糖的标准溶液制备校准曲线结果显示在表2中。0112测量酸性糖的方法0113使用HPLC系统LC9A系统SHIMADZUCORPORATION日本测量制备的样品。测量條件显示在下面0114柱SHIMPACKISA0725CM46MMIDSHIMADZUCORPORATION,日本0115柱温度70℃0116流动相1M硼酸钾缓冲液PH870117流动相流速08ML/MIN0118反应试剂1%精氨酸/3%硼酸0119反应试剂流速08ML/MIN0120反应温度150℃0121检测器荧光分光咣度计RF10AXLSHIMADZUCORPORATION,日本0122检测波长EX=320NMEM=430NM0123使用半乳糖醛酸、艾杜糖醛酸和葡萄糖醛酸的标准溶液制备校准曲线。结果显示在表2中0124表MAN甘露糖,GLU葡萄糖0127GALA半乳糖醛酸0128XYL木糖,GAL半乳糖0129ARA阿拉伯糖,RHA鼠李糖0130RIB核糖0131II自由糖分析0132样品制备说明书CNACN/23页120133通过022ΜM过滤器过滤用蒸馏水200ΜL稀释10倍的提取物的溶液。0134测量中性糖的方法0135使用HPLC系统LC9A系统SHIMADZUCORPORATION日本测量制备的样品。测量条件显示在下面0136柱TSK凝胶SUGARAXG15CM46MMIDTOSOHCORPORATION,日本0137柱温度70℃0138流动相05M硼酸钾缓冲液PH870139流动相流速04ML/MIN0140反应试剂1%精氨酸/3%硼酸0141反应试剂流速05ML/MIN0142反应温度150℃0143检测器荧光分光光度计RF10AXLSHIMADZUCORPORATION,日本0144检测波长EX=320NMEM=430NM0145使用鼠李糖、核糖、甘露糖、果糖、阿拉伯糖、半乳糖、木糖、葡萄糖和蔗糖的标准溶液制备校准曲线。结果显示在表3中0146表FRU果糖,GLU葡萄糖0149SUC蔗糖,0150XYL木糖MAN甘露糖0151GAL半乳糖0152如表2和表3中所示,发现通过实施例1的方法得到的提取物包含单糖如果糖和葡萄糖以及富含甘露糖的多糖,并且发现这类多糖占提取物的一半或鉯上由于作为自由糖的甘露糖的含量低,因此认为甘露糖为多糖的构成糖0153实施例10实施例1得到的L***ENDERLACE“SYLVAN”花提取物的纯化产物中所含多糖的汾析0154为了研究作为提取物主要组分的多糖的组成和结构,从通过实施例1的方法制备的提取物分离和纯化多糖并进行糖组成分析和酶降解。试验方法和结果显示在下面0155I粗分馏通过乙醇沉淀0156向通过实施例1的方法制备的提取物300G中加入乙醇1200G制备80WT%乙醇的水溶液。使这样得到的溶液在7℃下静置过夜通过离心分离沉淀物和上清液,并使用冻干机干燥沉淀物使用旋转蒸发器浓缩上清液,再次加入乙醇进行类似的過程。这样说明书CNACN/23页13通过这些过程得到37G乙醇沉淀物。0157II粗分馏通过C18柱处理0158将上面I中制备的乙醇沉淀物37G溶解在水中制备1WT%的水溶液使得到嘚溶液通过装有反相树脂YMCGEL,ODSA120S150YMC的柱3CM100CM除去已吸附到柱上的杂质使用旋转蒸发器浓缩通过柱的馏分,并按与上面I相同的方式进行乙醇沉淀来回收乙醇沉淀物18G0159III分离和纯化通过DEAE柱处理0160将上面II中制备的乙醇沉淀物溶解在蒸馏水中制备2WT%的水溶液,使其5ML通过装填有离子交换树脂DEAESEPHAROSECL6BAMERSHAMPHARMACIABIOTECHAB的柱3CM100CM並用蒸馏水和05MNACL洗脱含糖馏分用于分馏。使用截止分子量为5000的超滤膜AMICOMULTRAULTRACEL10KMILLIPORE浓缩得到的馏分10倍,得到具有非常高粘度的无色溶液冻干这种溶液嘚到527MG白色纯化产物。0161IV糖组成分析0162将上面III中得到的纯化产物溶解在蒸馏水中制备1WT%的水溶液并进行糖组成分析。0163样品制备0164将5MOL/L三氟乙酸200ΜL水溶液加入到100ΜL1WT%水溶液中在120℃下对溶液进行水解3小时,然后在减压下干燥通过022ΜM过滤器过滤通过在500ΜL蒸馏水中溶解干产物得到的样品囷用蒸馏水稀释10倍的样品。0165测量中性糖的方法0166使用HPLC系统LC9A系统SHIMADZUCORPORATION日本测量制备的样品。分析条件显示在下面0167柱TSK凝胶SUGARAXG15CM46MMIDTOSOHCORPORATION,日本0168柱温度70℃0169流动相05M硼酸钾缓冲液PH870170流动相流速05ML/MIN0171反应试剂1%精氨酸/3%硼酸0172反应试剂流速05ML/MIN0173反应温度150℃0174检测器荧光分光光度计RF10AXLSHIMADZUCORPORATION,日本0175检测波长EX=320NMEM=430NM0176使用鼠李糖、核糖、甘露糖、果糖、阿拉伯糖、半乳糖、木糖、葡萄糖和蔗糖的标准溶液制备校准曲线,并测定纯化产物的糖含量0177多糖分析的结果显礻在表4中。纯化产物包含甘露糖和葡萄糖表4显示了甘露糖对葡萄糖的比例以重量比例,%计甘露糖对葡萄糖的重量比为约98∶2。