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TSA平板培养的制备过程中需要注意的步骤
2021-11-05 10:48:58  微生物基本知识
在TSA平板培养的过程中,首先使用试管、三角瓶、培养皿、烧杯、吸管等玻璃器皿。 这些器皿在使用前须根据不同的情况,经过一定的处理,清洗干净。 也进行包装,灭菌等准备完毕后,有些可以使用,那么,下面一起了解下TSA平板培养的制备过程中需要注意的步骤吧!
1、新买的玻璃器皿
TSA平板培养去除包装上的污垢后,请先用热肥皂水刷洗,用流水冲洗,然后在1~2%的工业盐酸中浸渍几个小时,去除游离的碱性物质,用流水冲洗。 容量较大的容器,例如较大的烧瓶、量筒等,只要在清洗后注入少许浓盐酸,旋转容器使盐酸附着在其内部表面,后倾几分钟除去盐酸,用水冲洗,倒着放入清洗架,使水干燥即可
2、用过的玻璃器具
TSA平板培养未受病菌和病菌污染的器具,使用后可以随时清洗,吸入化学试剂的吸管,可以先浸泡在清水中,达到一定量后再集中清洗。 可能被病原菌污染的器皿,须妥善消毒后,去污,用肥皂液冲洗,用流水冲洗。 未能用肥皂液清洗的容器,在清洗液中浸泡适当的时间后,用清水清洗。 洗涤液的主要成分是重铬酸钾和浓流酸,起到将有机物氧化成可溶性物质进行洗涤的作用。
清洗液有很强的腐蚀作用,使用时请注意不要接触衣服、身体和其他东西。
一、类型
TSA平板培养实验室制备的适合微生物生长和代谢产物积累的营养基质被称为培养基(Media )。 由于各类微生物对营养的要求不同,培养目的和检测需求不同,所以培养基种类很多。 我们可以根据某种标准,分为几种类型。
1、根据是否完全了解培养基组成物质的化学成分来区别。 可分为天然、合成和半合成培养基。
1 )天然培养基是利用各种动物、植物或微生物的原料,很难正确地知道其成分。 主要原料有牛肉膏、麦芽汁、蛋白胨、酵母膏、玉米粉、面筋、各种面包粉、土豆、牛奶、血清等。 配合这些物质虽然不能准确知道其化学成分,但一般营养比较丰富,微生物生长旺盛,且来源广泛,制备方便,所以比较常用,特别适合实验室常用培养基的制备。 稳定性经常受到生产工厂和批号等的影响。
2 )合成培养基是完全知道化学成分和量的培养基,由已知化学成分的化学药品制备。 此类培养基化学成分精确、重现性强,但价格高、微生物生长缓慢,仅适用于营养、代谢等科学研究。
3 )在合成培养基中加入某种天然成分或几种天然成分; 或者在天然培养基中,加入一种或几种已知成分的化学药品,就成了半合成培养基。 例如土豆的蔗糖培养基等。 这种培养基在生产实践和实验室中使用多。2、按物理状态划分,可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基。
1 )液体培养基呈液态,其中成分基本溶于水,无明显固态物,液体培养基营养成分分布均匀,容易控制微生物的生长代谢状态。
2 )向液体培养基中适量加入凝固剂,即可制成固体培养基。 常用的凝固剂有琼脂、明胶、硅胶等,琼脂常用,实际上应用非常广泛。 在实验室中,用于微生物的分离、鉴定、杂菌的检测、计数、保存、生物测定等。
3 )向液体培养基中加入少量凝固剂后,变为半固体。 以琼脂为例,其用量在0.2~1%之间。 这个培养基可以用来观察微生物的动力,也可以用来保存菌种。
二、TSA平板培养制造的基本方法和注意事项
1、处方的选择
同一培养基的配方在不同的作品中往往有一些差异。 因此,除须采用标准方法严格按照其规定配制外,一般都要尽量收集有关资料,进行比较核对,根据自己的使用目的进行选择,并记录其来源。
2、的制造记录
每次制造都须有记录。 包括名称、配方及其来源、各成分的品种、最终的pH值、消毒的温度和时间制造的日期和制造者等。 记录复印一份,原记录保存查阅,复印记录与制作的培养基一起保管,以防混乱。
3、成分的称呼
TSA平板培养培的各成分要准确称量,注意防止错乱,建议不要中断,一次完成。 把处方放在一边,每次计量完一个成分后在配方上做个记号,把需要的计量药品一次性收集起来,放在左侧,一个一个计量完之后移到右侧也可以。 完全取完之后,须再检查一次。
以上介绍的就是TSA平板培养的制备过程中需要注意的步骤,如需了解更多,可随时联系我们!

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