总二乙基蒽醌用途苷元三氯甲烷的颜色是什么

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2022-12-01 00:13 标签： 二甲苯磺酸铵对皮肤的作用

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1、陈羽迪212 生物制药（1 ）大黄中蒽醌类成分的提取、分离和鉴定实验报告实验目的1掌握蒽醌苷元的提取方法一双相酸水解法。2.掌握梯度PH萃取法提取分离大黄中各种蒽醌苷元的原理及操作方法。3.掌握羟基蒽醌类化合物的颜色反应及薄层色谱鉴别方法。实验器材材料及试剂：大黄粗粉、浓硫酸、 NaHC03、Na2CO3、NaOH、浓盐酸、乙酸乙酯、石油醚、乙醚、普通滤纸、薄层层析硅胶板（2.5 cm X 10 cm）、广泛PH试纸、剪刀、铅笔、尺子、点样毛细管、样品管等。仪器：500mL圆底烧瓶、球形冷凝管（30cm）、橡皮管、烧杯、滴管、层析缸（广口瓶）、250mL分液漏斗、布氏漏

2、斗、抽滤瓶、水浴锅、集热式磁力搅拌器、磁子、循环水式多用真空泵、铁架台等。实验原理大黄为蓼科植物，味苦,性寒，具有泻热通肠、凉血解毒、逐瘀通经等功效。其主要成分为为蔥醌化合物,含量约为3%5%，大部分与葡萄糖结合苷，游离苷元有大黄酸、大黄素、芦荟大黄素、大黄酚、大黄素甲醚等。其中，大黄酸具有羧基，酸性最强；大黄素具有炉酚羟基，酸性第二；芦荟大黄素连有羟甲基，酸性第三；大黄素甲醚和和大黄酚的酸性最弱。根据以上化合物的酸度差异，可用碱性强弱不同的溶液进行梯度萃取分离。OHHR1R2O大黄酸Ri=HR2=COOH大黄素Ri=CH3R2=OH芦荟大黄素Ri=CH2OHR2=H大黄素甲醚Ri=CH3R2

3、=OCH 3大黄酚Ri=CH3R2=H1. 提取原理双相酸水解法，为一相为与酸水不相互溶的有机溶剂，另一相为酸水，加热回流水解的方法。由于大 黄中的羟基蒽醌类化合物多以苷的形式存在，所以首先要将苷水解成苷元，本实验选用硫酸和乙酸乙酯作 为双相酸水解的溶剂，采用加热回流方法，提取大黄药材中的游离蒽醌类化合物。根据苷元不溶于水，可 溶于乙醚、乙酸乙酯等亲脂性有机溶剂的性质，即在加热回流提取过程中，稀硫酸可将蒽醌苷水解成苷元, 游离出来的蒽醌苷元随即溶于乙酸乙酯中，从而将蒽醌苷元提取出来。2. 分离原理5%碳酸钠溶液，只具有a位酚羟基的pH梯度萃取法 羟基蒽醌类化合物酸性强弱不同，用pH梯度法进行分

4、离。具有羧基或多个B位酚羟基的蒽醌可溶于5%碳酸氢钠溶液；具有一个B位酚羟基的蒽醌可溶于 蒽醌，酸性弱，只溶于氢氧化钠溶液。以分离酸度不同的蒽醌苷元。也可利用游离蒽醌的极性不同，采用 硅胶柱色谱法进行分离。（1）大黄中游离蒽醌的酸性强弱顺序大黄酸（一COOH）大黄素（B酚一0H）泸荟大黄素（醇一0巴大黄 素甲醚（0CH3尸大黄酚（一CH3）。（2）大黄中游离蒽醌的极性大小顺序大黄酸 大黄素芦荟大黄素 大黄素甲醚 大黄酚。大黄酚和大黄素甲醚酸性相近，但极性不同，可用硅胶柱色谱法进行分离。四、实验流程大黄素的提取、分离流程图大黄粗粉50g20%H2S04 100 ml乙酸乙酯250ml，水浴回流2

5、h,稍冷过滤药渣和乙酸乙酯提取液水洗至中性5%NaHCO3 萃取碱水层I HCI乙酸乙酯层5%Na2CO3大黄酸沉淀（粗品）水层乙酸乙酯层五、|HCl大黄素沉淀（粗品）水层|hci芦荟大黄素0.25% NaOH 萃取 3 次乙酸乙酯层5% NaOH萃取3次大黄酚、大黄素甲醚沉淀（混合物）乙酸乙酯层实验步骤与方法2.总蒽醌苷元的提取大黄粗粉50g,置500ml烧瓶中，加20%硫酸溶液100ml和乙酸乙酯250ml，水浴回流提取2个h (加磁子搅拌)，放置，冷后过滤，残渣弃去，乙酸乙酯提取液置分液漏斗中，分出酸水层，乙酸乙酯提取液用蒸馏水洗2次(每次20ml)，将乙酸乙酯液放置在锥形瓶中，密封。3

6、.游离蒽醌的分离与精制(1)大黄酸的分离和精制将乙酸乙酯提取液置500m1分液漏斗中，用 5% NaHCO溶液萃取三次(80ml, 60ml, 40ml )，合并碱液，在搅拌下滴加浓盐酸，调节ph= 2,放置，待沉淀析出完全后，过滤，并用少量水洗沉淀物至洗出液呈中性，60C干燥，得深褐色粉末，主为大黄酸。沉淀干燥后，样品加冰醋酸10ml加热溶解，趁热过滤，滤液放置析晶，过滤，用少量冰醋酸淋洗结晶，得黄色针晶为大黄酸。(2)大黄素的分离和精制经NaHCO溶液提取过的乙酸乙酯液，继用5% Na2CO3溶液萃取三次，每次用量 40ml，合并碱液，在搅拌下滴加浓盐酸，调节 ph=

7、抽滤，水洗沉淀物至洗出液呈中性,60 C干燥，沉淀经干燥后，用15ml丙酮热溶，趁热过滤，滤液静置，析出橙色针晶，过滤后，用少量丙酮淋洗结晶，得大黄素。(3)芦荟大黄素，大黄素甲醚和大黄酚混合物的分离经Na2CO3提取过的乙酸乙酯液，再用5% NaOH溶液提取三次，每次用量 40ml，合并后的碱液同(1)法处理，所得产品为黄色粉末，为芦荟大黄素、大黄酚和大黄素-6甲醚的混合物。3.游离蒽醌类化合物的鉴定(1)化学鉴定碱液试验分别取各蒽醌结晶少许置于小试管中，加lml乙醇溶解，加10%氢氧化钠溶液数滴， 观察颜色变化。羟基蒽醌类应呈红色。醋酸镁试验分别取各蒽醌结晶少许置于小试管中，各加乙醇lml

8、使溶解，滴加0. 5%醋酸镁乙醇溶液，观察颜色变化，羟基蒽醌应显橙色到蓝紫色。(2)色谱鉴定薄层色谱鉴定吸附剂：硅胶 G- CM Na板。甲醚和大黄酚的三 氯甲烷溶液及各相样品：上述分别获得的大黄酸、大黄素、芦荟大黄素、大黄素 应对照品的三氯甲烷溶液。展开剂：石油醚一 乙酸乙酯一醋酸(2 : 1： 0.2)。5 %醋酸镁甲醇溶液，斑点展开方式：上行展开。显 色：在可见光下观察，记录黄色斑点出现的位置，然后用浓氨水熏或喷显红色。实验结果记录：观察斑点颜色，记录图谱并计算Rm。八、实验现象pH12,四次水洗后的大黄粉回流过滤后得黑色残渣和黑色溶液。除去酸水层，水洗有机层，水洗前pH分别是PH34

9、PH56、pH67。水洗后慢慢分层，上层溶液为黑色，下层橙红色并含有少量杂质。后用5%勺NaHCO溶液萃取3次。上层为黑色溶液，中间有灰绿色的乳化层，下层是橙黄色溶液。加入少许2%NaCl溶液后中间的乳化层慢慢减少。碱水层加浓HCI时有大量气泡产生，静置溶液中出现少许黄色结晶,再调pH至23，得大黄酸。乙酸乙酯层用 5%勺NaaCO溶液萃取3次。上层为深褐色溶液，含有杂质，中间有乳化层，下层黑色溶液。得到的碱水层调节pH=2,静置后得黑色溶液并有少量黑絮状沉淀。抽滤得黑色结晶，为大黄素。乙酸乙酯层用0.25%的NaOH溶液萃取3次。上层为灰黑色，中间有乳化层，下层为黑色溶液。得到的碱水层调节

10、pH=2,静置后得黑色溶液并有少量黑絮状沉淀。沉淀过滤得黑色沉淀，为芦荟大黄素。再用5%勺NaOH溶液萃取3次。pH1314得到酒红色溶液，没有分层现象。过滤得深褐色沉淀物，进 行硅胶柱色谱。硅胶柱颜色是渐变的，由上到下依次是深褐色、橙色、黄色，收集到亮黄色液体。进行色谱鉴定。化学鉴定(用标准液)：碱液试验结果：大黄素标准液由亮黄变为粉红，大黄酸标准液、大黄酚标准液、芦荟大黄素标准液 都由亮黄变为橙红。醋酸镁试验结果：大黄素标准液由亮黄变为粉红，大黄酸标准液、大黄酚标准液、芦荟大黄素标准液都由亮黄变为橙红。七、数据记录、结果讨论与分析:数据：经测量得原点到展开剂边缘为6.3cmRf值的计算：R

大黄酚=5.25/6.3=0.83Rf标准大黄酚=4.9/6.3=0.78Rf标准大黄酸=4.0/6.3=0.63讨论：1. Rf与Rf标准大黄素甲醚数据偏差较大。可能是大黄素甲醚的分离不彻底造成的，也有可能是层析中点样的问题。2.酸性强弱：大黄酸 大黄素 芦荟大黄素 大黄酚-大黄素甲醚3. 注意事项：(1) 游离蒽醌的提取要控制温度，回流不宜太剧烈。(2) 要注意碱液浓度及萃取时的静置时间对实验结果的影响。(3) 萃取时容易

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