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  DuRed核酸染料特点

  ● 无毒性:DuRed核酸染料独特的油性和大分子量特点使其不能穿透细胞膜进入细胞内,艾姆斯氏试验结果也表明,该染料的诱变性远远小于EB。

  ● 灵敏度高:适用于各种大小片段的电泳染色,对核酸迁移的影响小于SYBR Green I。

  ● 稳定性高: 适用于使用微波或其它加热方法制备琼脂糖凝胶;室温下在酸或碱缓冲液中极其稳定,耐光性强。

  ● 信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。

  ● 操作简单:与 EB 一样,在预制胶和电泳过程中染料不降解;而电泳后染色过程也只需30 分钟且无需脱色或冲洗 ,即可直接用紫外凝胶透射仪观察。

  ● 适用范围广:可选择电泳前染色(胶染法)或电泳后染色(泡染法);适用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳;可用于 dsDNA、ssDNA 或 RNA 染色。

  ● 与EB有相同的光谱特性,无需改变滤光片及观察装置:标准的 EB 滤光片或 SYBR 滤光片都适用,使用与观察EB相同的普通紫外凝胶透射仪观察即可,在 300nm 紫外光附近可得到**激发。但是DuRed不能被488 nm氩离子激光器或相似波长的可见光完全激发,因此不推荐使用此类激发装置的成像系统。对于此类装置,我们推荐您使用DuGreen(Cat# 011或012),它和SYBR Green I的光谱相似,灵敏度相当,但更加稳定。

  DuRed核酸染料使用方法简介

  1.胶染法(用法同EB)(推荐方法)

  (2) 按照常规方法进行电泳。

  (1) 此方法染色染料用量相对较少。500 μL染料大约可以做100块 50mL的胶。

  (2) 由于DuRed具有良好的热稳定性,可以在热的琼脂糖溶液中直接添加,而不需要等待溶液冷却。摇晃,振荡或者翻转以保证染料充分混匀。也可以选择将DuRed储液加到琼脂糖粉末和电泳缓冲液中,然后用微波炉或其他常用方式加热以制备琼脂糖凝胶。DuRed兼容所有常用的电泳缓冲溶液。

  (3) 如果总是看到条带弥散或分离不理想,建议使用泡染法染色以确认问题是否与染料有关。如果染色后问题依旧存在,则说明问题与染料无关,请尝试:降低琼脂糖浓度;选用更长的凝胶;延长凝胶时间以保证边缘清晰;改进上样技巧或选择泡染法染色。

  (4) 此方法不适合预制聚丙烯酰胺凝胶,对于聚丙烯酰胺凝胶请使用泡染法。

  (1) 按照常规方法进行电泳。

  (3) 将凝胶小心地放入合适的容器中,如聚丙烯容器中。缓慢加入足量的3× 染色液浸没凝胶。室温振荡染色30min左右,**染色时间根据凝胶厚度以及琼脂糖浓度不同而略有不同。对于含3.5~10%丙烯酰胺的凝胶,染色时间通常介于30min到1h,并随丙烯酰胺含量增加而延长。

  (1) 用泡染法染色时,染料用量较多。单次使用的染色液可重复使用3次左右。

  (2) 3× DuRed染色液可以大量制备,在室温下避光保存直至用完。

  (1) 如果您使用的是紫外成像仪,请选择DuRed;如果您使用激光成像仪或希望在可见光下观测,请选择 DuGreen。

  (2) 在极少数情况下,质粒经某些酶切后的DNA样品会出现拖尾和分辨率降低,此时建议同时尝试两种染色方法以决定哪种方法更加合适。

广州市佛教协会与黄俏敏租赁合同纠纷上诉案

法院:广东省广州市中级人民法院

案号:(2011)穗中法民五终字第486号

上诉人(原审原告):广州市佛教协会。

法定代表人:耀智,会长。

委托代理人:冯钜深,广东联合发展律师事务所律师。

被上诉人(原审被告):黄俏敏。

上诉人广州市佛教协会因与被上诉人黄俏敏租赁合同纠纷一案,不服广州市荔湾区人民法院(2010)荔法民三初字第2170号民事判决,向本院提起上诉。

本院依法组成合议庭审理了本案,现已审理终结。

原审法院经审理查明:广州市荔湾区珠玑路114号是广州市佛教协会的产业。

黄俏敏从2003年开始承租该房屋。

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