第二军医大学 博士学位论文 转录因子Glil在乳腺癌细胞生物学行为中的作用及可能机制究 姓名：许娟 申请学位级别：博士 专业：内科学（内分泌与代谢性疾病） 指导教师：刘志民 201206 转录因子G1i1在乳腺癌生物学行为中的作用及可能机制 摘 要 乳腺癌的发病率在所有女性肿瘤中占首位，达22．9％，并且乳腺癌的致死率也在 女性癌症中排名第一。近年来乳腺癌在中国妇女中的发病率正悄然上升，在过去的十 年间，北京、上海乳腺癌的发病率上升分别超过2096及3096，已接近西方乳腺癌高发国 家的水平，因此加强对乳腺癌发生与发展的机制研究己刻不容缓。 胎形成后细胞的生长和分化过程中都起着重要作用。转录因子Glil既是Hh通路下游的 效应分子，也是该通路调节的靶蛋白，其表达也是Hh／Gli信号通路激活的标志。尽管 已有研究表明，Hh／Gli通路参与了乳腺的正常发育，且与乳腺癌的发生、发展密切相 关。例如，Glil及其他Hh通路成员在乳腺癌组织中常见异常表达；Glil的高表达可以 a，ERa)的表达。 receptor 促进乳腺癌细胞的增殖，并能抑制雌激素受体(estrogen 但是Glil对乳腺癌其他生物学行为的影响还不很清楚，对其作用的机制也缺乏深入的 研究。加之乳腺癌是一种包含多种类型的不均一性疾病。除了不同的病理类型外，还 可根据癌细胞雌激素受体(ER)的表达情况，分为雌激素依赖型(ERN性)和非依赖 型(ER阴性)乳腺癌两大类型。不同类型乳腺癌之问具有明显不同的生物学特性和临 否有不同的影响也不清楚。 MCF．7和T47D细胞是ER口EI性的雌激素依赖性细胞系，其分化程度相对比较高， 癌的增殖呈正相关。本课题在前期研究的基础上，拟进一步研究Glil在乳腺癌增殖、 粘附、迁移、抗凋亡等生物学行为中的作用及可能机制。我们首先建立了持续性稳定 亡等生物学特性的影响，继而通过全基因组寡核苷酸微阵列芯片分析，寻找转染Glil 表达质粒的MCF．7细胞与转染空载质粒的MCF．7细胞之间的差异表达基因，分析受 Glil调控的基因在乳腺癌生物学行为中的作用，并预测乳腺癌细胞中Glil的靶基因， 探i寸Glil影响乳腺癌生物学特性的可能机制，进一步研究Glil在乳腺癌发生发展中作 用，寻找乳腺癌的治疗的可能靶点。 为研究Glil在乳腺癌发生和发展中的作用，全文由以下三个部分组成： 第二军医大学博士位论丈 第一部分稳转高表达Glil对乳腺癌细胞增殖、迁移、粘附和凋亡的影响 目的：探讨Glil在乳腺癌细胞增殖、粘附、迁移、凋亡等生物学行为中的作用。 方法：采用细胞增殖实验、粘附实验、Transwell迁移实验等，与转染空载质粒的 对照细胞相比，观察稳定转染高表达Glil对乳腺癌MCF．7、T47D细胞株增殖、粘附、 法检测高表达Glil对PTX凋亡诱导下细胞存活率的影响。 结果：成功建立稳转高表达Glil的MCF．7、T47D细胞株及稳转空载质粒的对照细 胞。稳转高表达Glil促进乳腺癌细胞增殖，并能明显促进细胞的粘附；其中稳转高表 的存活率均高于对照组(P

第二军医大学 博士学位论文 转录因子Glil在乳腺癌细胞生物学行为中的作用及可能机制究 姓名：许娟 申请学位级别：博士 专业：内科学（内分泌与代谢性疾病） 指导教师：刘志民 201206 转录因子G1i1在乳腺癌生物学行为中的作用及可能机制 摘 要 乳腺癌的发病率在所有女性肿瘤中占首位，达22．9％，并且乳腺癌的致死率也在 女性癌症中排名第一。近年来乳腺癌在中国妇女中的发病率正悄然上升，在过去的十 年间，北京、上海乳腺癌的发病率上升分别超过2096及3096，已接近西方乳腺癌高发国 家的水平，因此加强对乳腺癌发生与发展的机制研究己刻不容缓。 胎形成后细胞的生长和分化过程中都起着重要作用。转录因子Glil既是Hh通路下游的 效应分子，也是该通路调节的靶蛋白，其表达也是Hh／Gli信号通路激活的标志。尽管 已有研究表明，Hh／Gli通路参与了乳腺的正常发育，且与乳腺癌的发生、发展密切相 关。例如，Glil及其他Hh通路成员在乳腺癌组织中常见异常表达；Glil的高表达可以 a，ERa)的表达。 receptor 促进乳腺癌细胞的增殖，并能抑制雌激素受体(estrogen 但是Glil对乳腺癌其他生物学行为的影响还不很清楚，对其作用的机制也缺乏深入的 研究。加之乳腺癌是一种包含多种类型的不均一性疾病。除了不同的病理类型外，还 可根据癌细胞雌激素受体(ER)的表达情况，分为雌激素依赖型(ERN性)和非依赖 型(ER阴性)乳腺癌两大类型。不同类型乳腺癌之问具有明显不同的生物学特性和临 否有不同的影响也不清楚。 MCF．7和T47D细胞是ER口EI性的雌激素依赖性细胞系，其分化程度相对比较高， 癌的增殖呈正相关。本课题在前期研究的基础上，拟进一步研究Glil在乳腺癌增殖、 粘附、迁移、抗凋亡等生物学行为中的作用及可能机制。我们首先建立了持续性稳定 亡等生物学特性的影响，继而通过全基因组寡核苷酸微阵列芯片分析，寻找转染Glil 表达质粒的MCF．7细胞与转染空载质粒的MCF．7细胞之间的差异表达基因，分析受 Glil调控的基因在乳腺癌生物学行为中的作用，并预测乳腺癌细胞中Glil的靶基因， 探i寸Glil影响乳腺癌生物学特性的可能机制，进一步研究Glil在乳腺癌发生发展中作 用，寻找乳腺癌的治疗的可能靶点。 为研究Glil在乳腺癌发生和发展中的作用，全文由以下三个部分组成： 第二军医大学博士位论丈 第一部分稳转高表达Glil对乳腺癌细胞增殖、迁移、粘附和凋亡的影响 目的：探讨Glil在乳腺癌细胞增殖、粘附、迁移、凋亡等生物学行为中的作用。 方法：采用细胞增殖实验、粘附实验、Transwell迁移实验等，与转染空载质粒的 对照细胞相比，观察稳定转染高表达Glil对乳腺癌MCF．7、T47D细胞株增殖、粘附、 法检测高表达Glil对PTX凋亡诱导下细胞存活率的影响。 结果：成功建立稳转高表达Glil的MCF．7、T47D细胞株及稳转空载质粒的对照细 胞。稳转高表达Glil促进乳腺癌细胞增殖，并能明显促进细胞的粘附；其中稳转高表 的存活率均高于对照组(P