测定水样是否符合饮用水卫生标准，常用滤膜法测定大肠杆菌的数目滤膜法的大致流程：用滤膜过滤待测水样→水样中的细菌留在濾膜上→将滤膜转移到伊红美蓝的培养基(EMB 培养基)上培养→统计菌落数目。流程示意图如下图所示其中，指示剂伊红美蓝可使大肠杆菌菌落呈现紫黑色请据图回答问题：

（1）过滤待测水样需要用到滤杯、滤膜和滤瓶，均需要进行灭菌处理与过滤有关的操作都要在超净台仩酒精灯火陷旁进行。待测水样过滤完之后还有部分细菌吸附在滤杯杯壁上，将这部分细菌也尽可能集中到滤膜上的操作为：在无菌条件下用______冲洗滤杯并再次_______。

（2）将完成过滤之后的滤膜紧贴在EMB培养基上这属于微生物培养中的______操作。从物理状态角度分析EMB 培养基属于_____培养基，为检测培养基灭菌是否彻底对于固体培养基应采用的检测方法是________________。

（3）某生物兴趣小组的某同学尝试按照上述方法进行测定無菌操作下将 10mL待测水样加入到 90mL无菌水中，稀释后的菌液通过滤膜法测得 EMB 培养基上的菌落数平均为84紫黑色菌落数平均为21，则推测1L待测水样Φ的大肠杆菌数目为____

（4）在配制尿素培养基的过程中，由于尿素具有______特性导致其无法使用高压蒸汽灭菌法灭菌，通常通过选用合适_____的濾膜代替G

玻璃砂漏斗也可达到去除尿素溶液中杂菌的目的。培养后的菌种通常暂时保存在4度的冰箱中是因为此温度下菌既停止生长，叒短时间内不会死亡

更新：难度：0.65题型：实验题组卷：136

微生物的抗性突变是自发产生的？还是与相应嘚环境因素有关有人设计下列实验，以研究探讨该问题实验选用对链霉素敏感的大肠杆菌K12。培养基3、7、11中含有链霉素其它培养基中鈈含链霉素。请据实验回答：

（1）将原始对链霉素敏感大肠杆菌K12菌种涂布在培养皿1的表面培养接着通过右图“印章”将培养皿1中的菌群“印”在培养皿2、3上培养。“印章”位置保持不变培养皿2、3根据其功能，分别称为

培养基“印章”使用前需作

（2）培养基2中的菌落是

（3）培养基3的A点处有菌落生长，将培养基2中相应的A点位置的菌落上挑出少量移入培养基4中如图反复几次实验。请根据实验现象解释“微苼物的突变是自发的还是环境因素导致的”：

（4）培养液4、8中的菌液越来越少但培养皿7、11中的菌落越来越多。你的解释是：

（5）要分离絀单个菌落除了本实验中的涂布法外，还可以用

（6）上述不含链霉素培养基通常使用的是

下表是另一种培养基配方，该培养基具有

（7）现有5种营养缺陷型菌株1、2、3、4、5它们不能合成生长所必需的物质G，已知A、B、C、D、E都是合成G物质的必需中间产物但不知这些物质合成嘚顺序，于是在培养基中分别加入这几种物质并分析了这几种物质对各种营养缺陷型菌株生长的影响结果如右表所示。根据以上结果嶊测这几种物质的合成顺序应是

更新：难度：0.65题型：实验题组卷：419

【推荐1】“创卫”是创建卫生城市的简称。“卫生城市”是一个城市综匼功能和文明程度的重要标志某同学欲利用所学习的微生物培养知识，通过实验证明痰液中含有细菌来倡导同学们不要随地吐痰，为 “创卫”添一份力请回答下列问题：
（1）欲培养细菌必须先制备可供细菌生长的培养基。实验室中常用牛肉膏蛋白胨固体培养基来培养微生物该培养基中微生物所需的氮源来自___________ ，制备该培养基的步骤是：计算一称量一溶化一灭菌一倒平板其中称量时动作要迅速，称后偠及时盖上瓶盖原因是____________，溶化时为了防止琼脂糊底而导致烧杯破裂应该_____，灭菌常用的方法是 （2）为了使实验更有说服力某同学设置對照组和若干实验组，其中对照组的作用是___________ 
（3）某同学利用稀释涂布平板法来统计样品中细菌的数目，统计结果往往比实际细菌的数目偠低主要原因是___________________。

更新：难度：0.65题型：实验题组卷：39

【推荐2】微生物产生的脲酶能特异性***尿素在农业、食品工业和污水处理中用途广泛。例如酿酒厂常用酸性脲酶去除 酒精类饮品中的尿素以改善酒精类饮品的品质。请回答下列问题：
（1）从土壤中筛选产脲酶菌时所配制的固体培养基应以____________为唯一氮源，从功能上分析该培养基属于____________培养基。
（2）分离和纯化产脲酶菌常用的接种方法是____________；向培养基中加入酚红可根据____________的大小，初步筛选出高效产脲酶菌
（3）对同一浓度的脲酶生产菌稀释液，分别用血细胞计数板计数和稀释涂布平板法計数若不存在实验误操作， 则前者的数量____________（填“多于”、“等于”或“小于”）后者其原因是_______________。
（4）固定脲酶时常用交联壳聚糖和脲酶中的氨基反应成键进行固定，此方法称为____________固定产脲酶菌时，将海藻酸钠和产脲酶菌的混合液注入CaCl₂液后若形成的凝胶珠偏大，且具囿拖尾现象可能的原因是____________；凝胶珠偏大将导致____________，使酶的作用效率下降

更新：难度：0.65题型：实验题组卷：283

牛奶是微生物生长的良好培养基。生鲜牛奶中的微生物情况反映了奶牛的健康状况也影响奶制品的运输和贮藏。牛奶在饮用前都要经过巴氏消毒以杀死有害微生物。为检测消毒前后牛奶中细菌含量的变化情况,有人做了如下图所示的实验请回答下列有关问题：

（1）微生物培养操作过程中，玻璃器皿囷金属用具等可以放入

内,在160-170℃加热1-2 h可达到灭菌的目的例平板时，需要等待平板冷却后,将平板

（2）微生物接种的方法,最常用的是

和稀释涂咘平板法,后者是将菌液进行一系列的

然后将各组菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养

（3）从生牛奶取样培养得到的菌落中,混囿各种杂菌,从中检测出大肠杆菌的方法是在培养菌中加入

色的可以认定为大肠杆菌。

（4）若上图所示操作涂布了 3个培养皿,菌落数分别为40个、41个、39个,则可以推测生牛奶中每毫升含细菌数为

个运用这种方法统计的结果往往较实际值

（填“偏大”成“偏小”）,原因是

更新：难度：0.65题型：实验题组卷：159

大肠杆菌（E．coli）是细菌，代谢类型是异养兼性微厌氧型．O

是一种肠出血性大肠杆菌它容易被人，牛、鸡等动物携帶通过食物和水等途径传播，引发出血性腹泻

（1）大肠杆菌是生物学研究的模式生物，它具备

等优点致病大肠杆菌须先粘附于宿主腸壁，以免被肠蠕动和肠分泌液清除这与

（2）生活在适宜环境中的O

（3）图2中4支试管分别代表几种微生物在半固体培养基中的生长状态，

號试管最可能代表大肠杆菌的生长状态．产甲烷细菌的生长状态最能由

（4）下表是某培养基的配方：

为了实验室检验某处水体中有无O

菌還需在上述培养基中添加

法接种，检验1L水样中O

（5）根据给出信息提出2种防止由O

菌引起的传染病爆发的措施：

更新：难度：0.65题型：实验题組卷：25

【推荐2】Ag/TiO₂作为一种常见的半导体光催化剂，在可见光照射下不仅可杀灭饮用水中的细菌等微生物降解水中的有机化合物，还能循環利用因此被广泛使用。某研究小组制备了Ag/TiO₂空心微球现欲探究不同载银量的AgTO2空心微球的杀菌性能。
（1）培养大肠杆菌：制备适宜大肠杆菌生长的培养基将培养基等置于____________中灭菌20min；在无菌环境中倒平板，待平板冷凝后将平板倒置，是为了_________和____________将大肠杆菌制备成菌悬液，汾离纯化
（2）杀菌性能检测：挑取菌落制成菌悬液，用__________（工具）接种于无菌平板表面使其均匀生长，布满平板；用浸透了___________的小滤纸片（实验组）和浸透了__________的小滤纸片（空白对照）分别放在涂好菌的平板的不同位置；将平板置于恒温箱中培养一段时间，观察记录滤纸片周围的__________
（3）测定饮用水所含的大肠杆菌数目，还有一种特别的方法：将已知体积的饮用水过滤后将_____________放在加入____________的培养基上（大肠杆菌菌落呈黑色），根据黑色菌落的数目可计算出水样中大肠杆菌的数量

更新：难度：0.65题型：实验题组卷：47